Кератопластика в ветеринарной офтальмологии

На правах рукописи

ПАВЛОВА ТАТЬЯНА НИКОЛАЕВНА

КЕРАТОПЛАСТИКА В ВЕТЕРИНАРНОЙ ОФТАЛЬМОЛОГИИ

Специальность 06.02.01- диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных

Автореферат

Диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Москва 2013

Работа выполнена на кафедре «Незаразные болезни» ФГБОУ ВПО "Московский государственный университет пищевых производств" Министерства образования и науки РФ.

Научный руководитель:	– доктор ветеринарных наук, профессор, академик РАСХН Уша Борис Вениаминович
Официальные оппоненты:	– Ватников Юрий Анатольевич, доктор ветеринарных наук, профессор, ФГБОУ ВПО «Российский университет дружбы народов», заведующий кафедрой «Клиническая ветеринария»
	– Ротанов Денис Александрович, кандидат ветеринарных наук, ООО «Центр ветеринарной офтальмологии доктора Шилкина А. Г.», ветеринарный врач
Ведущая организация:	ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина»

Защита состоится «27» июня 2013 года в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д 212.148.09. ФГБОУ ВПО "Московский государственный университет пищевых производств" по адресу: Россия, 109316, г. Москва, ул. Талалихина, д. 33, ауд. 290.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО "Московский государственный университет пищевых производств"

Автореферат разослан « » 2013г.

Автореферат размещен на сайте Министерства образования и науки РФ http://vak.ed.ru/ « » 2013 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор ветеринарных наук, профессор Андрианова Т. Г.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В последние годы в нашей стране предложено много новых способов консервативного лечения заболеваний роговой оболочки: различные новые лекарственные средства, физиотерапевтические методы, из передовых методов - плазма обогащенная тромбоцитами и др.. Однако в клинической практике встречается немало животных с поражением роговицы, у которых, несмотря на применение комплекса средств консервативной терапии, заболевание не поддается лечению и прогрессирует. Это приводит к значительному снижению зрения и риску потери глазного яблока. В этих случаях единственным методом радикального лечения, в зависимости от тяжести заболевания, является послойная или сквозная кератопластика.

При многих заболеваниях роговицы, таких как проникающие ранения глаза с дефицитом ткани роговицы, ожоги глазного яблока, язвы роговицы, осложненные десцеметоцеле и перфорации ее при инфекционных, трофических, аллергических и других кератитах, необходимо ургентное хирургическое вмешательство на роговой оболочке. (А.В. Судалин, Ю.Е. Батманов, 2012;Либман Е.С., Мелкумянц Т.А., 1988) Основной целью лечебной кератопластики является сохранение глазного яблока путём удаления патологического участка роговицы и замещения её дефекта.

Ранее с целью коррекции дефектов роговицы нами применялись различные материалы трансплантатов: конъюнктивальный лоскут «на ножке», аллоплант проф. Мулдашева (г. Уфа), биотрансплантат компании «Cook» (США), свежая донорская роговица. Все они имеют существенные недостатки в связи с невозможностью применения при сквозной кератопластике и тотальной послойной пересадке роговицы.

В гуманитарной офтальмологии при ургентных пересадках роговицы в качестве донорского трансплантата используется роговица высушенная над силикагелем. В отечественной и зарубежной литературе мы не нашли данных о применении роговицы высушенной над силикагелем у мелких домашних животных. Отсутствует методика консервации роговицы для животных, не разработана технология операции сквозной и послойной кератопластики с использованием данного материала, не описаны результаты клинического применения обезвоженной роговицы, не определены показания и противопоказания к хирургическому вмешательству.

Цели и задачи исследования.Разработка и внедрение в клиническую практику методики применения обезвоженной над силикагелем роговицы при операциях по сквозной и послойной кератопластике у мелких домашних животных.

Исходя из поставленной цели, были сформулированы следующие задачи:

1. подобрать наиболее доступный способ консервации донорской роговицы для собак и кошек;
2. провести гистологические анализ обезвоженной роговицы с целью определения морфологического состояния трансплантата на разных этапах консервации.
3. выполнить микробиологические исследования обезвоженной роговицы на предмет определения стерильности в процессе консервации и на различных сроках хранения.
4. разработать технологические этапы операции сквозной и послойной кератопластики в зависимости от тяжести патологии и исходного состояния роговицы;
5. определить показания и противопоказания к операции;
6. оценить непосредственные и отдаленные результаты хирургического лечения, проанализировать количество и характеринтра- и послеоперационных осложнений.

Научная новизна.

1. Впервые была разработана методика консервации обезвоженной донорской роговицы над силикагелем для применения в ветеринарной офтальмологии.
2. Впервые внедрена в клиническую практику операция сквозной и послойной кератопластики с использованием обезвоженной роговицы у мелких домашних животных.
3. Проведена оценка эффективности результатов вмешательства и состояния трансплантата в непосредственном и отдаленном послеоперационном периоде сроком до 3-х лет. Проанализирован характер и частота интра- и послеоперационных осложнений. Определены показания и противопоказания к кератопластике.
4. Проведенные исследования гистологического строения роговой оболочки показывают, что обезвоженная роговица сохраняет нормальную морфологическую структуру независимо от срока консервации.
5. На основе микробиологических исследований выявлено, что роговица при длительной консервации методом обезвоживания над силикагелем сохраняет свою стерильность. В консервированном материале отсутствует бактериальная микрофлора.

Теоретическая и практическая значимость.

1. Разработанная, апробированная и внедренная в практику система микрохирургических и лечебных мероприятий позволяет добиться высоких клинических результатов послойной и сквозной кератопластики с применением обезвоженной донорской роговицы, что является свидетельством практического решения проблемы.
2. Отработанные варианты радикальных реконструктивных вмешательств на роговице позволяют сохранить глаз как орган и в дальнейшем частично восстановить оптические функции.
3. Нами была улучшена и упрощена методика по обезвоживанию трупной роговицы над силикагелем. Данная модификация позволяет использовать этот метод консервации кадаверной роговицы широкому кругу ветеринарных офтальмологов.

Апробация работы. Основные положения работы доложены на:

• I Всероссийская межвузовская конференция ветеринарной хирургии (Москва, 2010);
• IX Международная научная конференция студентов и молодых ученых «Живые системы и биологическая безопасность населения»( Москва, 2011);

- II Всероссийская межвузовская конференция ветеринарной хирургии (Москва, 2011);

• XIX Московский международный конгресс ( Москва, 2011);

• XX Международная научная конференция студентов и молодых ученых «Живые системы и биологическая безопасность населения» (Москва, 2012);

• XX Московский международный конгресс ( Москва, 2012).

Внедрение результатов исследования.Результаты исследований внедрены в практическую работу «Центра ветеринарной офтальмологии доктора Шилкина А.Г.», а так же в учебный процесс и научно-исследовательскую работу по курсу частной хирургии кафедры «Незаразных болезней» ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств».

Публикация результатов исследований.По теме диссертации опубликовано 7 работ, в том числе 3 из них в изданиях рецензируемых ВАК РФ: «Ветеринария» №10, Москва 2012; «Актуальные вопросы ветеринарной биологии»№3 (15), Санкт-Петербург 2012; «Актуальные вопросы ветеринарной биологии»№4 (16), Санкт-Петербург 2012;

Основные положения выносимые на защиту:

• Методика обезвоживания роговицы;
• Гистологическое доказательство сохранения морфологической структуры обезвоженной роговицы при длительной её консервации;
• Микробиологическое доказательство стерильности обезвоженной роговицы;
• Техника микрохирургичекой операции сквозной и послойной кератопластики с применением обезвоженной донорской роговицы;
• Оценка непосредственных и отдаленных результатов сквозной и послойной кератопластики при различных патологиях роговицы, интро- и послеоперационные осложнения.

Объем и структура диссертации.Диссертация изложена на 150 страницах компьютерного текста и включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, библиографический список включает наименования работ, из них - 63 зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована рисунками и фотографиями.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнялась на кафедре незаразных болезней ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств». Экспериментальная часть выполнялась на базе «Центра ветеринарной офтальмологии доктора Шилкина А.Г.», в лаборатории «Веттест» и в НИИ глазных болезней РАМН.

На этапе морфологического исследования обезвоженной и регидратированной роговицы в разные сроки консервации эксперимент проводился на 10 роговицах кроликов. Данное исследование проводилось в течение 2-х лет.

На этапе бактериологического исследования глаз донора и влияния обезвоживания на микрофлору эксперимент проводился в два этапа. На первом этапе исследовали степень загрязненности трупных глаз бактериальной флорой и воздействие на неё дезинфицирующих средств и антибиотиков. Данное исследование проводилось на 67 кадаверных глазах. На втором этапе изучали влияние обезвоживания силикагелем на выживаемость золотистого стафилококка, нанесенного на роговицу до её обезвоживания. Для постановки данного эксперимента мы провели 50 опытов на роговицах кадаверных глаз, 25 опытов с силикагелем и столько же без силикагеля.

На этапе клинических исследований приживления обезвоженной донорской роговицы мы провели эксперимент на 52 кроликах (самцы). В клинической практике произведено 120 операций по послойной кератопластике и 68 операций по сквозной кератопластике на 150 животных (кошки и собаки).

Хирургическому лечению были подвергнуты животные с обширными глубокими язвами роговицы из них послойная кератопластика на 120 глазах (64%) и сквозная кератопластика на 15 глазах (8%) и корнеальными секвестрами на всю глубину роговицы 53 глаза (28%) сквозная кератопластика. В соответствии с этим выделено 2 клинические группы наблюдения.

Все операции производились с лечебной целью (100%). В 48 случаях пересаженная роговица имела 6-6,5 мм в диаметре; в 76 случаях – 7-7,5 мм; в 38 глазах – 8,0 мм; в 21 глазу – 10 мм. В 5 случаях пересаженные роговичные диски 13 мм выполняли роль биологической повязки.

Оперированные нами больные (кошки и собаки) имели крайне разнообразные клинические проявления роговичной патологии. Кроме того, они отличались друг от друга по возрасту, соматическому статусу и способам предшествовавшего консервативного лечения, этиологии заболевания и другим факторам. Ведущими отличительными признаками на наш взгляд являлись этиология и тяжесть поражения роговой оболочки. В таблице 1 показано общее количество больных, операций и оперированных глаз в разных группах наблюдения.

Таблица 1

Общая характеристика клинического материала

Группа больных по этиологическому фактору поражения роговицы	Количество больных		Количество прооперованных животных всего	Количество глаз
	собаки	кошки
Не перфарирующие язвы роговицы	59	42	101	120
Перфарирующие язвы роговицы	7	6	13	15
Корнеальный секвестр на всю глубину роговицы	-	36	36	53

Возрастная характеристика больных к моменту заболевания и ко времени операции представлены в таблице 2. Операции у котят и щенков составили, животные старше 12 лет. Основная часть оперированных животных представлена в возрасте от 5 до 8 лет.

Таблица 2

Возраст животных к моменту операции

Группа больных по этиологическому фактору поражения роговицы	Собаки				Кошки
	До 1 г	От 1 до 5лет	От 5 до 8 лет	Старше 12 лет	До 1 года	От 1до 5лет	От 5 до 8лет	Старше 12 лет
Не перфарирующие язвы роговицы	10 (16%)	5 (7,5%)	36 (54,5%)	8 (12%)	4 (5%)	3 (3,5%)	28 (33%)	7 (8%)
Перфарирующие язвы роговицы	-	1(1%)	4(6%)	2 (3%)	2 (3%)	1 (1%)	2 (3%)	1 (1%)
Корнеальный секвестр на всю глубину роговицы	-	-	-	-	6 (7%)	3 (3,5%)	23 (27%)	4 (5%)
Всего	10	6	40	10	12	7	53	12