Клинико-морфологические проявления опухолей и опухолеподобных состояний молочной железы у кошек в г. перми

На правах рукописи

ВОЛКОВ СЕРГЕЙ ВЯЧЕСЛАВОВИЧ

КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ ОПУХОЛЕЙ И ОПУХОЛЕПОДОБНЫХ СОСТОЯНИЙ МОЛОЧНОЙ

ЖЕЛЕЗЫ У КОШЕК В г. ПЕРМИ

16.00.02 – патология, онкология и морфология животных

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Барнаул - 2009

Работа выполнена на кафедре инфекционных болезней ФГОУ ВПО «Пермская ГСХА»

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор

Татарникова Наталья Александровна

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, доцент

Медведева Лариса Вячеславовна

кандидат ветеринарных наук

Костылева Оксана Александровна

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Тюменская государственная сельскохозяйственная академия»

Защита диссертации состоится «18» декабря 2009 года в 1000 часов на заседании диссертационного совета Д 220.002.02 при ФГОУ ВПО «Алтайский государственный аграрный университет» (656922, г. Барнаул, ул. Попова, 276, факс 31-06-36).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института ветеринарной медицины Алтайского государственного аграрного университета (656922, г. Барнаул, ул. Попова, 276).

Автореферат разослан «___» ноября 2009 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Барышников П.И.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. В настоящее время у кошек получили широкое распространение онкологические процессы в различных органах и тканях. При этом частота встречаемости онкологических заболеваний с каждым годом растет. Ведущее место в этой патологии приходится на долю опухолевых и опухолеподобных состояний в молочной железе.

Ветеринарная онкология сравнительно молодая наука, которая совершенствуется из года в год. Изобретение новых методов биопсии, хирургического удаления опухолей, новых химиотерапевтических и гормональных препаратов, применяемых для лечения опухолей и их метастазов, требует от ветеринарного врача онколога, или ветеринарного врача общей практики знаний о морфологическом строении опухоли, этапах развития опухолевого узла и основных причинах его возникновения. Учащение случаев обращений в ветеринарные клиники владельцев кошек с опухолью молочной железы, провоцирует повышенный профессиональный интерес у ветеринарного врача к морфологическому строению опухоли молочной железы, для подбора оптимального метода лечения и прогнозирования течения и исхода болезни. Что в свою очередь требует от ветеринарного патологоанатома и патоморфолога все больше знаний о строении опухоли, ее формах, типах роста и прочих морфологических проявлений опухолевого узла.

На сегодняшний день, опухоль молочных желез более широко изучается в гуманитарной медицине, а среди животных они достаточно полно изучены у собак. Широких масштабов приобрело изучение морфологии опухоли молочной железы у собак, как среди российских (Герасименко И.И., Миронова А.А., 2008), так и зарубежных ученых (Нейл Т. Горман, 2003; Джейн М. Добсон, 2003). При этом за базисную основу берутся труды исследователей гуманитарной медицины, так как структура опухоли едина.

Однако сообщений о морфологии опухолей и опухолеподобных состояний молочной железы у кошек в научной литературе практически нет, а немногочисленные сведения достаточно противоречивы. Так, например, как сообщает Нейл Т. Горман (2003), у кошек новообразования молочных желез встречаются сравнительно редко, они составляют примерно 25 случаев на 1 млн. кошек, поэтому информации о них очень мало, в то же время Т.Дж. Граффидд-Джонс (2002) утверждает, что опухоль молочной железы частое заболевание кошек, особенно стареющего возраста, при этом опухоли носят больше злокачественный характер.

Таким образом, в связи с участившимися случаями опухолей молочных желез у кошек, многообразием форм и методов лечения рака и скудной научной информации о морфологической характеристике опухолей, возникает проблема выбора метода лечения, и прогнозирования заболевания, основанная на знании ее гистологических особенностей в условиях конкретного региона.

Цель и задачи исследования. Целью данной работы явилось изучение клинико-морфологического проявления опухолей и опухолеподобных состояний молочной железы у кошек в г. Перми.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. выявить частоту встречаемости опухолей и опухолеподобных состояний молочной железы у кошек разных возрастных групп;

2. раскрыть основные предрасполагающие факторы возникновения опухолей и опухолеподобных состояний молочной железы у кошек;

3. изучить клиническое проявление опухолей и опухолеподобных состояний молочной железы у кошек, в городе Перми;

4. определить характер патоморфологических изменений молочной железы у кошек при опухолях и опухолеподобных состояниях молочной железы.

Научная новизна работы. Впервые изучено распространение опухолей и опухолеподобных состояний молочной железы у кошек в условиях города Перми.

Определены основные морфологические критерии опухолей и опухолеподобных состояний молочной железы кошек, установлена их роль в дифференциальной диагностике заболевания.

Разработана классификация раковых опухолей молочной железы по системе TNM.

Практическая значимость работы. Результаты проведенных исследований позволяют установить критерии для дифференциальной диагностики опухолей и опухолеподобных состояний молочной железы у кошек, включая результаты лабораторных исследований и морфологических изменений.

Основные материалы диссертационной работы используются в учебном процессе при чтении лекций, проведении лабораторно-практических занятий и при выполнении научных исследований аспирантами и соискателями Пермской, Тюменской и Уральской ГСХА.

Создана музейная коллекция гистологических препаратов по опухолям и опухолеподобным состояниям молочной железы кошек.

Апробация работы. Результаты исследований доложены и одобрены на Региональной конференции молодых ученых «Актуальные вопросы сельского хозяйства» (Тюмень, 2007), Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых, аспирантов и студентов (Пермь, 2008), Всероссийской научно-практической конференции «Инновационный потенциал аграрной науки – основа развития АПК» (Пермь, 2008), Научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарно-зоотехнической науки и практики» (Екатеринбург, 2008).

Публикации результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 6 научных работ.

Основные положения, выносимые на защиту.

- Распространение и этиологические факторы, способствующие возникновению опухолей молочной железы у кошек

- Клинические особенности проявления опухолей и опухолеподобных состояний молочной железы у кошек;

- Патоморфологическая характеристика изменений в тканях молочной железы при злокачественных, доброкачественных опухолях и опухолеподобных состояний молочной железы у кошек.

- Критерии дифференциальной диагностики опухолей и опухолеподобных состояний молочной железы у кошек.

Объем и структура диссертации. Работа выполнена на 131 странице компьютерного текста и включает общую характеристику работы, обзор литературы, результаты собственных исследований, обсуждение полученных результатов, выводы и практические рекомендации. Работа иллюстрирована 55 рисунками и 11 таблицами. Список используемой литературы включает 152 источника из них 32 иностранных.

2. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1 Материалы и методы исследований

Выполненное нами комплексное исследование охватывает кошек с онкологическими и опухолеподобными заболеваниями молочной железы в городе Перми.

Обследованию подверглись 125 кошек в возрасте от 2 до 20 лет, с выявленными онкологическими заболеваниями тканей молочной железы. Обследование и исследование проводилось на базе кафедры инфекционных заболеваний животных факультета ветеринарной медицины Пермской ГСХА и частной ветеринарной клиники «Единорог», которая находится в Кировском районе г. Перми.

Диагноз опухоль молочной железы поставлен по клинической картине заболевания, а так же по результатам гистологического исследования ткани опухоли молочной железы после ее хирургического удаления. Базисом для классификации опухолей молочной железы у кошек стали Международная гистологическая классификация опухолей и опухолеподобных процессов молочной железы ВОЗ, 2-е издание. (Женева 1981, русский вариант 1984) и Атлас опухолевой патологии «Опухоли молочной железы» (П.П.Розен и Х.Ф.Оберман, 1992).

Ткань опухоли молочной железы для исследования получали от больных кошек путем биопсии. При выполнении работы мы использовали:

1. Игловую биопсию;
2. Эксцизионную биопсию (полное хирургическое иссечение опухоли).

При проведении игловой биопсии использовались иглы Tru-Gut (Travenol Laboratories, USA), предложенные Ричардом А.С.Уайтом, которые имеют различную длину и диаметр 14G. В случае поверхностной биопсии (собственно ткани молочной железы), использовалась местная анестезия, в случаях глубокой биопсии (подмышечные лимфоузлы), животное находилось под общим пропофоловым наркозом. Иглы Tru – Gut, одинаковы по строению и устройству с другими иглами для биопсии. Поэтому техника взятия биопсии стандартная: игла вводится в толщу ткани опухоли, поворачивается на 360 градусов и достается из ткани, при этом в обтураторе иглы, который защищен гильзой, остается образец исследуемой ткани. Данный метод биопсии использовался лишь в случае, когда опухоль невозможно было удалить хирургически из-за ее большого размера, плохого состояния животного, отказа владельца животного от операции.

Но в большинстве случаев использовался эксцизионный метод биопсии. Данный метод биопсии заключается в полном хирургическом удалении (иссечении) опухолевой ткани, что для лечения опухолей молочной железы является лучшим вариантом. Более того, данный метод позволяет более точно установить диагноз, поскольку исследуется вся опухоль со всеми прилегающими тканями и образцы для гистологического исследования можно взять со всех сторон опухоли.

Удаление (иссечение) опухолей молочных желез у кошек проводилось под общей анестезией. В качестве наркоза использовался препарат Пропофол. Местная анестезия проводилась 0,5% раствором новокаина. Удаление опухоли проводилось совместно с прилегающими тканями, к которым она фиксировалась. Так же во время удаления опухоли удалялись и регионарные лимфатические узлы.

Опухолевая ткань отбиралась и у кошек, к которым была применена эвтаназия в связи с запущенной стадией или с наличием метастазов в отдаленных органах. Подобный материал взят от 10 трупов кошек.

Для проведения научных исследований после оперативного вмешательства или биопсии, фрагмент молочной железы, как правило, с лоскутом кожи, соском, прилегающими тканями и лимфатическим узлом, помещался в 4% раствор формальдегида. В этот же день проводилась вырезка материала с обязательным включением кожи, соска и границ опухолевой ткани с целью уточнения особенностей роста опухоли по отношению к окружающим структурам. Далее осуществлялась проводка материала по спиртам возрастающей крепости для обезвоживания ткани. После чего проводилось уплотнение ткани путем заливки парафином. С полученных парафиновых блоков изготавливались срезы толщиной 4-5 микрон на микротоме-полуавтомате фирмы Leica.

Срезы окрашивались:

- гематоксилином и эозином (обзорная методика) – сочетает в себе основной и кислый красители. Позволяет выявить почти все клетки и неклеточные структуры. Ядра, при этом методе окрашивания, приобретают сине-фиолетовый цвет, а цитоплазма – желтовато-розовый цвет.

- по Ван Гизон - красителем в данном методе является смесь пикриновой кислоты и кислого фуксина. В препаратах, окрашенных данным методом, коллагеновые волокна (содержащиеся в межклеточном веществе соединительной ткани) окрашиваются в ярко – красный цвет, а элементы других тканей (например, мышечные волокна) в желтый. Данный метод применяется с целью уточнения степени выраженности склеропластических процессов и степени инвазии опухолевых клеток в структуры молочной железы.

Полученные срезы исследовались на световом микроскопе фирмы Leica с окуляром х10, при увеличениях объектива х5; х40; х100. В каждом случае проводилось морфологическое описание объекта, выставлялся соответствующий патолого-анатомический диагноз. Анализ изображения проводился на компьютере «Pentium-3», все исследованные объекты фотографировались и сохранялись на съемном источнике информации.

С целью выяснения динамики развития и выявления основных форм патологии молочной железы у кошек, полученный материал был разделен на несколько групп.

Первые три группы наблюдений включают в себя дисгармональные, доброкачественные процессы, которые, по сути, являются часто облигатным предраком.

Таблица 1. Группы форм патологии молочной железы.

Группа	Форма патологии	Количество случаев	% от общего числа кошек
I	Протоковые папилломы	12	9,6
II	Протоковая киста	6	4,8
III	Фиброзно-кистозная мастопатия	23	18,4
IV	Протоковый рак	52	41,6
V	Аденокистозная карцинома	8	6,4
VI	Дольковый рак	6	4,8
VII	Плоскоклеточный рак	6	4,8
VIII	Железистоклеточный рак	2	1,6
IX	Низкодифференцированный рак по типу скирра	6	4,8
X	Опухоли мезенхимального гистогенеза (доброкачественные).	4	3,2