Этиопатогенез и неспецифическая профилактика опухолевых заболеваний репродуктивных органов у кур

На правах рукописи

ПОЛЬСКИХ АННА БОРИСОВНА

ЭТИОПАТОГЕНЕЗ И НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА ОПУХОЛЕВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ РЕПРОДУКТИВНЫХ ОРГАНОВ У КУР

16.00.02. патология, онкология и морфология животных

Автореферат

диссертации на соискание учёной степени

кандидата ветеринарных наук

Барнаул - 2009

Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Алтайский государственный аграрный университет» (ФГОУ ВПО АГАУ) на кафедре хирургии и акушерства

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук,

Федотов Сергей Васильевич

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Овчаренко Нина Дмитриевна

доктор ветеринарных наук, профессор,

заслуженный деятель науки РФ,

Бессарабов Борис Филлиппович

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Красноярский государственный

аграрный университет»

Защита диссертации состоится «__ » __ 200 г. в _ _ часов на заседании диссертационного совета Д 220.002.02 при ФГОУ ВПО «Алтайский государственный аграрный университет» (656922, г. Барнаул, ул. Попова 276 факс 31-06-36).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института ветеринарной медицины Алтайского государственного аграрного университета (656922, г. Барнаул, ул. Попова 276).

Автореферат разослан « » _ _ 200 г.

Учёный секретарь

диссертационного совета Барышников П.И.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Птицеводство является перспективной отраслью сельского хозяйства, что связано с промышленным содержанием, кормлением и эксплуатацией кур. В то же время получение сверх нормы количества яиц и приростов от одной птицы, при несоблюдении зоогигиенических норм в птичниках и несбалансированности рациона, является основополагающим в снижении иммунного статуса организма и как следствие - увеличении процента падежа, заболеваемости.

В последние годы особое внимание уделяется исследованиям, проводимым в следующих направлениях: раскрытие биологических механизмов трансформации нормальной клетки в злокачественную; выяснение иммунологических особенностей при опухолевых болезнях; создание надёжных методов диагностики; выяснение путей распространения и разработка научно обоснованной системы борьбы с опухолями птиц (С.И. Кулинич, 1990, К.М. Пожарийский, 2000, З.Ш. Гилязитдинова, 2000,С.И. Лютинский, 2001, М.Г. Домшлак, 2003, Т.Н. Попова, 2008, Lovacs, A., 2007, Moulton, J., 2008).

Сложность решения проблемы новообразований объясняется следующим: отсутствием полных данных о причинах и механизмах развития опухолей; длительным бессимптомным течением болезни; отсутствием радикальных профилактических и эффективных лечебных средств (К.М. Пожарийский, Е.Е. Леенман, 2000).

Профилактические методы борьбы с опухолями на данный момент не доработаны, а развитие неоплазий считается последствием заболеваний вирусной этиологии (Соловьёв Ю.В.,1989, Бурба Л.Г., 1988 Коровин Р.Н., Зеленский В.П., 1984). По мнению многих авторов основой в профилактике данного вида заболеваний является повышение резистентности организма, за счёт сбалансированного кормления, путём применения иммуномодуляторов (Перчиков И.В., 2005, Яй Станислас, 2002). Использование препаратов данной группы, не только природного (мумиё, женьшень и т. д.), но и синтетического происхождения (цитостатики: эпирубицин, цитарабин, лигфол, полиоксидоний и т. д.), обладающих адаптогенным действием связано с содержанием биологически активных веществ, особенно в препаратах природного происхождения.

Исходя из вышеизложенного, цель настоящего исследования: этиопатогенез и неспецифическая профилактика опухолевых заболеваний репродуктивных органов у кур.

Задачи исследования:

1.Изучить степень распространения опухолевых заболеваний репродуктивных органов у кур на птицефабриках Алтайского края.

2.Анализ данных гематологических и патоморфологических исследований у кур с опухолевыми заболеваниями репродуктивных органов.

3.Изучить влияние лимонника китайского и витаминного препарата Роминикса А на частоту возникновения опухолей репродуктивных органов кур в условиях промышленного содержания.

Научная новизна работы. Впервые изучена и проанализирована степень распространения опухолевой патологии репродуктивных органов у различных половозрастных групп кур в условиях птицефабрики ООО «Сибагропрод НЗ» Павловского района Алтайского края с применением системного подхода. Выявлено и математически доказано наличие взаимосвязи между возникновением и развитием опухолевой патологии у кур, протекающей на фоне нарушения белкового и витаминного обменов в организме, их возрастом и полом, содержанием и влиянием использования препарата настойки лимонника китайского на частоту их возникновения.

Изучена степень воздействия полноценности кормления и использования лимонника китайского в качестве иммуномоделирующего препарата при опухолевой патологии, витаминном, микроэлементном обменных нарушениях (биохимические и морфологические показатели крови, гистологическая структура тканей организма кур), уровень естественной резистентности, продуктивные качества кур. Разработан способ применения лимонника китайского при низких показателях резистентности организма кур. Дана экономическая оценка разработанному способу.

Практическая значимость работы. Выявлены степень влияния возраста и содержания на состояние резистентности организма птиц и возникновение у них опухолевой патологии репродуктивных органов, что может использоваться практикующими ветеринарными врачами Алтайского края и в учебном процессе ФГОУ ВПО АГАУ.

Утверждены методические рекомендации «Профилактика опухолевых заболеваний у кур- несушек» в 2007 году на заседании учебно-методического совета ИВМ АГАУ (протокол №79 от 05 февраля 2007 г.).

Предложенный способ применения лимонника китайского в виде 0,002% водного раствора в расчёте по 2 мл на 5 кг живой массы птицы, витаминного комплекса «Роминикс А» (2 мл на 5 кг живой массы) при скрытых формах опухолей репродуктивных органов, позволяет повысить показатели уровня обмена веществ и естественной резистентности, яичную продуктивность кур на 17,7 %, увеличить срок их эксплуатации, снизить затраты кормов на производство яиц, увеличить приросты на 40 %.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и одобрены на: научной конференции в г. Уфа (2003 г.), на пятой городской научно – практической конференции «Молодёжь - Барнаулу» (2003г.), международной научно - практической конференции, посвященной 100 – летию профессора В.Я. Суетина в г. Улан – Удэ (2004 г.), научно – практическом журнале «Птицеводство» (2007г.).

Основные положения, выносимые на защиту:

1.Степень распространения опухолевых заболеваний репродуктивных органов у кур на птицефабриках Алтайского края.

2.Патоморфологические особенности опухолевых заболеваний репродуктивных органов у кур.

3.Влияние лимонника китайского и витаминного комплекса «Роминикс А» на частоту возникновения опухолей репродуктивных органов у кур в условиях промышленного содержания.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ, из них 1 статья в рецензируемом издании («Птицеводство» № 5, 2007г.), входящем в основной перечень, рекомендуемый ВАК РФ.

Структура и объём работы. Диссертационная работа изложена на 117 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений. Работа иллюстрирована 18 таблицами и 41 рисунком. Список использованной литературы включает 119 источников, в том числе 20 зарубежных.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материал и методы

Исследования проводились в условиях птицефабрик ООО «Сибагропрод НЗ» и «Молодёжная». Исходным материалом для опыта служили куры кросса «Родонит», «Хайсекс белый» в возрасте 150 – 380 дней, с явно выраженными признаками дистрофии, низкими показателями яйцекладки и привесов, новообразованиями. Группы птиц формировали и постановку опытов осуществляли в соответствии со схемой (рисунок 1).

При выявлении различных форм опухолей использовали гистологическое и гистохимическое исследование изменённых органов и тканей тушек кур. Лабораторные исследования питательности кормов, показателей микроклимата проводили в зооветеринарной лаборатории птицефабрики ООО «Сибагропрод НЗ», крови – в Алтайской Краевой ветеринарной лаборатории, госпиталя ФГУЗ МСЧ ГУВД АК, Краевого диагностического центра. При проведении опыта изучали влияние препарата настойки лимонника китайского в концентрации 0,002% водного раствора, витаминного комплекса «Роминикс А», на резистентность, смертность, продуктивность, показатели крови, где определяли лейкоциты с её формулой, показатели гемоглобина, концентрацию глюкозы при заболевании и после курса лечения.

Препарат лимонник китайский - органо – минеральный комплекс биологически активных веществ, содержит около 30 различных химических соединений. Значительный вклад в суммарный фармакологический эффект вносят обнаруженные в лимоннике кумарины, витамины: каротиноиды (провитамин А), Р (915 мг%), В1 0,210 мг%, В12, С (аскорбиновая кислота), Е (токоферол), органические кислоты: лимонная, щавелевая, лишайниковая, винная (от 0,5 до 15,2%), бензойная кислота (4,20-5,8%), которая в свободном виде встречается довольно редко. При проведении опыта учитывали сроки выздоровления, биохимические, морфологические и иммунобиологические показатели крови, концентрацию витамина Е и А, лизоцима, бактерицидную и комплиментарную активность, концентрацию иммуноглобулина.

Учётный период опыта составлял 6 месяцев. Взятие крови на гематологические показатели проводили в начале опыта и при выздоровлении.

Химический анализ кормов проводили по общепринятым методикам. Из биохимических показателей крови определяли общий белок, глюкозу, гемоглобин, витамины А и Е. Из иммунобиологических показателей в сыворотке крови определяли активность бактерицидную и комплиментарную, концентрацию лизоцима, показатели резистентности по Т- и В- лимфоцитам, иммуноглобулину, глютатиону. Из морфологических показателей крови определяли количество лейкоцитов, лейкоцитарную формулу. При определении лабораторных исследований руководствовались методиками, изложенными в рекомендациях (П.Т. Лебедев, А.Т. Усович, 1976; С.Е. Плященко, 1976; Е.А. Васильева, 1982; И.П. Кондрахин, 1985; В.Е. Чумаченко, 1990; Е.С. Воронин, 2002; Н.А. Осипова, 2003).

При гистологическом исследовании изменённых тканей и органов использовали классические методики: изготовление и окрашивание парафиновых срезов гематоксилин – эозином по Бемеру, окраска по Браше и Беренбауму, с их последующим изучением.

Продуктивные, воспроизводительные качества и экономические показатели подопытных животных определяли по общепринятым методикам ВИЖа.

Экспериментальный материал обрабатывали вариационно-статистическими методами. В работе использовались показатели: среднее арифметическое (), ошибка его (Sх). Достоверность различий средних оценивалась по критерию Стьюдента (t).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Анализ состояния птицефабрик Алтайского края по заболеваниям неинфекционной патологии и опухолевым заболеваниям кур

Преимущества клеточной системы содержания в птицеводстве хорошо известны, а необходимость её применения на современном этапе развития отрасли промышленного птицеводства несомненна.

Все птицефабрики Алтайского края работают на промышленной основе с клеточным содержанием всех возрастов птицы. В крупных хозяйствах осуществляется непрерывный цикл работы замены поголовья новым, в связи с этим в производственных цехах создаётся огромная концентрация птицы. При нарушении оптимальной санитарной защиты, соблюдения параметров микроклимата появляется вероятность возникновения не только инфекционных, но и незаразных заболеваний, а также опухолевой патологии, вследствие понижения уровня иммунной защиты. Основной причиной выбраковки и падежа птиц на птицефабриках Алтайского края являются внутренние незаразные болезни. В 2002 году пало всех видов птицы 636300 голов, из них 635592 голов с диагнозом неинфекционных заболеваний (99,9%).

Мы произвели собственные исследования по учёту опухолевой патологии у кур. Так, по данным патологоанатомического вскрытия кур в возрасте от 80 до 365 дней выявили следующее: наибольший процент опухолевой патологии репродуктивных органов регистрировали на «Локтевской» птицефабрике (желточных карцином – 13%, у кур - несушек 285 – 365 – дневного возраста, что мы связываем с несбалансированным по витаминному (на 12%), белковому (избыточное количество – в 2,5 раза выше нормы, связанное со стимуляцией яйценоскости и получением намного раньше, чем положено с физиологической точки зрения сверх привесов и яйценоскости) и микроэлементному (на 9%) составу рационом; аденокарцином яйцевода - 9% - у кур 150 – 250 – дневного возраста, связанное с травмированием яйцевода, несбалансированным по витаминам рациону; саркома яичников – 1,5% - у кур 285 – 365 – дневного возраста, что связано с возрастом (гормональная и физиологическая перестройка, наряду с интенсивной яйценоскостью вызывают ослабление общей резистентности организма кур – несушек и являются основополагающими) и полом кур, поскольку у петухов опухолевой патологии за весь период анализирования не наблюдалось); ООО «Сибагропрод НЗ» - аденокарцинома яйцевода – 10 % (у кур 150 – 285 - дневного возраста, этиология та же), желточная карцинома – 12% - у кур 265 –365 – дневного возраста; саркома яичников у кур 90- дневного возраста – 0,5%, 121- дневного возраста – 25%, 150 – дневного возраста – 50%, у кур от 160 дней и старше саркома яичников в основе не наблюдалась; на «Молодежной» (желточная карцинома у кур 285-, 365 – дневного возраста – 7%, саркома яичников у кур 90 – 150 – дневного возраста составила 5%, аденокарцинома яйцевода у кур 285- 365 – дневного возраста – 1,2 %

3.2. Гистологическая и патологоанатомическая диагностика опухолевых заболеваний кур различного возраста

Нами доказана взаимосвязь факторов внешней среды, возрастного аспекта и их влияние на возникновение опухолевой патологии репродуктивных органов у кур (рисунки 2, 3, 4). Более того, нами было отмечено, что частота проявления патологии как доброкачественного, так и злокачественного характера связана не только с возрастом и полом кур, но и ещё с нарушенными параметрами микроклимата и скученным содержанием.

Системный анализ состояния здоровья кур на птицефабрике ООО «Сибагропрод НЗ» показал, что максимальная сохранность наблюдалась у кур 120 – 210 – дневного возраста (46 %), а параметры микроклимата: освещение и температурный показатель не соответствуют норме.

Рис. 2. Зависимость возникновения опухолевой патологии от возраста кур

Рис. 3. Зависимость возникновения опухолевой патологии от возраста кур

Рис. 4. Саркома яичника. Периферические отделы опухолевого узла. Гематоксилин- эозин по Бемеру. Ув. 1000.

Из рисунка 4 видно, что клетки раковой опухоли яичника анаплазированы. Характерным свойством является накопление жидкости, чаще всего внутри кистозного образования. Благодаря быстрому накоплению жидкости, раковая ткань увеличиваются в объеме крайне быстро. Метастазирование саркомы яичников наступает очень быстро и большей частью идет по кровеносному руслу в отдаленные области. Возможно излияние содержимого опухоли в брюшную полость.

3.3. Патоморфологические особенности опухолевых заболеваний репродуктивных органов у кур

При послеубойной ветеринарно- санитарной экспертизе тушек, из 1502 исследованных, опухоли были установлены в 9,8% случаев.

Тушки больных кур, как правило, были тощими, плохо обескровливались. В мышечной ткани встречались дегенеративные изменения, кожа суховатая, матовая. Макроскопически опухоль имеет вид сосочков и делится гнёздами. Локализуется на слизистых оболочках яйцеводов, яичников, имеющих железистое строение. Отмечается некоторая анаплазия клеток эпителия: они разной величины и формы, лишены полярности. Железистые образования опухоли атипичны и часто выступают в виде гнёзд.. В остальных органах видимых изменений не было (гистологически установленная аденокарцинома яйцевода). Микроскопически опухоль состоит из мономорфных клеток среднего размера. Их ядра имеют овальную или округлую форму, бледный хроматин и мелкие эозинофильные ядрышки (рисунок 4).

На основании данных исследования мы выявили следующее: что частота возникновения опухолевой патологии выше у кур- несушек 365-385-400- дневного возраста, а наибольшее распространение в данной возрастной категории имеют следующие неоплазии: аденокарцинома яйцевода составляла наибольший процент от числа других опухолевых патологий, встречающихся на данной птицефабрике –14% (у кур 385- дневного возраста), уступая лишь мочекислому диатезу, процент которого – 30% (у кур 150-210- дневного возраста).

На рисунке 4, 5, 6 и 7 ярко выражены микроизменения при саркоме яичника и аденокарциноме яйцевода у куриц – несушек кросса «Родонит» и «Хайсекс белый».

При оценке рациона кур кросса «Родонит» и «Хайсекс белый» в возрасте 210-365 дней, мы отмечали высокий энергетический уровень, что указывает на перерасход кормов. Количество протеина в расчёте на одну кормовую единицу было снижено на 12-13 %, а так же отношение кальция к фосфору (2,04-2,7:1). Недостаток питательных веществ от потребности составлял: каротина - до 46 %, витамина Д до 99 %.

Рис. 5 Аденокарцинома яйцевода. Окраска по методу Браше. Ув. 1000.

Рис.6 Муцинозная аденокарцинома яйцевода. Ув. 1000. Окраска по методу Браше.

Рис.7 Аденокарцинома яйцевода. Ув. 1000. Окраска по методу Браше.

3.4. Неспецифическая профилактика опухолевых заболеваний с использованием настойки лимонника китайского и «Роминикса А»