Особенности эпизоотологии и эффективность глобулинсорбина и пантолизата в специфической профилактике сальмонеллёза телят в амурской области

На правах рукописи

ЛИТВИНОВА ЗОЯ АЛЕКСАНДРОВНА

ОСОБЕННОСТИ ЭПИЗООТОЛОГИИ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ГЛОБУЛИНСОРБИНА И ПАНТОЛИЗАТА В СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКЕ САЛЬМОНЕЛЛЁЗА ТЕЛЯТ

В АМУРСКОЙ ОБЛАСТИ

16.00.03 – ветеринарная микробиология, вирусология,

эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени

кандидата ветеринарных наук

Барнаул 2009

Работа выполнена в институте ветеринарной медицины и зоотехнии на кафедре эпизоотологии, паразитологии и микробиологии ФГОУ ВПО Дальневосточного государственного аграрного университета

Научный руководитель: кандидат ветеринарных наук, доцент

Землянская Наталья Ивановна

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, директор

ГУ Алтайской краевой ветеринарной

лаборатории

Разумовская Валентина Владимировна

кандидат ветеринарных наук, доцент

кафедры микробиологии, эпизоотологии и

ветсанэкспертизы института ветеринарной

медицины Алтайского государственного

аграрного университета

Резниченко Зоя Михайловна

Ведущая организация: ФГОУ ВПО Бурятская государственная

сельскохозяйственная академия

имени профессора В.Р.Филиппова

Защита диссертации состоится «27» ноября 2009 г. в ___ часов на заседании диссертационного совета Д 220.002.02 при Алтайском государственном аграрном университете по адресу: 656922, Алтайский край, г.Барнаул, ул.Попова 276, тел./факс 8-3852-31-06-36

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке АГАУ

Автореферат разослан « » 2009 года

Учёный секретарь

диссертационного совета П.И.Барышников

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Скотоводство занимает важное положение в производственной структуре сельского хозяйства России. С его дальнейшим развитием связано решение ряда социально-экономических задач, а именно, укрепление сельскохозяйственных предприятий, удовлетворения спроса населения в качественных продуктах питания.

Определённый экономический ущерб скотоводству приносят инфекционные болезни телят, в том числе и сальмонеллёз. В Российской Федерации удельный вес сальмонеллёза и колибактериоза составляет 30,1% от бактериальных патологий крупного рогатого скота (Scuderi G., Fantasia M., Filitici E. et al., 1996; Ли В., 2003; Тараканов Б., Никулин В., Палагина Т., 2005).

В Амурской области данное заболевание регистрируют в течение многолетнего периода. Большинство хозяйств области остаются стационарно неблагополучными и в настоящее время, что позволяет считать проводимые противосальмонеллезные мероприятия не вполне удовлетворительными (Землянская Н.И., 2005).

Важное место в борьбе с этой инфекцией занимает специфическая профилактика. Однако вакцинация телят против сальмонеллёза не всегда обеспечивает иммунитет достаточной напряжённости (Криштофорова Б.В., Хрусталёва, 2000; Ильясова З.З., 2002; Boryev G.L., Sobol A.S., Fedorov Y.N., 2007).

Для повышения иммунологической реактивности организма на введение вакцины ряд авторов рекомендуют проводить специфическую профилактику на фоне применения иммуномодуляторов. Имеется информация об использовании препаратов данной категории, как до иммунизации, так и одновременно с введением вакцин (Ильясова З.З., 2002; Смирнов В.С., 2003; Деев А.В., Раков Т.И., Лобов Т.П. с соавт., 2004; Рецкий М.И., Шахов А.Г., Кардашов А.М. с соавт., 2007 и другие).

В связи с этим изучение особенностей эпизоотологии сальмонеллёза крупного рогатого скота в Амурской области и совершенствование специфической профилактики данной инфекции является весьма актуальным.

Цель исследований. Изучить особенности проявления эпизоотологии сальмонеллёза крупного рогатого скота в Амурской области за период с 1996 по 2008 год. Установить влияние иммуностимулирующих препаратов (глобулинсорбин и пантолизат) на эффективность специфической профилактики сальмонеллёза телят.

Задачи исследований. Для достижения целей исследования были поставлены следующие задачи:

1.Выяснить особенности развития эпизоотического процесса сальмонеллёза крупного рогатого скота в условиях Амурской области в период с 1996 по 2007 год.

2.Изучить влияние глобулинсорбина и пантолизата на специфический иммунный ответ телят при вакцинации против сальмонеллёза.

3.Определить действие испытуемых препаратов на заболеваемость, сохранность и прирост живой массы телят на фоне проведения специфической профилактики сальмонеллёза.

4.Дать экономическую оценку проводимых профилактических мероприятий.

Научная новизна. Выявлены особенности проявления эпизоотического процесса сальмонеллёза крупного рогатого скота в условиях Амурской области за период с 1996 по 2008 год, определены некоторые показатели интенсивности и экстенсивности сальмонеллёза крупного рогатого скота за исследуемый период.

Впервые разработан и апробирован в производственных условиях способ вакцинации телят против сальмонеллёза на фоне применения глобулинсорбина и пантолизата. Проведён сравнительный анализ эффективности перорального и парентерального применения пантолизата при вакцинации телят против сальмонеллёза. Установлено положительное влияние используемых препаратов на заболеваемость, сохранность и прирост живой массы телят.

Определена экономическая эффективность профилактики сальмонеллёзной инфекции телят на фоне применения глобулинсорбина и пантолизата.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты проведённых исследований раскрывают некоторые особенности проявления эпизоотического процесса сальмонеллёза крупного рогатого скота в условиях Амурской области.

Способ специфической профилактики сальмонеллёза телят с использованием глобулинсорбина и пантолизата для стимуляции поствакцинального иммунитета дополняет инструктивные положения противосальмонеллёзных мероприятий. Применение испытуемых препаратов в животноводческих хозяйствах Амурской области позволит создать достаточную специфическую защиту телят от сальмонеллёза и других инфекционных болезней молодняка.

Разработаны рекомендации по применению глобулинсорбина и пантолизата для практического использования в производстве.

Выявленные закономерности и полученный экспериментальный материал могут быть использованы в научно-исследовательской работе, а также учебном процессе по курсам «Ветеринарная микробиология и иммунология», «Эпизоотология и инфекционные болезни» со студентами ветеринарных и биологических специальностей вузов, слушателями ФПК.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на научно-практических конференциях ИВМЗ Дальневосточного государственного аграрного университета (г.Благовещенск, 2007, 2008, 2009); на региональных научно-практических конференциях «Молодежь XXI века: шаг в будущее» (г.Благовещенск, 2007, 2008, 2009); на региональной научно-практической конференции Дальневосточного государственного аграрного университета «Инновационные технологии в животноводстве и кормопроизводстве Дальнего Востока» (г.Благовещенск, 2008).

Публикация результатов исследований. Основные результаты научно-исследовательской работы по теме диссертации опубликованы в 7 печатных работах, в том числе в журнале, рекомендованном ВАК (Аграрная наука).

Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 131 страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Работа содержит 25 таблиц, 22 рисунка. Список используемой литературы включает 248 источников, из них 179 отечественных и 69 иностранных авторов. Диссертация изложена на русском языке.

Внедрение результатов исследования. Полученные данные используются в животноводческих хозяйствах Тамбовского района Амурской области; в учебном процессе и научно – исследовательской работе кафедры эпизоотологии, паразитологии и микробиологии Дальневосточного государственного аграрного университета; на кафедре микробиологии и ветеринарно-санитарной экспертизы Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р.Филиппова; на кафедре эпизоотологии, зоогигиены и ветеринарно-санитарной экспертизы Приморской государственной сельскохозяйственной академии; на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии Амурской государственной медицинской академии; в Дальневосточном зональном научно-исследовательском ветеринарном институте.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

1.Материалы изучения эпизоотической ситуации сальмонеллёза крупного рогатого скота на территории Амурской области с 1996 по 2008 год.

2.Эффективность специфической профилактики сальмонеллёза телят с использованием глобулинсорбина и пантолизата.

3.Влияние испытуемых препаратов на заболеваемость, сохранность и прирост живой массы телят.

4.Экономическая оценка специфической профилактики сальмонеллёза телят с использованием глобулинсорбина и пантолизата.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнена на кафедре эпизоотологии, паразитологии и микробиологии ИВМЗ Дальневосточного государственного аграрного университета (ДальГАУ), а также на базе ОПХ ВНИИ сои с. Лозовое Тамбовского района Амурской области в период с 2006 по 2008 год.

Изучение эпизоотологической ситуации по сальмонеллёзу крупного рогатого скота проводили путём анализа материалов ветеринарной отчётности Управления ветеринарии с госветинспекцией при администрации Амурской области.

Объектом исследования явились телята опытно-производственного хозяйства ВНИИ сои в количестве 28 голов голштинизированной симментальской породы. По принципу аналогов были сформированы контрольная и три опытные группы однодневных телят по семь голов в каждой с учётом породы, живой массы и физиологического состояния. Схема проведения опыта представлена в таблице 1.

Телятам первой опытной группы с первого дня жизни ежедневно три раза в день выпаивали 200 мл препарата глобулинсорбин с 500 мл тёплого молока за 30 минут до кормления в течение девяти дней. Выпаивание глобулинсорбина телятам проводили согласно методическим рекомендациям Л.А. Воронцовой (2005). Глобулинсорбин представляет собой молозивную сыворотку первого удоя, имеет светло-коричневый цвет и специфический запах молозива.

Второй опытной группе выпаивали препарат пантолизат в дозе 5 мл с 200 мл тёплой воды два раза в день в течение девяти дней за 30 минут до кормления. Пантолизат представляет собой продукт гистолиза отходов от фарм.переработки рогов (пантов) оленя.

Телятам третьей опытной группы на фоне первой вакцинации внутримышечно вводили пантолизат в дозе 2 мл.

Животным контрольной группы препараты глобулинсорбин и пантолизат не применяли.

В часы основного кормления телята первой опытной группы получали по 1,3 литра молока; телята второй, третьей и контрольной групп - по 2 литра. В первые сутки жизни телята всех групп получали молозиво.

Всех животных в 10-и дневном возрасте двукратно вакцинировали концентрированной формолквасцовой вакциной против сальмонеллёза телят в дозе 2 мл подкожно в область средней трети шеи с интервалом десять дней (вакцина производства ФГУП «Армавирская биофабрика», серия 12, контроль 12, изготовлена 10.05, годна 2 года).

Забор крови осуществляли из ярёмной вены в 1-й день жизни через шесть часов после выпаивания препаратов, на 5-й, 9-й (за день до первой вакцинации), 18-й (за день до второй вакцинации) и на 30-й день жизни (через четырнадцать дней после второй вакцинации).

Определение количества эритроцитов, лейкоцитов проводили аппаратным методом (гематологический анализатор МЕК-6400). Лейкограмму выводили на основании исследования мазков крови, окрашенных по Романовскому – Гимза.

Общий белок в сыворотке крови определяли рефрактометром (Кондрахин И.П., Архипов А.В., Левченко В.И., Галанов Г.А., Фролова Л.А., Новиков В.Э., 2004). Для определения белковых фракций проводили электрофоретический анализ сыворотки крови в 1-% геле агарозы (В.М. Чекишев, 1975). Определение иммунных белков в сыворотке крови определяли по реакции с цинком сульфатом.

Фагоцитарную активность определяли по методике П.Н.Смирнова с соавторами (1981), в качестве тест-микроба использовали суточную культуру S.albus. Бактерицидную активность сыворотки крови определяли фотонефелометрическим методом, с использованием тест-культуры E.coli. При определении лизоцимной активности сыворотки крови использовали культуру М.lyzodecticus (Смирнов П.Н., Гончарова Н.Б., Воронова И.М с соавт., 1981).

Титр специфических антител определяли в реакции агглютинации (Кондрахин И.П., Архипов А.В., Левченко В.И., Фролова А.А., Новиков В.Э, 2004).

При проведении работы было отобрано и исследовано 140 проб крови, а также проведено 140 гематологических, 280 биохимических, 560 иммунологических и 84 серологических исследований.

Математическая обработка цифровых данных включала определение средней арифметической (М), среднего квадратичного отклонения (), ошибки средней арифметической (m) коэффициента, парной корреляции (r). Проверку гипотезы осуществляли с помощью критерия Стьюдента (t-критерий).

Технология изготовления глобулинсорбина и пантолизата

В соответствии с методикой Л.А. Воронцовой (2005) в производственных условиях проводили изготовление глобулинсорбина в нашей модификации. От клинически здоровых коров ОПХ ВНИИ сои с. Лозовое Тамбовского района Амурской области собирали молозиво первого удоя. Молозиво фильтровали, разливали в стерильные емкости по 2 л и замораживали в морозильной камере при температуре -30ОС. По мере нарождения молодняка молозивное сырьё постепенно размораживали при температуре +45ОС, для удаления казеина в молозиво добавляли сухой порошок фармакопейного пепсина из расчёта 3г на 1л. После перемешивания казеин выпадал в осадок. Для образования более плотного сгустка казеина смесь ставили в холодильник (0ОС) на два часа. Молозивную сыворотку отделяли от сгустка казеина путём фильтрации через тройной слой марли. Сыворотку консервировали сорбатом калия из расчёта 1г на 1л сыворотки. Глобулинсорбин фасовали в стерильные ёмкости и сохраняли до времени использования 5 - 10 дней в холодильнике при температуре 0 - +2ОС. Для изготовления глобулинсорбина было израсходовано 80л молозива. Выход молозивной сыворотки составил 50%.

Пантолизат представляет собой продукт фарм.переработки отходов от производства пантокрина. Пантокрин получают из молодых неокостеневших рогов оленя. Для получения пантолизата измельчённые отходы производства пантокрина смешивали с искусственным желудочным соком в соотношении 1:10, помещали в термостат при 37 - 40ОС на трое суток, перемешивали 1 раз в сутки в течение 2 – 3 минут, фильтровали. Фильтрат обеззараживали кипячением (Ярцев В.Г., 1990).

Таблица 1 - Схема постановки опыта по испытанию эффективности глобулинсорбина и пантолизата

при вакцинации телят против сальмонеллёза

Группа животных		Количество животных в группе, голов	Наименование препарата	Способ введения	Доза препарата, мл	Кратность использования препарата	Срок проведения исследования, день
Контрольная		7	-	-	-	-	До иммунизации (1, 5, 9 день) и на 18, 30 день
	Опытная 1	7	Глобулинсорбин	Перорально, с 500 мл молока (37оС) за 30 мин до кормления	200	Три раза в день c 1-го по 9 день жизни	До иммунизации (1, 5, 9 день) и на 18, 30 день
	Опытная 2	7	Пантолизат	Перорально, с 200 мл кипячёной воды (37оС) за 30 мин до кормления	5	Два раза в день с 1-го по 9 день жизни	До иммунизации (1, 5, 9 день)и на 18, 30 день
	Опытная 3	7	Пантолизат	Внутримышечно	2	Однократно на фоне первой вакцинации (10-й день)	До иммунизации (1, 5, 9 день) и на 18, 30 день