Лечение чумы и парвовирусного энтерита плотоядных химиопрепаратами и иммуностимуляторами

На правах рукописи

ДАНИЛОВСКИЙ МИХАИЛ ВАСИЛЬЕВИЧ

ЛЕЧЕНИЕ ЧУМЫ И ПАРВОВИРУСНОГО ЭНТЕРИТА ПЛОТОЯДНЫХ ХИМИОПРЕПАРАТАМИ И ИММУНОСТИМУЛЯТОРАМИ

16.00.03. – ветеринарная микробиология, вирусология

эпизоотология, микология, иммунология

Диссертация на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Ульяновск - 2000

Работа выполнена в ветеринарной лечебнице «Айболит» г. Ульяновск

Научные руководители:

доктор биологических наук, профессор ВАСИЛЬЕВ Д.А.

доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник ОБУХОВ И.Л.

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ:

РАХМАТУЛЛИН Э.К. –д.в.н., профессор УГСХА

СЕРЕДА А.Д.- д.б.н., ст. научный сотрудник ВНИИВВиМ

Ведущее учреждение – Всеросийский научно-исследовательский

институт защиты животных (ВНИИЗЖ)

Защита состоится «____» ___________2000 года в____часов на заседании диссертационного совета К 120.82.03 при Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии.

Адрес: г. Ульяновск, бульвар Новый Венец, 1.

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке УГСХА.

Автореферат разослан «____»___________2000г.

Учёный секретарь диссертационного совета,

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы

Среди вирусных болезней плотоядных основное место принадлежит чуме и парвовирусному энтериту. Не отрицая ведущей роли вакцинопрофилактики в обеспечении защиты от названных болезней следует исходить из того, что снижение уровня распространения ряда инфекционных заболеваний плотоядных и летальности от них может быть достигнуто при активном научном поиске препаратов различной направленности.

Практика показывает, что хозяева домашних животных обращаются в ветеринарные учреждения, как правило, в период проявления клинических признаков инфекционных болезней. В этом случае ветеринарный врач приступает к лечению, не имея результатов лабораторного диагноза. Чем шире спектр действия применяемых препаратов, тем больше вероятность положительного результата лечения, поскольку в процессе развития вторичных иммунодефицитов при вирусных инфекциях начинают проявляться секундарные вирусные и бактериальные болезни. Поэтому, научный и практический интерес представляют комплексные препараты, блокирующие или тормозящие репродукцию вирусов и бактерий, стимулирующие иммунную систему животных.

Проблема неспецифической стимуляции системы иммунитета привлекает все больше и больше внимания. Это обусловлено рядом обстоятельств: снижением уровня кормления, контроля за инфекционными болезнями, экологическим загрязнением. Иммунодефицитные состояния сопровождаются, как правило, многими болезнями. Коррекция иммунной системы могла бы в значительной степени исправить положение. Одним из способов профилактики болезней животных, повышения их естественной резистентности является применение иммуностимулирующих препаратов.

Вещества, способные воздействовать на иммунитет, по происхождению можно разделить на три большие группы: экзогенные, эндогенные, синтетические. Экзогенные - включают препараты микробного происхождения, в основном бактериального и грибкового. Эндогенные - объединяют экстракты из органов иммунной системы, а также биологически активные белки, продуцируемые лимфоцитами и макрофагами. Синтетические - препараты микробного или животного происхождения; известные лечебные препараты, обладающие дополнительно иммунотропными свойствами; полученные в результате направленного химического синтеза.

Эффективность иммуностимулирующей терапии можно повысить сочетанным применением препаратов. Однако использованию иммуностимулирующей терапии препятствует отсутствие данных о сравнительной эффективности монотерапии иммуностимуляторами. Вышеизложенное свидетельствует, что поиск средств повышения иммунного статуса плотоядных и способов лечения вирусных инфекций является актуальной задачей ветеринарии.

В настоящее время спектр веществ, обладающих выраженной антивирусной активностью, как в профилактическом, так и терапевтическом аспектах весьма ограничен. Поэтому, помимо создания отечественных аналогов зарубежных препаратов научный и практический интерес представляет оценка применения противовирусных препаратов в практике.

Наиболее перспективными направлениями предупреждения и терапии инфекционный болезней являются следующие:

-блокирование или торможение репродукции вируса в очаге поражения, а также снижение уровня вирусемии с помощью высокоэффективных ингибиторов размножения вирусов;

-стимуляция иммунной реакции организма с помощью специфических вакцинных препаратов, а также неспецифических иммуностимуляторов.

1.2.Цель и задачи исследования

Целью данной работы было определить профилактический и лечебный эффект различных иммуностимуляторов и химиопрепаратов при чуме и парвовирусном энтерите плотоядных.

В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:

0. определить эффективность противовирусных химиопрепаратов для лечения чумы и парвовирусного энтерита плотоядных;
1. исследовать влияние иммуностимуляторов на показатели неспецифической и специфической резистентности плотоядных животных, при экспериментальном иммунодефиците, вызванном вакцинацией;
2. изучить лечебную эффективность иммуностимуляторов на больных чумой и парвовирусным энтеритом собак;
3. оценить эффективность сочетанного применения вакцин с иммуностимуляторами;
4. дать рекомендации по лечению нервных форм чумы плотоядных с использованием иммуностимуляторов и химиопрепаратов.

1.3. Научная новизна

Установлено, что уровень вирусемии у леченных рибамидом животных резко снижался уже через сутки после начала лечения.

Впервые предложено использовать привитых вакциной Vanguard 5/L собак в качестве модели для изучения иммуномодуляторов при иммуносупрессивном состоянии.

Установлено, что из шести исследованных иммуностимуляторов только иммунофан и ГМДП стабилизирует бактерицидную активность крови и концентрацию IgG в сыворотке, сокращают срок лимфопении, т.е. реально обладают иммуностимулирующими свойствами.

Доказано, что иммуностимуляторы ГМДП и иммунофан повышают уровень поствакцинального гуморального иммунитета.

1.4. Практическая значимость

Предложено использовать иммунофан и ГМДП для лечения различных форм тяжести болезней, вызванных вирусами чумы плотоядных и парвовирусного энтерита плотоядных.

Разработаны оптимальные схемы лечения чумы и парвовирусного энтерита плотоядных химиопрепаратами ремантадин и риботан. Предложена схема лечения нервных форм чумы плотоядных комплексом этих препаратов и рекомендуется для внедрения в практику.

1.5. Апробация работы

Результаты исследования были доложены на республиканских и научно – практических конференциях с 1987 по 2000 г г.

1.6. Публикации

По теме диссертации опубликовано 7 научные работы.

1.7. Основные положения диссертационной работы, выдвигаемые на защиту

Разработанная схема фармакологического лечения инфекционных болезней плотоядных комплексом ремантадина и рибамида обеспечивает выздоровления более 90% животных.

Применение иммунофана и ГМДП повышает иммуногенность живых и инактивированных вакцин. Эти препараты можно рассматривать как адъюванты.

1.8. Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 118 листах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований, обсуждение, выводы, практические предложения и список литературы (92 источников, в том числе 42 отечественных). Работа иллюстрирована 7 таблицами, 6 рисунками и дополнена приложениями.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы

Исследования проводили на собаках в возрасте от 3 месяцев до 8 лет.

В работе использовали вакцины Вакчум, Vanguard 5/L Мультикан-4; химиопрепараты ремантадин (-метил-1-аминометиладамантан хлоргидрат), виразол (1--D-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамид), продигиозан, мастим, риботан (1--D-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамид), миксоферон, иммунофан, N-ацетил-глюкозаминил-N-ацетилмурамил-L-аланин-D-изоглутамин (ГМДП); глобулин против энтерита, гепатита, чумы.

2.2. Методы

Вакцинацию животных проводили согласно инструкциям изготовителей.

Фагоцитарную активность лейкоцитов крови учитывали по относительному количеству фагоцитирующих нейтрофилов и среднему количеству частиц поглощенных одним нейтрофилом.

Определение лизоцима осуществляли по способности лизоцима лизировать клеточную стенку Micrococcus lysodeikticus (Блумберг И.А. и Дундуре Б.Л., 1987).

Определение ВЧС-антигенов в крови и антител в сыворотке проводили с использованием реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) и реакции задержки пассивной гемагглютинации (РЗПГА), соответственно.

Антигены возбудителя парвовирусного энтерита определяли в реакции гемагглютинации (ГРА), а противовирусных антител - в реакции торможения гемагглютинации (РТГА).

Определение концентрации сывороточных IgG проводили методом радиальной иммунодиффузии.

Статистическую обработку данных проводили с использованием персонального компьютера IBM PC/AT 486.

2.2. Результаты собственных исследований

2.2.1. Лечение чумы и парвовирусного энтерита плотоядных химиопрепаратами

Научный и практический интерес представляют препараты, блокирующие или тормозящие репродукцию вирусов. Нами исследовано действие ремантадина и рибамида в различных сочетаниях.

В первой серии экспериментов больных чумой плотоядных щенков собак по мере их поступления лечили по двум схемам. Всего в опыте было 26 животных, которых разделили на две группы (по 8 и 18 голов).

Первая, контрольная, группа животных (12 голов) была подвергнута лечению по традиционной схеме, направленной в первую очередь на устранение рвоты, обезвоживания организма, ацидоза и вторичных инфекций. Начинали с промывания желудка 0.1 %-ным раствором перманганата калия, затем внутримышечно инъецировали церукал в дозе 2 мл до прекращения рвоты, однократно - интерферон в дозе 1.5-2 мл и специфическую трехвалентную сыворотку - 2 мл два раза в день в течение 3-4 суток. Внутривенно вводили по 15-20 мл 5%-ного раствора глюкозы. Внутрь давали сульфадимезин в дозе 0.25 г три раза в день в течение 3-5 суток.

Второй, опытной, группе (18 голов) вместо интерферона вводили ремантадин внутримышечно в дозе 20 мкг/кг массы тела ежедневно в течение 5 суток и одновременно препарат задавали с водой в дозе 40 мг/кг массы тела ежедневно в течение 5 суток.

В первой группе пали 3 животных (25 %), остальные выздоровели, явные признаки улучшения клинического состояния наблюдали через 3-4 дня после начала терапии. Во второй группе пало 1 животное (5.6 %). Явные признаки улучшения клинического состояния наблюдали уже на 2-3 сутки после начала терапии. Побочного действия препарата не зарегистрировано.

В сравнительном аспекте была определена вирусемия у собак, больных чумой или парвовирусным энтеритом плотоядных, леченных без и с ремантадином. Было установлено, что ремантадин подавляет репродукцию возбудителя чумы плотоядных, но никак не репродукцию возбудителя парвовирусного энтерита.

Во второй серии экспериментов исследовали эффективность рибамида при лечении чумы и парвовирусного энтерита плотоядных.

Больные, ранжированные по возрасту животные были разделены на 6 групп в зависимости от предварительного диагноза болезни и применяемого для лечения химиопрепарата.

Схема 1 (контроль):

а) при парвовирусном энтерите лечение собак начинали с промывания желудка 0,1 %-ным раствором перманганата калия, затем внутримышечно инъеци­ровали церукал в дозе 2 мл до прекраще­ния рвоты, однократно интерферон в дозе 1,5-2 мл. Подкожно вводили по 10-20 мл физиологи­ческого раствора, внутривенно - по 10-20 мл 5 %-ного раствора глюкозы. Внутрь давали суль­фадимезин в дозе 0,25 г три раза в день в течение 3-5 суток;

б) при чуме плотоядных антибактериальных средств использовали внутримышечно ампициллин – 25 000 ед., гентамицин - 2,5 мг на 1 кг массы тела два раза в сутки. При нарушении функции желудочнокишечного тракта назначали церукал - по 0.25 г три раза в сутки. При диарее давали внутрь бифекол из расчета одна доза на 10 кг массы тела два раза в сутки. Кроме того, при необходимости осуществляли капельное введение смеси 0,5 %-ного раствора глюкозы с изотоническим раство­ром натрия хлорида.

Схема 2 – дополнительно к схеме 1 применяли рибамид в первый день двукратно 40 и 20 мг/кг, во второй – 20 мг/кг трехкратно, в третий и четвертый – по 20 мг/кг двукратно.

Схема 3 – дополнительно к схеме 1 применяли рибамид в первый и второй день по 40 мг/кг однократно.

Результаты представлены в табл. 1.

Таблица 1. Результаты лечения рибамидом собак, больных чумой или парвовирусным энтеритом плотоядных.

Возраст группы	Чума плотоядных			Парвовирусный энтерит
	Схема 1	Схема 2	Схема 3	Схема 1	Схема 2	Схема 3
1-3 мес.	6/4*	8/7	5/4	7/5	9/8	8/6
4-6 мес.	8/4	6/6	7/5	8/5	11/10	7/6
7-18 мес.	3/2	4/4	3/2	4/2	3/3	5/4
Итого	17/10	18/17	15/11	19/12	23/21	20/16