авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ


Pages:   || 2 | 3 |

Диагностика и клинико-морфологическая характеристика вторичного гиперпаратиреоза у собак

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

Марюшина Татьяна Олеговна

ДИАГНОСТИКА И КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ

ХАРАКТЕРИСТИКА ВТОРИЧНОГО

ГИПЕРПАРАТИРЕОЗА У СОБАК

Специальность 06.02.01 - Диагностика болезней и терапия

животных, патология, онкология и

морфология животных

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

МОСКВА 2012

Работа выполнена на кафедре «Незаразные болезни» ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств»,

Министерства образования и науки РФ

Научный руководитель: Луцай Владимир Иванович, кандидат ветеринарных наук, доцент (ФГБОУ ВПО «МГУПП»)
Официальные Ватников Юрий Анатольевич,
оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор
(ФГБОУ ВПО «Российский университет дружбы народов»),
заведующий кафедрой анатомии,
физиологии и хирургии животных
Арсланян Григорий Геворгович,
кандидат ветеринарных наук, доцент
ФГБОУ ВПО «Московская государственная
академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина»),
доцент кафедры биологии, патологии мелких домашних, лабораторных и экзотических животных
Ведущая организация: «Всероссийский ветеринарный научно-исследовательский институт патологии, фармакологии и терапии» ГСЦ Россельхозакадемии (г. Воронеж)

Защита диссертации состоится «_____» ________ 2012 в _____ часов на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 212.148.09 при ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств» по адресу: 109316, г. Москва, ул. Талалихина, д. 33, в конференц-зале.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «МГУПП»

Автореферат разослан « ______ « ______________ 2012 г.

Автореферат размещен на сайте Министерства образования и науки РФ

http://vak.ed.ru/ «_____» _________ 2012

Ученый секретарь

диссертационного совета,

кандидат биологических наук, доцент Нитяга И.М.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Ветеринарная эндокринология – одна из молодых и наименее изученных областей ветеринарии. При этом актуальность проблем, связанных с патологией желез внутренней секреции, возрастает с каждым годом. Ветеринарные врачи в последнее время все чаще встречаются с такими заболеваниями у собак, как сахарный и несахарный диабет, гипо- и гипертиреоз, синдром Кушинга и адиссоновая болезнь. Неотъемлемым звеном эндокринной системы являются паращитовидные железы, которые продуцируют паратиреотропный гормон (паратгормон), участвующий совместно с витамином Д и кальцитонином в регуляции обмена кальция в организме. О физиологическом значении паращитовидных желез известно достаточно (Ежкова А.М., 1999;. Суслов В.П., 2000; Торранс Э., 2006; Фелдмен Э., 2008 и др.). Снижение уровня кальция в крови является основным стимулом к выбросу гормона в кровоток. Органами-мишенями для паратиреотропного гормона являются скелет и почки, он также оказывает влияние на кишечник, усиливая всасывание кальция. Известно и негативное влияние паратгормона на организм при его гиперсекреции, не зря его относят к универсальному уремическому токсину (Кузина Н.Ю., 2008; Волгина Г.В., 2009; Ильина А.Н., 2009 и др.).

Однако исследованиям патологии паращитовидных желез у собак в России до последних лет уделялось недостаточно внимания. Косвенно состояние и работу паращитовидных желез оценивали по концентрации кальция, связанного с белками, фосфора и щелочной фосфатазы в сыворотке крови (А.М. Ежова,1999; Н.В. Грищенко,2000; Ф. Каллфельц,2004; Л. Мартан, 2004).

Лишь в последние годы стали появляться работы отечественных ветеринарных специалистов, посвященные данной проблеме. Это обусловлено совершенствованием ветеринарных технологий, внедрением в ветеринарные лаборатории более точных диагностических методов, которые позволяют всесторонне изучать такие труднодоступные органы, которыми и являются паращитовидные железы, а также широким распространением скриннинговых биохимических исследований крови. Такие исследования динамично изменили процентные соотношения выявления различных форм гиперпаратиреоза.

К глубокому изучению проблем вторичного гиперпаратиреоза (ВГПТ) у собак нас побудило не только малое количество научных работ, посвященных данной патологии, но и множество противоречий в этих работах.

В доступной нам отечественной научной литературе мы не нашли статистических данных по выявлению вторичного гиперпаратиреоза у собак с хронической почечной недостаточностью и синдромом мальабсорбции, совокупных результатов биохимических и гормональных исследований, а также описания морфологических изменений в паращитовидных железах и костной ткани, при том что ссылки на эту патологию встречаются практически в каждой работе по метаболическим болезням костей у собак и кошек.

Цель работы. Выявление и изучение особенностей течения вторичного гиперпаратиреоза у собак с хронической почечной недостаточностью и мальабсорбцией, морфологических изменений в паращитовидных железах и костной ткани, оптимизация методов коррекции данного заболевания.

Задачи исследования.

1. Изучить распространенность вторичного гиперпаратиреоза среди собак разных пород, возрастных групп и выявить особенности клинического течения различных форм вторичного гиперпаратиреоза.

2. Исследовать морфологические изменения паращитовидных желез и костной ткани у собак с вторичным гиперпаратиреозом, провести лабораторный биохимический и гормональный скрининг у собак, страдающих хронической почечной недостаточностью, собак с синдромом мальабсорбции, с нарушениями кальций-фосфорного равновесия и здоровых.

3. Определить эффективность применения препаратов кальция и витамина Д при лечении собак с вторичным гиперпаратиреозом с учетом индивидуальных особенностей и тяжести патологического процесса.

Научная новизна. Впервые получена объективная картина заболеваемости и изучены особенности клинического течения кишечной и почечной форм вторичного гиперпаратиреоза у собак. Проведена дифференциальная диагностика от других заболеваний, сопровождающихся нарушением минерального обмена. Проведены и систематизированы исследования крови по показателям: ПТГ, костной щелочной фосфатазы, ионизированного кальция, витамина Д у собак с разными формами вторичного гиперпаратиреоза. Установлена зависимость между повышением уровня паратгормона в крови и морфологическими изменениями в паращитовидных железах у собак.

Практическая значимость. Полученные данные по исследованию ВГПТ у собак позволяют дифференцировать и выявлять заболевания паращитовидных желез на ранних стадиях, комплексно подходить к проблемам лечения и профилактики. Представленные в работе лабораторные данные, рентгеновские снимки и гистологические препараты являются наглядным пособием для студентов ветеринарных вузов, изучающих эндокринологию.

Апробация работы и внедрение результатов исследования. Основные результаты исследований по диссертационной работе доложены на научно-практических конференциях «Актуальные проблемы ветеринарной медицины и ветеринарно-санитарного контроля сельскохозяйственной продукции» (Москва, 2002); Всероссийском конкурсе на лучшую научную работу среди аспирантов и молодых ученых высших научных заведений МСХ РФ по секции «Ветеринария» (Москва, 2007), 1й Всероссийской межвузовской конференции по ветеринарной хирургии (Москва, 2010) (доклад); Международной научной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной хирургии» (Ульяновск, 2011) (доклад), результаты работы внедрены в учебный процесс ФГБОУ ВПО МГУПП, ФГБОУ ВПО ХГУ им. Катанова.

Публикации. По теме диссертационной работы было опубликовано 6 научных работ, 2 из которых – в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Положения, выносимые на защиту.

1. Данные мониторинга ВГПТ у собак с ХПН и мальабсорбции.

2. Результаты исследований биохимических показателей у собак с ВГПТ.

3. Результаты исследований гормональных показателей у собак со ВГПТ.

4. Морфологические изменения паращитовидных желез и костной ткани у собак с вторичным парагипертиреозом.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 152 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора научной литературы, собственных исследований, включающих разделы: материалы и методы, результаты собственных исследований, их обсуждения, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего 152 источника, из них 112 отечественных и 40 зарубежных авторов. Работа содержит 24 таблицы и иллюстрирована 33 рисунками.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалы и методы исследования. Настоящая работа проводилась в период 2008- 2011 г.г. на кафедре «Незаразные болезни» и ветеринарной клинике «На Талалихина» при ФГБОУ ВПО МГУПП, в ветеринарной лаборатории «Шанс», лаборатории «Инвитро», в паталогоанатомическом отделении городской клинической больницы № 33. Объектом исследования стали 208 собак (исследуемая группа) разных возрастных групп, пород и разного пола, из них 138 - животные в возрасте 5-11 лет с хроническими болезнями почек, 70 – щенки в возрасте 3-7 месяцев с синдромом мальабсорбции. Контрольная группа составила 35 здоровых собак разных пород и пола, из них 20 собак возрастной группы 5-11 лет и 15 - щенки возраста 3-7 месяцев. Все животные были доставлены в клинику для амбулаторного приема и наблюдались в течение всего периода исследований. Основными критериями включения животных в опытную группу было наличие в анамнезе хронической почечной недостаточности (для взрослых собак) и синдрома амальабсорбции в сочетании с нарушениями работы опорно-двигательного аппарата (для щенков). Общее количество обследованных животных составило 243.

Окончательный диагноз - хроническая почечная недостаточность устанавливался в соответствии с классификацией, предложенной Международным обществом, занимающимся изучением заболеваний почек (International Renal Interest Society), основанной на величине показателя креатинина в плазме крови.

В процессе выполнения работы использовали следующие методы.

Клиническое обследование животных проводили по общепринятой методике. Особое внимание уделялось обследованию опорно-двигательного аппарата.

Биохимическими исследованиями сыворотки крови определяли уровень креатинина, мочевины, общего и ионизированного кальция, неорганического фосфора, щелочной фосфатазы по стандартным методикам на автоматическом биохимическом анализаторе «Марс». Забор крови для исследования ионизированного кальция осуществляли в вакуумную систему с гелевым наполнителем в анаэробных условиях.

У 138 собак с почечной недостаточностью определяли: креатинин кинетическим методом по Яффе (набор фирмы DiaSys); мочевину - «уреазным – глутаматдегидрогеназным»: ферментативным УФ-тестом (набор фирмы «DiaSys»); общий кальций - унифицированным колориметрическим методом при длине волны 570 нм (набор фирмы «Vital Diagnostics»); неорганический фосфор определяли спекторофотометрическим (UV) методом (набор фирмы «Ольвекс Диагностикум»). Метод основан на способности фосфат-ионов образовывать в кислой среде с молибдатом аммония в присутствии детергента фосфорномолибденовый комплекс, оптическая плотность которого при длине волны 340 нм пропорциональна концентрации неорганического фосфора в исследуемом образце.

Щелочную фосфатазу определяли оптимизированным кинетическим методом (набор фирмы «Vital Diagnostics»). Принцип метода:

п-Нитрофенилфосфат + вода щелочная фосфатаза п-нитрофенол +

+ фосфат.

Количество образовавшегося в единицу времени п-нитрофенола, пропорциональное активности фермента, определяется по изменению оптической плотности образца в единицу времени при длине волны 405 нм.

Ионизированный кальций определяли методом ионселективных электродов на автоматическом ионселективном анализаторе ЭЛИТ-041. Метод основан на измерении межэлектродного потенциала, образующегося при контакте с исследуемым раствором кальций- селективного электрода и электрода сравнения.

Костный изофермент щелочной фосфатазы (остазу) определяли методом радиоиммунного анализа (РИА) на счетчике «Wizard 1470» с меткой йод 125.

Витамин Д определяли методом ВЭЖХ-МС, ААС (высокоэффективная жидкостная хроматография) на системе ВЭЖХ/МС/МС АРI 2000 (AB SCIEX).

О состоянии костного метаболизма судили по активности костного изофермента щелочной фосфатазы. О наличии в организме кальция судили по концентрации общего и ионизированного кальция в крови.

С целью выявления вторичного гиперпаратиреоза проводили гормональное исследование. Для этого у собак производили забор венозной крови с предварительной 12-часовой голодной выдержкой. Исследование паратиреотропного гормона проводили методом твердофазного хемилюминисцентного иммуноанализа с помощью реактивов и системы Immulite.

У 70 щенков проводили макроскопическое и микроскопическое исследование фекалий. Наличие крахмала определяли с помощью раствора Люголя, мыла - по образованию кристаллов после смешивания с уксусной кислотой и с последующим нагреванием. Дополнительно выявляли присутствие простейших (лямблий, изоспор, саркоцист), а также проводили биохимические исследования фекалий, рН определяли с помощью экспресс-теста фирмы НЕРТА РНАN. Микроскопию мазков фекалий проводили на фазово-контрастном световом микроскопе фирмы Zeiiss. Увеличение х120, х400, х900.

Оценка внешнесекреторной функции поджелудочной железы (протеолитическая активность) проводили при помощи желатинового теста.

С целью выявления тяжести течения ВГПТ проводили морфологические исследования. Для этого от 13 павших животных были отобраны фрагменты паращитовидных желез и костной ткани. Гистопрепараты паращитовидных желез приготовлены путем заливки в парафиновые блоки и окрашиванием гематоксилин эозином. Костная ткань из проксимального отдела лучевой и локтевой костей была первично декальцинирована, залита в парафиновые блоки и окрашена гематоксилинэозином. Парафиновые срезы приготовлены на микротоме «Микром», толщина среза 5-10 микрон. Исследования проводились методом световой микроскопии на микроскопе «Никон Эклипс» Е-200 с цифровой видеокамерой.

Исследования мочи проводили у группы собак с почечной недостаточностью. Исследования проводили на основные физические и химические показатели по общепринятым методикам.

Рентгенологическое исследование проводилось в группе щенков с мальабсорбцией и у собак с выраженной костной патологией в группе с хроническими болезнями почек.

Ультразвуковую диагностику проводила в группе собак с хроническими болезнями почек для подтверждения диагноза на ультразвуковом диагностическом приборе - эхотомоскопе «РАСКАН» ЭТС-Д-05.

За полный период исследований нами не было подвергнуто эвтаназии с экспериментальной целью ни одно животное. Патологический материал для гистологических исследований отбирали у животных, умерших естественным путем или после эвтаназии по просьбе владельцев.

Результаты собственных исследований

Проведение биохимического скриннинга у собак с хроническими болезнями почек. Нами было обследовано 138 собак (опытная группа) разных пород в возрасте от 5 до 11 лет с нарушениями почечной функции. Критерий включения в опытную группу – установленный диагноз хроническая почечная недостаточность. Основными симптомами для отбора животных служили клинические проявления; полиурия, полидипсия, снижение аппетита, прогрессирующая кахексия. В сыворотке крови этих животных отмечались повышение содержания уровней мочевины, креатинина, щелочной фосфатазы, неорганического фосфора; концентрация общего кальция находилась на нижней границе нормы или была снижена.

У этих собак дополнительно определяли уровень паратиреотропного гормона, кальция, фосфатов, ионизированного кальция, костной фракции щелочной фосфатазы и витамина Д в сыворотке крови. Контрольная группа включала 20 клинически здоровых животных такой же возрастной категории с показателями крови, находящимися в пределах референтных значений, характерных для данного вида.

Для определения динамики развития вторичного гиперпаратиреоза с прогрессированием почечной недостаточности, обследуемых собак мы разделили на 4 группы, соответствующие стадиям заболевания (почечной недостаточности) в зависимости от уровня креатинина в сыворотке крови. К первой группе относятся собаки с уровнем креатинина 149-192, ко второй группе – 193-250, к третьей – 250-340, к четвертой – более 341мкмоль/л.

У собак с разными стадиями ХПН не наблюдалось одинаковой клинической картины уремических проявлений, зависящих от стадии заболевания. Тем не менее, тенденция к ухудшению общего состояния на более поздних стадиях почечной недостаточности была очевидна. Кроме того мы наблюдали нарушения со стороны опорно-двигательного аппарата.

Клинические проявления, связанные с патологическими процессами в опорно-двигательном аппарате собак с хроническими болезнями почек, вызваны развитием вторичного почечного гиперпаратиреоза. Примером таких проявлений служит фиброзно-кистозный остеит в костях, не несущих нагрузки. У собак встречается достаточно редко, тем не менее в наших исследованиях описаны два случая остеодистрофии костей черепа у собак.

Для оценки нарушения кальций-фосфорного обмена и метаболических изменений в костной ткани определяли следующие лабораторные показатели: уровни кальция, фосфора, общей щелочной фосфатазы и ее костного изофермента в сыворотке крови.



Pages:   || 2 | 3 |
 





 
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.