авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 6 |

Особенности проявления цитробактериоза, кандидамикоза у рыб и санитарная оценка рыбопродуктов

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

ОЖЕРЕДОВА НАДЕЖДА АРКАДЬЕВНА

ОСОБЕННОСТИ ПРОЯВЛЕНИЯ ЦИТРОБАКТЕРИОЗА,

КАНДИДАМИКОЗА У РЫБ И САНИТАРНАЯ ОЦЕНКА

РЫБОПРОДУКТОВ

16.00.03. – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология,

микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора ветеринарных наук

Ставрополь 2008

Работа выполнена в ФГОУ ВПО

«Ставропольский государственный аграрный университет»

Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ, доктор

биологических наук, профессор

Дмитриев Анатолий Федорович

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Тимченко Людмила Дмитриевна

доктор ветеринарных наук, профессор

Малышева Людмила Александровна

доктор ветеринарных наук, профессор

Филиппов Николай Васильевич

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Кубанский государственный

аграрный университет»

Защита состоится 23 декабря 2008 года в 10 часов на заседании диссертационного совета Д. 220.062.02 при ФГОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет», по адресу: 355017, г. Ставрополь, пер. Зоотехнический 12.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет».

Автореферат разослан «____» ________________2008 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Квочко А.Н.

  1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Повышение жизненного уровня населения нашей страны, его обеспечение всеми необходимыми продуктами питания, а также безопасность продовольственного сырья и пищевой продукции является одной из важнейших задач на современном этапе. В решении этой проблемы существенное значение приобретает увеличение производства и потребления рыбы, которое к настоящему времени сократилось в 2 раза по сравнению с 1990 годом. Вместе с тем, ее производство всегда оказывалось в 2-3 раза дешевле в сравнении с мясом. В то же время по своей питательной ценности рыба мало уступает мясу сельскохозяйственных животных, а по степени усвояемости в организме человека значительно превосходит говядину. Вместе с тем, дальнейшему увеличению и сохранению запасов промысловых и прудовых рыб в последние годы в значительной степени препятствуют почти ежегодные вспышки новых, недостаточно изученных инфекционных заболеваний рыб, названных краснухоподобными (жаберными), ранее не регистрировавшихся в российских водоемах и обусловливающих массовую гибель рыб.

Вспыхнувшие в середине 50-х годов прошлого столетия указанные эпизоотии среди холодноводных в сравнительно короткое время довольно быстро охватили прудовые карповые хозяйства, расположенные в различных климатических зонах, начиная от северо-запада и центральной черноземной полосы до Северного Кавказа, от Волго-Каспийского региона до Западной Сибири. Однако, несмотря на проводимые исследования, природа этих заболеваний до сих пор остается невыясненной. Изучением этой патологии занимались ряд исследователей (А.Ф. Вылегжанин, 1964; Е.С. Цой, 1978; В.Д. Ящук, 1988; Валедская А.М., 1991; М.А. Сидоров, Д.И. Скородумов, В.Б. Федотов,1995; В.И. Афанасьев, Л.И. Лаврентьева, Г.В. Афанасьев, Г.И. Сапожников, 1997; K.В. Бурлаченко, Л. И. Бычкова, 2003; Л.В. Ларцева, Я.М. Болдырева, 2004;С.Г Виноградова, Е.М. Харенко, 2005; О.В. Казимирченко, 2006; N. Tereza et al, 1980; D. Guston, B. Austin, 1990; Carunsagar, 1992). Однако роль С. freundii в патологии рыб до сих пор остается неясной.



В рыбохозяйственных водоемах, и в частности, в прудовых хозяйствах, отмечается заболевание рыб кандидамикозом (З.Г. Бахтиярова, 1987; С.В. Петрович и Н.В. Войнова, 1989; Ларцева Л.В., 2004). Вместе с тем, несмотря на отдельные исследования, специфика проявления указанного заболевания, механизм заражения рыб возбудителями этой болезни также до сих пор остаются недостаточно изученными.

На фоне вспыхнувших эпизоотий краснухоподобных (жаберных) заболеваний рыб в ряде регионов прикаспийской зоны и в частности, в Астраханской области и других зонах, среди населения, употреблявшего в пищу пораженные рыбные продукты, стали отмечаться вспышки пищевых заболеваний невыявленной этиологии. По данным ФАО, на долю эпидемий рыбного происхождения ежегодно приходится до 20-35% от общего количества вспышек пищевых заболеваний наблюдаемых в мире.

В связи с нередким выделением из организма рыб, пораженных краснухоподобными (жаберными) заболеваниями, цитробактерий и дрожжеподобных грибов рода Саndida, серьезной опасностью их отдельных представителей, таких как С. freundii и С. аlbicans для организма человека, были проведены специальные исследования по изучению степени контаминации указанными микроорганизмами рыбы и рыбных продуктов, а также степени их патогенности. Тем более, что в специальной научной литературе имеются указания об опасности С. freundii, выделяемых из других видов пищевых продуктов, для организма человека. О возможности цитробактерий, в том числе и С. freundii вызывать пищевые заболевания у людей сообщали В.П. Рагинская, 1973; А.А. Покровский, 1985; С.А. Шевелева, Н.Р. Ефимочкина, А.А. Иванов, Н.П. Турурушкина, Т.И. Фролочкина, 2004; а на способность гриба С. аlbicans обусловливать одноименное заболевание кандидамикозом у человека указывали П.Н. Кашкин, 1958; Н.П. Елинов, 1964; А.М. Ариевич, З.Г.Степанищева, 1965;Е.Н. Морозов, 1971; В.Н. Кулага, 1974; Р.Н. Реброва, 1979.

Ряд исследователей (Е.В. Себряков, 1985; Т.Т. Сутеева, 1987; Л.В. Ларцева, 2004) выявили высокую обсемененность грибами рода Candida отдельных видов пищевых продуктов животного происхождения и указывают на их эпидемиологическую опасность в возникновении кандидамикоза у детей при употреблении в пищу таких продуктов. Однако вопрос о распространения цитробактерий и дрожжеподобных грибов рода Саndida, обнаруживаемых в рыбе, пораженной кранухоподобными (жаберными) заболеваниями, до настоящего времени предметно не изучался.

Цель и задачи исследований. Целью наших исследований явилось изучение роли цитробактериоза и кандидамикоза в этиологии краснухоподобных (жаберных) заболеваний рыб, особенностей проявления этих заболеваний у рыб, санитарная оценка рыбопродуктов, контаминированых цитробактериями и грибами рода Candida.

При решении этой цели с учетом степени изученности проблемы были поставлены следующие задачи:

1. Провести эпизоотический мониторинг в рыбохозяйственных водоёмах России и в Ставропольском крае по изучаемым заболеваниям рыб.

2. Изучить особенности клинического, патоморфологического проявления цитробактериоза и кандидамикоза рыб.

3. Изучить биологические свойства цитробактерий и грибов рода Candida, выделенных у карповых рыб.

4. Выяснить устойчивость С. freundii и гриба С. аlbicans к физико-химическим факторам и антибиотикам.

5. Разработать систему диагностических, лечебно-профилактических мероприятий при цитробактериозе и кандидамикозе карповых рыб.

6. Провести санитарную оценку рыбы и рыбных продуктов при цитробактериозе и кандидамикозе.

Научная новизна работы. Впервые нами были выяснены источники распространения цитробактерий в российских водоемах, особенности клиникого, патоморфологического проявления цитробактериоза и кандидамикоза рыб, изучена специфика биологических свойств возбудителей этих болезней, патогенность которых подтверждена экспериментально заражением подопытных рыб и белых мышей.

Выявлена восприимчивость подопытных рыб к возбудителям цитробактериоза при трех температурных режимах (+5оС +7оС, +15оС +17оС, +20оС +25оС), при семи способах заражения (водном, пероральном, жаберном, кожном, внутримышечном, интраперитониальном, контактном) и впервые была доказана возможность заражения этими микроорганизмами подопытных растительноядных рыб (пестрых толстолобиков). Аналогичные эксперименты по заражению подопытных рыб были проведены и с возбудителями кандидамикоза, которые показали положительные результаты, особенно при водном и пероральном способах их заражения.

Выяснены условия роста и размножения возбудителей цитробактериоза и кандидамикоза, их отношение к различным физическим (высокой и низкой температуре) и химическим факторам, разработаны методы диагностики, включающие дифференциацию изучаемых заболеваний.

Впервые дана полная санитарная характеристика рыбных продуктов, контаминированых цитробактериями и дрожжеподобными грибами рода Саndida.

Совокупность выполненных нами исследований является актуальной научной разработкой, направленной на сохранение запасов промысловых рыб, повышение их продуктивности и качества рыбной продукции.

Теоретическая и практическая значимость работы. В результате комплексных исследований нами получены теоретические и практические данные по цитробактериозу и кандидамикозу рыб, на основании которых можно устанавливать комплексный диагноз указанных заболеваний карповых рыб с учетом результатов анализа эпизоотической ситуации, особенностей клинических, патоморфологических проявлений заболеваний, биологических свойств возбудителей болезней и осуществлять проведение дифференциальной диагностики цитробактериоза и кандидамикоза рыб от сходных болезней, что позволит успешно проводить лечебно-профилактические мероприятия. Представленные сведения по санитарной оценке способствуют улучшению качества рыбопродуктов.

Основные аспекты практического использования результатов изложены в методических рекомендациях по диагностике, терапии и профилактике болезней рыб (цитробактериоза и кандидамикоза), утвержденных в РАСХН 1 июля 2008 г., одобренных секцией «Инфекционной патологии животных» Отделения ветеринарной медицины (протокол № 3 от 27 сентября 2007 г.), а также в методических рекомендациях «Диагностика цитробактериоза рыб», «Диагностика кандидамикоза рыб», одобренных секцией животноводства и ветеринарии научно-технического совета МСХ Ставропольского края (протокол №2 от 10 марта 2006 г.).

Результаты исследований могут быть использованы в практической деятельности сотрудниками ветеринарных лабораторий, рыбоводами, фермерами, специалистами интересующимися вопросами инфекционной патологии, при составлении руководств, учебных и справочных пособий.

Основные положения, выносимые на защиту:

– Одной из причин вспышек краснухоподобных (жаберных) заболеваний рыб в рыбохозяйственных водоемах России, в том числе Ставропольском крае являются возбудители цитробактериоза, кандидамикоза или их ассоциативное проявление.

– Особенности клинического, патоморфологического проявления цитробактериоза и кандидамикоза у рыб.

– Возбудители цитробактериоза и кандидамикоза – C. freundii, C. albicans, имеют характерные биологические свойства, при экспериментальном заражении вызывают заболеваемость и летальность особей.

– У рыб инфицированных цитробактериозом и кандидамикозом снижаются товароведческие показатели, а технологическая обработка тушек обеспечивает их обезвреживание.

Реализация результатов исследований. Результаты полученных исследований внедрены в рыбоводных хозяйствах Ставропольского края (ООО «Лотос», ЗАО «Голубая Нива», рыбколхоз «Зеркальные пруды», прудах с. Арзгир у индивидуального предпринимателя Геращенко А.Д.), а также в ГУ «Кропоткинская зональная ветеринарная лаборатория» и сельскохозяйственном кооперативе – рыболовецкая артель «Гулькевическая» Краснодарского края.

Кроме того, материалы диссертационной работы используются в учебном процессе по курсу микробиологии на кафедрах Ставропольского государственного аграрного университета, Московской ГАВМиБ им. К.И. Скрябина, Донского государственного аграрного университета, Новосибирского государственного аграрного университета, Костромской государственной сельскохозяйственной академии, Карачаево-Черкесской государственной технологической академии, Калмыцкого государственного университета, Дагестанской государственной сельскохозяйственной академии, Кубанского государственного аграрного университета.





Апробация работы. Основные положения и результаты исследований диссертационной работы доложены и одобрены на научных конференциях Ставропольского государственного аграрного университета (1993, 1996, 2001, 2004, 2005, 2007), Алтайском (1995, 1996, 1998, 2000, 2002), Краснодарском (1996) и Башкирском (1999) государственных аграрных университетах, Российской академии сельскохозяйственных наук (1996), Бурятской сельскохозяйственной академии (1998), Калмыцком государственном университете (2003), Вятской сельскохозяйственной академии (2005).

Публикация результатов исследований. Основные положения диссертации изложены в 44 работах, опубликованных в тематических сборниках, материалах конференций, 3 рекомендациях. В центральных научных журналах опубликовано 7 статей, издана 1 монография.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 360 страницах, содержит 79 таблиц, 19 рисунков. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов и предложений. Список литературы включает 383 источника, в том числе 111 иностранных авторов.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы исследований

Работа выполнялась на кафедрах эпизоотологии и микробиологии, анатомии и гистологии, патологической анатомии и ветсанэкспертизы, в межфакультетской биохимической лаборатории Ставропольского государственного аграрного университета, в прудовых хозяйствах и естественных водоемах Ставропольского края, стационарно неблагополучных по изучаемым заболеваниям, а также в отдельных рыбохозяйственных водоемах других областей Северного Кавказа, при возникновении эпизоотии. В Ставропольском крае в процессе проводимых исследований использовали рыбу, выловленную из 6 прудовых хозяйств и 5 естественных водоемов. В каждом рыбохозяйственном водоеме Ставрополья взятие материала проводили в течение трех и более лет, в весенний, осенний, летний, а иногда и в зимний периоды года. Основными объектами исследований являлись различные виды карповых рыб (карп, карась, толстолобики). Исследованию подвергали преимущественно товарную рыбу в период ее массового вылова. Всего в процессе проведения исследований в рыбохозяйственных водоемах, стационарно неблагополучных по изучаемым заболеваниям было исследовано только в прудовых хозяйствах 22 084 экземпляров карповых рыб, в том числе 9 892 на наличие цитробактериоза и 12 192 – кандидамикоза, морфологическому исследованию – 244, бактериологическому – 171, микологическому – 334 экземпляра рыб. При экспериментальном заражении и наблюдении было использовано 353 экземпляра подопытных рыб (карпов и пестрых толстолобиков), 144 лабораторных животных (белых мышей). В процессе проведения морфологического, химического и аминокислотного состава тушек пораженных рыб, было проведено 252 анализа мяса, а при выяснении устойчивости цитробактерий и грибов рода Саndida к различным физико-химическим факторам, в том числе тепловой, холодильной обработке и посолу, было выполнено 32 эксперимента. Взятие материала для бактериологического, микологического и других методов исследования проводили от пораженных рыб в рыбоводных хозяйствах, стационарно неблагополучных по цитробактериозу и кандидамикозу. Отбор проб проводили на месте с первичным высевом материала на питательные среды и брали их только от тех живых пораженных рыб, которые имели специфические для заболеваний клинические и морфологические изменения или же доставляли их в живом виде в лабораторию в зависимости от складывающихся условий. При взятии проб соблюдали правила асептики. В питательные среды в процессе проведения микологического исследования добавляли растворы пенициллина и стрептомицина по 200-250 ЕД на 1 мл каждого препарата.

Бактериологическое исследование рыб на наличие С. freundii.

При проведении бактериологического исследования, на наличие указанного вида микроорганизма, были использованы карповые рыбы, выращенные в 3 прудовых хозяйствах стационарно неблагополучных по цитробактериозу – Сергиевское (СПК «Александровское»), Донское (ООО «Волна»), Курсавское (СПК «Курсавский») и в 3 естественных водоемах (оз. Восточный Маныч, Отказненское и Чограйское водохранилища), имевшие специфические клинические и патоморфологические изменения для цитробактериоза. К этим признакам относились более рельефно выраженное кроваво-красное окрашивание поверхности тела рыб, геморрагическое поражение внутренних органов и наличие изъязвлений слизистой нисходящего отдела кишечника, а также проявление некроза жаберного аппарата. Выделение и идентификацию культур цитробактерий проводили в соответствии с методическими указаниями А.А. Покровского (1985) и других исследователей. Первичные высевы материала высевали на среды Симонса с цитратом натрия и инкубацией в термостате в течение 24-48 часов при температуре +25оС +26оС. После выделения чистой культуры проводили пересевы на среду Эндо, агар Плоскирева, висмут-сульфитный агар. Морфологию цитробактерий определяли в мазках окрашенных по Граму, а подвижность бактерий выявляли в висячей капле. Ферментативную активность определяли на углеводах (глюкозе, сахарозе, лактозе, маните, мальтозе, сорбите, ксилозе, рамнозе, инозите и арабинозе, выявляли отношение к -галактозидазе, мукату). Изучали гемолитические, протеолитические и толерантные свойства. Воспроизводили реакции на индол, сероводород и ставили реакцию Фогес-Проскауера. Проводили серологическую идентификацию с помощью специфических сывороток.

При определении патогенности изучаемых культур ставили биопробу на подопытных сеголетках и годовиках карпов при интраперитониальном введении суспензии высоковирулентных культур цитробактерий.

При изучении влияния на виды рыб температуры и способа заражения высоковирулентными культурами С. freundii, было использовано 154 экземпляра подопытных сеголетков карпов, содержащихся при 3 температурных экспозициях (+5оС +7оС, +15оС +17оС, +20оС +25оС). Помимо подопытных рыб при экспериментальном заражении цитробактериями интраперитониальным путем было использовано 72 белые мыши.

Отбор проб образцов мышечной ткани, внутренностей от пораженных и здоровых рыб осуществляли в соответствии с ГОСТ 24-896-81, а также ГОСТ 76-31-85. Отбор проб для микробиологических исследований проводили в соответствии с ГОСТ 26-669-85.

Гистологические исследования проводили по общепринятой методике, срезы окрашивали гематоксилин-эозином, а с целью наилучшей индикации С. freundii – по модифицированному способу Боголепова.

Микологическое исследование на наличие грибов рода Саndida.



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 6 |
 

Похожие работы:







 
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.