авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 |   ...   | 4 | 5 ||

Теоретические и экспериментальные аспекты создания лекарственных средств на основе сырья природного происхождения

-- [ Страница 6 ] --

Результаты исследования срока годности гранул ФЭС, упакованных в пакеты из пленки с металлизированным покрытием, при температуре 15-250С и влажности не более 60+5%, позволили установить стабильность показателей качества в течение 3 лет.

Изучение фармакологических свойств субстанций и

лекарственных форм на их основе

Исследование острой токсичности. Определение острой токсичности ФЭС и НЭС проводили на беспородных неполовозрелых белых крысах самцах по методу В.В. Прозоровского с соавт. (1978). Результаты однократного внутрибрюшинного и перорального введения экстракта свидетельствует о его низкой токсичности. Вычислить LD50 не удалось, т.к. в течение первых суток эксперимента и в последующих двух недель гибели животных не наблюдалось. В ходе оценки хронической токсичности специфических ее видов не выявлено аллергенности, мутагенности и местнораздражающего действия экстракта.

Антимутагенное действие сухих водных экстрактов изучаемых растений и НЭС исследовали на модели индуцируемых хромосомных аберраций (ХА) в клетках костного мозга мышей линии СВА. Выбор индуктора производили среди мутагенов с известным механизмом ДНК - повреждающего действия (циклофосфамид – непрямой алкилирующий мутаген, диоксидин – прямой мутаген прооксидантного действия), а также на модели радиационного индуцированного мутагенеза. Экстракты вводили животным в дозах 1, 5 и 20 мг/кг внутрижелудочно в течение 7 дней до мутагенного воздействия.

Из данных, представленных в таблице 21, следует, что исследуемые препараты обладали достаточно выраженным антимутагенным действием. ФЭС и НЭС снижает число хромосомных мутаций при использовании непрямого мутагена циклофосфамида. Экстракт цветков ноготков, ФЭС и НЭС снижали количество радиационно - индуцированных хромосомных аберраций в клетках костного мозга мышей лини и СВА. Максимальной активностью на этой модели обладал экстракт цветков ноготков, более чем в 2 раза снижавший уровень радиационного повреждения клеток костного мозга.

Это хорошо согласуется с многочисленными литературными данными об антиоксидантных свойствах флавоноидов, которые в большей или меньшей степени присутствуют у большей части веществ этой группы.

Иммуномодулирующее действие. В наших исследованиях изучено влияние водного НЭС и экстрактов отдельных растений, входящих в его состав, на спонтанную пролиферацию лимфоцитов, выделенных из селезенки мышей и их способность стимулировать пролиферативный ответ этих клеток на Т- и В- клеточные митогены.

Таблица 21

Мутаген-индуцированные хромосомные аберрации клетках костного мозга

мышей линии СВА при курсовом введении экстрактов цветков ноготков, ФЭС и НЭС

Группа животных % спонтанных хромосомных аберраций % хромосомных аберраций при введении циклофосфамида % хромосомных аберраций при введении диоксидина % хромосомных аберраций при радиационном облучении
Экстракт цветков ноготков Контроль 2,5±0,42 32,5±2,2 18,3±2,1 26,09±3,6
1 мг/кг 1,1±0,29 28,8±3,0 18,2±1,4 17,34±2,87*
5 мг/кг 1,3±0,50 27,1±3,7* 16,6±1,1 13,11±1,97**
20 мг/кг 0,9±0,31 23,3±2,6** 15,3±1,1* 10,93±2,76**
ФЭС Контроль 1,9±0,55 36,1±4,0 19,6±2,1 19,93±2,07
1 мг/кг 1,8±0,13 29,89%±3,1 17,1±0,9 14,44±2,01*
5 мг/кг 0,8±0.16 25,85±2,6* 16,7±2,0 10,13±0,42**
20 мг/кг 0,4±0.23 21,66±2,1** 14,6±2,9* 8,44±0,39**
НЭС Контроль 2,1±0,37 36,8±3,3 18,4±0,9 19,56±0,26
1 мг/кг 1,1±0,29 24,1±2,2* 16,6±1,4 11,11±1,97**
5 мг/кг 1,3±0,27 23,4±1,3** 15,5±0,9* 7,44±1,04**
20 мг/кг 0,8±0,18 19,6±1,4** 13,1±1,4** 9,00±1,7**
*Р<0,05, **P<0,01


В качестве Т- клеточного митогена нами использовался фитогемагглютинин (ФГА), в качестве В- клеточного митогена - бактериальный липополисахарид.

Экстракты отдельных растений и НЭС спонтанную пролиферацию лимфоидных клеток селезенки мышей, пролиферативный ответ на Т-клеточный митоген фитогемагглютинин. Экстракт цветков ромашки обладает умеренным стимулирующим действием на супрессорный Т-клеточный митоген конканавалин-А, а также обладает выраженным стимулирующим влиянием на индукцию пролиферативного ответа спленоцитов В-клеточным митогеном липополисахаридом (табл.22).

Таблица 22

Влияние курсового введения экстрактов цветков ромашки, травы очанки, ФЭС и НЭС на спонтанную и митоген-индуцированную пролиферацию Т-лимфоцитов

Группа животных Без митогена ФГА Кон - А ЛПС
Экстракт цветков ромашки Контроль 70080±958 55473±6583 63720±9441 25029±3610
1 мг/кг 16949±268** 56484±7671 75476±7140 37394±2087*
5 мг/кг 16659±916** 57307±6622* 81234±9734** 45020±1907**
20 мг/кг 21721±998* 55143±6204** 84053±6110* 41293±2760**
ФЭС Контроль 7090±536 61246±7185 69643±6311 19993±2907
1 мг/кг 17080±958** 69589±3119 7171±9998 14144±2801
5 мг/кг 16124±348** 65785±2640* 6467±6203 17143±4210
20 мг/кг 17054±429** 61166±2110** 65463±12928 18564±3900
Экстракт травы очанки Контроль 7062±645 73444±8196 59013±6830 21129±3940
1 мг/кг 6640±725 88976±9113 67121±4569 19078±4012
5 мг/кг 6141±705 96588±8950* 62011±7111 24144±2920
20 мг/кг 6907±603 137449±9423** 63189±7010 23025±1090
НЭС Контроль 8261±790 66223±8301 68420±9035 19506±2656
1 мг/кг 16995±692** 71927±9727 83016±4040 21911±1970
5 мг/кг 17204±695** 74927±9727 89550±9125** 24344±4040*
20 мг/кг 17810±801** 101809±9706** 98101±14101** 29340±3171**
*Р<0,05, **P<0,01

Таким образом, включение в состав сбора растений действующих на отдельные звенья иммунной системы приводит к его сбалансированному стимулирующему влиянию на все звенья иммунной системы.

Влияние на рост опухолевых клеток. В качестве модели опухолевого роста мы использовали перевиваемые клеточные линии цервикальной карциномы (HeLa), колоректального рака (CaCo-2) и карциномы яичника (CaOv). В исходной культуре подсчитывали число клеток и преинкубировали в течение суток, затем добавляли к ним изучаемые растительные экстракты (фильтрационно стерилизованные) в дозе 0.1, 1.0, 10.0 мкг/мл. Исследуемые препараты добавляли в культуру клеток вместе с с радиоактивно (Н) меченным тимидином.

Большая часть исследуемых экстрактов не оказывала ни положительного, ни отрицательного эффекта на пролиферацию опухолевых клеток (рисунок 9).

Однако установлено, что экстракт листьев земляники тормозит рост низкодифференцированной линии опухолевых клеток СаОv на модели IN VITRO. В литературных данных мы нашли косвенное подтверждение этого факта, т.к. экстракт этого растения может индуцировать запрограммированную гибель клетки (апоптоз). В то же время, мы считаем более вероятным влияние компонентов экстракта на усиление дифференцировочных процессов и связанное с этим подавление митотической активности.

Безусловно, экстракт земляники или НЭС нельзя рассматривать как возможные противоопухолевые агенты. В то же время, их применение, возможно, будет полезно в целях профилактики развития опухолевого процесса, когда число образовавшихся опухолевых клеток невелико, и некоторое торможение их развития будет достаточным для полноценной активации иммунного процесса способного элиминировать злокачественный рост.

 Влияние растительных-4

Рисунок 9. Влияние растительных экстрактов на уровень включения тимидина в ДНК опухолевых клеток линии CaOv

Влияние на репарационные процессы. В работе использовали эпителиальные клеточные линии WI-38, а также фибробласты, полученные из аорты крыс линии WISTAR. В опытные серии добавляли изучаемые экстракты в дозах 0,1; 1,0; 10,0 мкг/кг. После 72 часов инкубации клетки отделяли с помощью трипсина и подсчитывали количество живых клеток.

Результаты, представленные на рисунке 10 свидетельствуют, что ни один из изучаемых экстрактов не подавлял рост эпителиальных клеток или фибробластов в культуре. Экстракт травы манжетки, экстракт цветков ромашки и НЭС повышают пролиферацию нормальных эпителиальных клеток линии WI-38 до 110-130% от контрольного уровня. Эти же экстракты умеренно (до 20%) стимулируют пролиферацию нормальных фибробластов аорты крыс линии WISTAR (рис. 11).

В обоих случаях не было отмечено какого-либо влияния на морфологию клеток. Количество погибших клеток во всех опытных сериях и контроле было одинаковым. Это свидетельствует об отсутствии цитотоксических свойств у исследуемых экстрактов.

Ранее предполагалось, что возможное их ранозаживляющее действие связано с торможением процессов перекисного окисления возникающим в ране и препятствующим ее заживлению или предотвращением ферментативной деградации здоровых клеток в ране.

 Влияние экстрактов растений и-5

Рисунок 10. Влияние экстрактов растений и НЭС на пролиферативную активность эпителиальных клеток WI-38.

Теперь, можно утверждать, что вещества, содержащиеся в исследуемых растениях и их экстрактах, могут оказывать и прямое стимулирующее действие на пролиферативные процессы в ране, что способствует ее быстрому заживлению.

 Влияние экстрактов растений и-6

Рисунок 11. Влияние экстрактов растений и НЭС на пролиферативную активность фибробластов аорты крыс





Методом линейных ран на белых беспородных крысах обоего пола установлено ранозаживляющее действие ПЛ «Фиадент».

Противовоспалительное действие. Антиэкссудативные свойства ФЭС изучены на моделях адреналинового отека у мышей и формалинового отека лапы крыс. Установлено, что он проявляет активность сопоставимую с ортофеном. На модели острого каррагенинового отека установлено антиэкссудативное действие ПЛ «Фиадент».

Антипролиферативные свойства ФЭС оценивали на модели «ватной гранулемы». Экстракт оказывал выраженное влияние на фазу пролиферации, сопоставимое с действием фенилбутазона.

Общие выводы

  1. Разработана методология создания лекарственных средств на основе сырья природного происхождения.
  2. На основании литературных данных и собственных исследований разработан сбор «Нормофит», определены его товароведческие показатели, установлены нормы содержания основных групп БАВ: флавоноидов, полисахаридов, а также аминокислот, макро- и микроэлементов. Предложен унифицированный подход к стандартизации сырья, экстрактов, лекарственных форм на их основе.
  3. На основании изучения основных факторов влияющих на процесс извлечения БАВ разработаны технологии получения ФЭС и НЭС.
  4. Сформулированы медико-фармацевтические требования к пленочным системам трансмукоидного назначения, обеспечивающие их функциональную пригодность при аппликационной терапии. Теоретически и экспериментально обоснованы составы и технология полимерной матрицы – носителя на основе биодеградирующих полимеров природного происхождения (Na КМЦ, Na альгинат).
  5. С учетом сформулированных требований созданы новые лекарственные формы – ПЛ «Фиадент», ПЛ «Нормофит», ПЛ с пиявитом. Предложена оптимизация проведения биофармацевтических исследований по изучению БД и кинетики высвобождения лекарственных веществ из лекарственных форм методом кондуктометрии. Изучен механизм релиза БАВ, позволяющий охарактеризовать пленки как матричные системы диффузионного типа.
  6. Разработан состав и технология получения гранул ФЭС. Предложена влажная грануляция с добавлением экстракта дробно рассчитанными порциями.
  7. Результаты исследований лекарственных форм нашли отражение в разработке нормативной документации: ФСП «Фиалки экстракт сухой», проектов ФСП «Пленки лекарственные «Фиадент», «Гранулы фиалки экстракта сухого», «Сбор «Нормофит», «Нормофит» экстракт сухой», «Пленки лекарственные «Нормофит», «Пленки лекарственные с пиявитом».
  8. На основании фармакологических исследований установлено наличие противовоспалительной, регенерирующей, иммуномодулирующей активности экстрактов и их ЛФ. Результаты доклинического токсикологического исследования ФЭС свидетельствуют, что препарат обладает малой токсичностью как при однократном введении внутрь белым мышам и крысам, так и при длительном (6 мес) введении крысам и собакам. Препарат не вызывает отдаленных отрицательных эффектов (мутагенность, эмбриотоксичность, тератогенность, аллергизирующие свойства).

Основное содержание работы изложено в следующих публикациях:

  1. Исследование по разработке состава и технологии фитопленок /Олешко Л.Н., Олешко Г.И., … Блинова О.А. //Тез. докл. Научно - практ. конф., посв. 25-ти летию фармац. факультета Самарского ГМУ.- Самара: Сам ГМУ, 1996.- С. 58-59.
  2. Биорастворимые лекарственные пленки - эффективное средство аппликационной терапии в стоматологии /Олешко Л.Н., Симановская Е.Ю., Болотова М.Ф., Блинова О.А. и др. //Материалы конференции, посвященной 35-летию ЦНИИС, М., 1998.-С.88-92.
  3. Исследования по выбору состава матрицы для биорастворимых лекарственных пленок. /Олешко Л.Н., Голованенко А.Л., Блинова О.А. и др. //Материалы юбил. межвуз. научно-практ. конф. профессорско-препод. состава, посв. 275-летию г. Перми и 80-детию фармац. образования на Урале.- Пермь, 1998.- С.117.
  4. Идентификация биологически активных соединений методами ТСХ и ВЭЖХ /Петухова Т.В., Олешко Л.Н., Блинова О.А. и др.//Актуальные проблемы медицины и фармации: Мат. 63-й итоговой научн. конф. молодых ученых и студ. - Курск, 1998.-С. 232-233.
  5. Исследование фитопленок, содержащих биологически активные вещества из травы фиалки трехцветной и полевой /Олешко Л.Н., Симановская Е.Ю., Печерская Л.Г., Блинова О.А. и др. //Стоматология западного Урала: состояние, проблемы, перспективы: Мат. научно-практ. конф. Пермской ассоциации стоматологов. - Пермь, 1998.- С.25-26.
  6. Использование лекарственных пленок в комплексной терапии стоматологических заболеваний /Олешко Л.Н., Симановская Е.Ю., Болотова М.Ф., Блинова О.А. и др. //Стоматология западного Урала: состояние, проблемы, перспективы: Мат. научно-практ. конф. Пермской ассоциации стоматологов. - Пермь, 1998.-С.23-24.
  7. Изучение кинетических закономерностей биодеструкции лекарственных пленок кондуктометрическим методом /Рюмина Т.Е., Олешко Л.Н., Блинова О.А. и др. //Фармация в XXI веке: инновации и традиции: Тез докл. международ. научн. конф. – С.-Пб, 1999.- С. 246-247.
  8. Опыт применения биорастворимых лекарственных пленок, содержащих Пиявит в клинике различных форм гингивита. /Блинова О.А., Гибадуллина Н.В., Гилева О.С., Олешко Л.Н. //Актуальные проблемы фармацевтической науки и образования: итоги и перспективы: Материалы юбил. межвузовской научно-практ. конф. профессорско-преподавательского состава, посвященная 40-му выпуску провизоров заочного обучения ПГФА.- Пермь, 2000.- С. 93-94.
  9. Биофармацевтическое исследование лекарственных пленок /Рюмина Т.Е., Олешко Л.Н., Блинова О.А. и др. //Человек и лекарство: Тез. докл. VII Российского национального конгр.-М., 2000.-С. 531.
  10. Исследования по разработке экстракционных препаратов из травы фиалки /Смирнова М.М., Олешко Г.И., Печерская Л.Г., Блинова О.А.//Актуальные проблемы фармац. науки и образования: итоги и перспективы: Материалы межвуз. научно-практ. конф., посв. 85-летию высшего образования на Урале.-Пермь: ПГФА, 2001.-С.116.
  11. Разработка состава и технологии пленок «Пиявит»/ Блинова О.А., Лещева Е.Д., Кушнирева О.Н. и др. //Актуальные проблемы фармац. науки и образования: итоги и перспективы: Материалы межвуз. научно-практ. конф., посв. 85-летию высшего образования на Урале.-Пермь: ПГФА, 2001.-С.126.
  12. Эффективность использования различных лекарственных форм препарата «Пиявит» в комплексном лечении воспалительных заболеваний пародонта /Гибадуллина Н.В., Гилева О.С., Шустов А.Д., Блинова О.А.//Актуальные проблемы фармац. науки и образования: итоги и перспективы: Материалы межвуз. научно-практ. конф., посв. 85-летию высшего образования на Урале.-Пермь: ПГФА, 2001.- С.167.
  13. Гигиеническая и врачебная косметика (рецептурный справочник) /Чижова Е.Т., Мухамеджанова Д.М., Олешко Л.Н., Блинова О.А.и др. //Методические указания для самостоятельной работы студентов, интернов и слушателей ФУП.- Пермь: ПГФА, 2001.-80 с.
  14. Перспективная биологически активная добавка – фитокарамель с растительными экстрактами /Блинова О.А., Бегларян Г.М., Рюмина Т.Е. и др.//Человек и лекарство: Тез. докл. IX Росс. нац. конгр.- М., 2002.-С. 583.
  15. Комплексная переработ

    Pages:     | 1 |   ...   | 4 | 5 ||
     

Похожие работы:










 
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.