авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:   || 2 | 3 | 4 |

Антиоксидантное действие беридона в терапии пироплазмоза собак

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

Суменкова Елена Антоновна

Антиоксидантное действие беридона в терапии пироплазмоза собак

16.00.04 – ветеринарная фармакология с токсикологией

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Воронеж – 2007

Работа выполнена в ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р.Коваленко (ВИЭВ).

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор

Сидоров Игорь Валерьевич

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Слободяник Виктор Иванович

доктор биологических наук, профессор

Новик Тамара Самуиловна

Ведущая организация: ФГОУ ВПО Московский государственный
университет прикладной биотехнологии

Защита состоится «26» апреля 2007 г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 006.004.01 при ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Россельхозакадемии (394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114-б)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ ВНИВИПФиТ

Автореферат разослан «___ » ____________ 2007г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат биологических наук Ермакова Т.И.



1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Изучение процессов перекисного окисления липидов является основой для решения вопроса о целесообразности применения антиоксидантов в комплексе лекарственной терапии при заболеваниях различного генеза. Актуальность проблемы продиктована, прежде всего, необходимостью разработки принципов фармакокоррекции нарушений перекисного окисления липидов (ПОЛ) и системы антиоксидантной защиты (АОЗ) с помощью отечественных лекарственных препаратов, обладающих низкой токсичностью.

Проблема патологии, вызванной нарушением окислительных процессов в организме животного, важнейшей характеристикой которых является накопление токсических продуктов перекисного окисления липидов, имеет исключительно важное научное и практическое значение. Свободнорадикальные окислительные процессы являются значительным патогенетическим фактором многих заболеваний и патологических состояний (Белов А.Д и др. 1997; Давлетов Р.Г., 1998; Жлоба А.А., 2001; Кармолиев Р.Х., 2002; Журавлев А.И., 2003).

Коррекция нарушений перекисного (свободнорадикального) окисления липидов может предотвратить развитие патологического процесса или облегчить его течение, именно поэтому понимание характера изменений процессов пероксидации под влиянием лекарственного средства может являться одним из показателей, который определяет выбор препарата для лечения той или иной патологии.

Бесспорное значение имеет служебное собаководство, в котором задействовано большое количество собак, которые в значительной степени облегчают осуществление пограничного и таможенного контроля. Кровопаразитарное заболевание - пироплазмоз протекает с выраженным поражением внутренних органов (в основном печени и мышцы сердца) с тяжелыми последствиями. Также необходимо учитывать, что при отсутствии своевременного лечения в 99% случаев заболевание собак пироплазмозом приводит к гибели животных.



Как показали исследования последних лет (Гаджиева И.А., 1996; Новгородцева С.В., 1997; Казарина Е.В., 2000; Луцук С.И., 2001; Дьяченко Ю.В и др., 2004), пироплазмоз собак имеет широкое распространение во многих регионах России и, особенно, в зоне Северного Кавказа.

Проблема борьбы с пироплазмозом собак усугубляется еще и тем, что имеющиеся в нашей стране противопаразитарные препараты, не всегда обеспечивают достаточный эффект при лечении и имеют ряд побочных действий.(Schetters T.P., 1994; Vercammen F., 1996; Пожарова Н.Н.,2001,2005).

Среди наиболее известных препаратов, применяемых в терапии пироплазмоза собак, следует выделить беренил, относящегося к группе среднетоксичных препаратов. При подкожном и внутримышечном введении он не оказывает местно- раздражающего действия. Механизм действия беренила связан с непосредственным действием на паразитов рода Babesia и, кроме того, он обладает антибактериальным и фунгостатическим действием. (Milner R.J., 2001; VIDAL, 2003/ 2004).

Одним из новых отечественных антиоксидантных лекарственных средств, который успешно применяется в клинической практике, является димефосфон. Препарат способен изменять интенсивность перекисного окисления липидов и активность ферментов антиоксидантной системы организма (Гараев Р.С и др., 1970; Зиганшина Л.Е., 1988; Данилов В.И и др., 1992; Студенцова И.А и др., 1992; Кения М.В., 1992/1993; Аналиева Д.Ж и др., 1996).

Учитывая, что при различных патологических процессах происходит накопление свободных радикалов в организме животных, выше отмеченное явилось объективным обоснованием целесообразности разработки комплексного препарата, включающего в себя димефосфон, обладающего антиоксидантными свойствами и беренил – препарат специфической терапии при пироплазмозе.

Целью работы являлось изучение интенсивности процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты организма у здоровых и больных пироплазмозом собак и разработка комплексного препарата, обладающего антиоксидантным и специфическим противопаразитарным действиями.

Основные задачи исследований:

- научно обосновать и разработать новое лекарственное средство для лечения пироплазмоза собак – беридон;

- определить токсикологические показатели беридона и беренила на белых мышах;

- определить закономерности распределения, накопления беридона и беренила в органах, тканях кроликов, а также представить фармакокинетическую характеристику препаратов;

- определить антиокислительную активность (АОА) беридона в модельной системе ПОЛ;

- используя метод хемилюминесцентного анализа, провести предварительное определение наличия процессов ПОЛ, АОЗ в крови здоровых и больных пироплазмозом собак, установить возможности их коррекции при применении препаратов;

- определить по специфическим показателям влияние беридона, беренила на уровень процессов ПОЛ и состояния АОЗ у здоровых и больных пироплазмозом собак;

- изучить влияние беридона, беренила на некоторые морфологические и биохимические показатели крови у здоровых и больных пироплазмозом собак;

- определить эффективность беридона в комплексной терапии при острой форме пироплазмоза собак.

Научная новизна. Создано новое лекарственное средство для лечения пироплазмоза собак – беридон. Представлена токсикологическая характеристика и определены параметры фармакокинетики беридона и беренила. Впервые показана целесообразность использования метода хемилюминесцентного анализа для установления наличия уровня процессов ПОЛ и АОЗ в организме животных, определены закономерности распределения и накопления беридона и беренила в органах и тканях кроликов. Определены уровень перекисного окисления липидов и состояние антиоксидантной защиты организма и некоторые морфологические и биохимические показатели крови у здоровых и больных пироплазмозом собак, а также изменение их соотношений под влиянием беридона и беренила. Определена эффективность беридона в комплексной терапии при острой форме пироплазмоза собак.

Новизна подтверждена положительным решением на выдачу патента: «Препарат для лечения пироплазмоза собак» (рег. № 2006118961 от 01.06.2006).

Практическая значимость. Предложен новый препарат для лечения пироплазмоза у собак беридон, обладающий более высокой терапевтической эффективностью, чем беренил. Результаты исследований включены в «Методическое пособие по изучению и методам определения уровня свободно-радикального окисления липидов и антиоксидантной защиты у животных», которое рассмотрено и одобрено Ученым Советом ВНИИ экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко (25.10.2005) и секцией «Ветеринарная биотехнология» Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (14.02.2006).

Личный вклад соискателя заключается: в разработке и создании комплексного препарата беридона, установлении физиологических границ интенсивности хемилюминесценции, перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты у собак разного возраста; в проведении экспериментальных исследований по определению токсичности и аллергических свойств беридона на белых мышах и морских свинках; в изучении особенностей распределения беридона и беренила по органам и тканям организма кроликов и в определении их фармакокинетических параметров, в изучении терапевтической эффективности беридона в сравнении с беренилом при пироплазмозе на собаках; анализе и обобщении результатов исследований.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены:

На Международной научно-практической конференции: «Свободные радикалы, антиоксиданты и здоровье животных», проходившей во Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте патологии, фармакологии и терапии 21-22 сентября 2004, г. Воронеж.

На IV Национальной научно-практической конференции, с международным участием: «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека» 26 -30 сентября 2005, г. Смоленск.

На Ученом Совете Всероссийского научно – исследовательского института экспериментальной ветеринарии им.Я.Р.Коваленко (24.01.2007г).

Основные положения, выносимые на защиту:

- экспериментальные данные по фармако-токсикологической характеристики нового комплексного лекарственного средства беридона;

- результаты экспериментальных исследований, наличия процессов перекисного окисления липидов и системы антиоксидантной защиты организма у клинически здоровых и больных пироплазмозом собак и влиянии беридона и беренила на их интенсивность;

- данные экспериментальных исследований по сравнительному изучению терапевтической эффективности беридона и беренила.

Публикация результатов исследований. По материалам диссертационной работы опубликовано 3 научные статьи.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 162 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 5 таблицами основного текста, 13 таблицами и 10 рисунками в приложении. Работа состоит из разделов: введения, обзора литературы, материалы и методы исследования, собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, практических предложений, списка литературы из 240 источников, в том числе 95 иностранных авторов и приложения.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1.Материалы и методы исследований.

Работа выполнена в лаборатории фармакологии и токсикологии, биохимии ГНУ Всероссийский научно- исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я. Р. Коваленко (ВИЭВ), на опытной базе Вышневолоцкого отдела ВИЭВ (Тверская область), в клиниках г. Москвы (ООО «Столичный Зооцентр») и г. Улан-Удэ (НПЦ «Агроветсервис») в соответствии с утвержденными планами научно-исследовательских работ в период 2003 – 2006 гг. задание 02 РНТП фундаментальных и приоритетных прикладных исследований по научному обеспечению АПК РФ.

Определение интенсивности ПОЛ и состояния АОЗ у животных, а также установление антиокислительной активности изучаемых препаратов в модельной системе in vitro проводили с помощью метода хемилюминесценции (ХЛ), разработанного Р.Р. Фархутдиновым (2003) с использованием хемилюминометра ХЛ-003. Проверку стабильности работы установки проводили перед каждым измерением по эталону ЖС-19 (ГОСТ 9411-81), интенсивность свечения которого составляет 5,1105 квантов в секунду. Эта величина была принята за условную единицу (у.е.).

Для определения состояния процесса ПОЛ и системы АОЗ организма определяли следующие показатели: ТБК-активные продукты (малоновый диальдегид), каталаза и пероксидаза (И.Д.Стальная и др., 1977; В.С.Бузлама и др., 1997), церулоплазмин (Э.В. Тен., 1981), уровень общих фосфолипидов в сыворотке крови определяли по содержанию липидного фосфора (В.С.Камышников., 2000) и -липопротеидов в сыворотке крови определяли по методу М.И.Ледвина (1960).





В исследованиях использовали разработанный комплексный препарат беридон, имеющий в своем составе специфический противопротозойный препарат - беренил и антиоксидант - димефосфон.

Экспериментальные исследования проведены на 60 белых мышах, 28 кроликах, 80 морских свинках и 69 собаках породы восточно-европейская овчарка: 41 здоровой и 28 больных пироплазмозом.

Изучение острой токсичности беридона проводили на белых мышах живой массы 16-18 г. Препарат животным вводили внутримышечно, в форме раствора, в дозе 256,0 - 798,2 мг/кг массы тела. Дозы вводимого препарата были выбраны с учетом данных по степени токсичности беренила (R.J.Milner, 1997). Все исследования по изучению беридона проводились в сравнительном аспекте с беренилом. Расчет параметров токсичности проводили методом пробит-анализа, предложенного Миллером и Тейнтером (А.А.Ступников., 1975).

Исследования по выявлению аллергенных свойств препаратов, проводили с помощью метода «гистаминового шока» на морских свинках (А. Д.Адо., О.Г. Алексеева, 1968).

Изучение закономерностей распределения беридона и беренила по органам и тканям было проведено на 25 кроликах – самцах 2,5 - 3,0 кг живой массы. Препараты вводились однократно, внутримышечно, в форме раствора в терапевтической дозе, равной 0,25 - 0,3 мл в зависимости от веса животного.

Количественное содержание препаратов в органах, тканях организма животных определялось по основному действующему веществу (ДВ) – диминазена диацетурат, методом, описанным Ritschel W.A. (1976).

Исследованию были подвергнуты следующие органы и ткани: кровь, селезенка, печень, мышца сердца, легкие, тазобедренная мышца, почки, а также моча и экскременты.

При расчете фармакокинетических параметров, использовали модельно – статистический метод В.К.Пиотровского (1986) и экспериментальные данные по распределению действующего вещества изучаемого препарата по органам и тканям кролика.

Определение влияния препаратов беридона и беренила на организм клинически здоровых и больных пироплазмозом животных проводили на 28 собаках. Определяли следующие параметры: количество эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, общего белка (И.П.Кондрахин и др., 1983), билирубина (В.С.Камышников,2000) спектрофотометрически.

Диагноз на пироплазмоз ставили на основании результатов окрашивания мазков крови, методом Романовского-Гимзы, описанных в методических рекомендация по изучению и разработке мер борьбы с протозойными болезнями животных (М.: ВАСХНИЛ, 1984).

Терапевтическую эффективность беридона и беренила оценивали на собаках разного возраста, породы овчарка. Животные в количестве 28 голов, были разделены на 2 группы и 2 подгруппы в зависимости от возраста. В 1 группу входили животные, которым вводили беридон; во 2 подгруппу - собаки, которым вводили беренил. Препараты вводили внутримышечно, в форме 7% раствора, в дозе 1,0 мл/10 кг массы тела (3,5 мг/кг массы тела).

Результаты оценивали по следующим клиническим параметрам: температура, пульс, дыхание, исчезновение клинических признаков заболевания, паразитемии крови, проценту выживаемости животных.

Статистическую обработку результатов исследования проводили методом Б.Ф. Лакина (1990).

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2.1. Интенсивность хемилюминесценции крови у здоровых собак разного возраста. С помощью метода хемилюминесценции установлена интенсивность процессов ПОЛ и состояние АОЗ у собак разного возраста, породы овчарка.

Интенсивность ПОЛ и состояние АОЗ методом ХЛ определяли у 25 собак, которых разделили на 5 групп (в зависимости от возраста), по 5 голов в каждой. В период взятия крови все животные были физиологически здоровыми, охотно поедали корм, пили воду. Температура тела, пульс и дыхание были в пределах физиологических границ здоровых животных. Полученные результаты исследований представлены в таблице 1

Таблица 1

Показатели интенсивности хемилюминесценции в крови
у здоровых собак разного возраста

Возраст собак Светосумма, у.е. Вспышка, у.е. Спонтанная светимость, у.е. Максимальная светимость, у.е. Тангенс угла наклона кривой
7-12 мес 23,8 ± 2,5 0,72±0,03 1,18±0,4 2,83 ± 0,3 0,18±0,05
1,5-3года 15,4 ± 2,0 1,92±0,03 1,29± 0,5 1,68± 0,5 0,34±0,01
4,5-6 лет 37,7 + 5,8 3,28+0,05 0,81+ 0,2 5,37 + 0,4 0,30+0,02
8-9 лет 20,2 + 8,3 1,89+0,01 1,46+ 0,5 1,79 + 0,5 0,19+0,03
10-12 лет 13,5+ 3,1 1,66+0,03 1,37 + 0,5 1,75 + 0,7 0,17+0,03


Pages:   || 2 | 3 | 4 |
 

Похожие работы:







 
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.