авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |

Разработка и изучение эффективности препаратов из крови животных для повышения резистентности новорожденных телят и поросят

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

Шульга Николай Николаевич

РАЗРАБОТКА И ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ

ПРЕПАРАТОВ ИЗ КРОВИ ЖИВОТНЫХ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ

РЕЗИСТЕНТНОСТИ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ И ПОРОСЯТ

16.00.03 – ветеринарная микробиология, вирусология,

эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора ветеринарных наук

Екатеринбург – 2009

Работа выполнена в Дальневосточном зональном научно-исследовательском ветеринарном институте Российской академии сельскохозяйственных наук

Научный консультант: доктор биологических наук

Горковенко Наталья Евгеньевна

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Ощепков Владимир Григорьевич

доктор ветеринарных наук, профессор

Шкиль Николай Алексеевич

доктор ветеринарных наук, профессор

Шушарин Александр Данилович

Ведущая организация: ГНУ Научно-исследовательский ветеринарный

институт Нечерноземной Зоны РФ РАСХН

Защита состоится « 26 » ноября 2009 г. в « 9-00 » часов на заседании диссертационного совета Д 006.099.01 при Уральском научно-исследовательском ветеринарном институте РАСХН по адресу:

620142 г. Екатеринбург, ул. Белинского, 112а, тел./факс (343) 257-82-63.

Адрес сайта института: http://urnivi.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Уральского научно-исследовательского ветеринарного института РАСХН

Автореферат разослан «___» ________________ 2009 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета,

кандидат ветеринарных наук Печура Е.В.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Получение и выращивание молодняка, особенно в условиях крупных ферм требует соблюдения определенных технологических условий, основными из которых являются – сбалансированное полноценное кормление, защита от болезней, искусственная регуляция численности. Однако практика ведения продуктивного животноводства показывает, что даже при строгом соблюдении всех условий регистрируется стабильно высокая заболеваемость молодняка желудочно-кишечными и респираторными инфекциями. При этом ведущее значение в настоящее время имеют не классические, а факторные инфекции, вызываемые широко распространенными в природе условно патогенными бактериями (УПБ). В числе выделяемых УПБ ведущее место занимают многочисленные представители семейства Enterobacteriaceae, неферментирующие бактерии рода Pseudomonas и Acinetobacter, грамположительная кокковая микрофлора и их ассоциации (Джупина С.И., 2001; Шахов А.Г., 2002; Бедоева З.М. и др. 2006; Золотухин С.Н., Пульчеровская Л.П., Каврук Л.С., 2006; Красиков А.П., 2007; Макаров Ю.А., Горковенко Н.Е., 2008; Олейник А.В., 2009).

Чтобы противостоять многим этиологическим агентам, новорожденные поросята и телята должны обладать достаточным потенциалом резистентности, который реализуется в высоком уровне иммунного статуса. Рост и развитие новорожденных поросят и телят осложнен тем, что они практически лишены собственной гуморальной иммунной защиты. Поэтому вся нагрузка ложится на неспецифические факторы и колостральный иммунитет. От уровня иммунной защиты зависит их реакция на стрессовые факторы и тяжесть проявления желудочно-кишечных и респираторных болезней (Костына М.А., 1999; Храмцов В.В. и др. 2006; Федоров Ю.Н. и др., 2006; Карпуть И.М. и др., 2006; Ануфриев П.А., 2006; Паршин П.А. и Паршина В.И. 2006; Мотова Е.Н., 2008; Петрянкин Ф.П., 2008).



Проблеме желудочно-кишечной патологии новорожденных телят и поросят посвящены работы отечественных авторов (Шахов А.Г., 2002; Гаффаров Х.З. и др. 2002; Овод А.С., 2002; Терехов В.Н., 2002; Хусаинов В.Р., 2005; Ануфриев А.И., и др. 2006; Ануфриев П.А., 2006; Красочко П.А., Ляман А.М., 2006; Мусаева М.Н., 2008; Макаров Ю.А., Горковенко Н.Е.и др. 2008). Однако многие вопросы борьбы с этими заболеваниями не решены в полной мере и проводимые мероприятия по профилактике не достигают еще необходимого положительного эффекта

Успех борьбы с заболеваниями молодняка во многом определяется эффективностью применяемых химиотерапевтических средств. Однако в последнее время традиционно применяемые антибактериальные препараты часто оказываются неэффективными, поскольку возбудители проявляют к ним резистентность, массовое их применение способствует селекционированию устойчивых штаммов, распространению полирезистентности у микроорганизмов, негативно влияет на иммунный статус животных. Это диктует необходимость разработки альтернативных экологически безопасных препаратов, обладающих не только высокой лечебной эффективностью, но и выраженным профилактическим действием.

Все выше перечисленное явилось основанием для создания новых сывороточных препаратов и обоснования их применения для профилактики и лечения иммунодефицитов и связанных с ними заболеваний новорожденных телят и поросят.

Цель и задачи исследования. Цель исследований состояла в разработке препаратов из крови животных и научно обоснованных схем их применения для коррекции иммунного статуса и профилактики массовых болезней новорожденных животных, вызываемых условно патогенной микрофлорой.

Для достижения намеченной цели были определены следующие задачи:

теоретически обосновать и разработать новые сывороточные препараты с последующей экспериментальной и клинической оценкой их фармакологических свойств и эффективности для профилактики иммунодефицитов и массовых желудочно-кишечных расстройств у новорожденных телят и поросят, вызываемых условно патогенной микрофлорой;

изучить особенности динамики иммунных белков в сыворотках крови и молозиве коров и свиноматок в зависимости от их физиологического состояния;

– изучить особенности динамики иммуноглобулинов в сыворотках крови новорожденных телят и поросят и на этой основе разработать простой и доступный способ оценки иммунного статуса новорожденных поросят и телят в условиях производства;

изучить влияние разработанных препаратов из крови свиней и крупного рогатого скота на неспецифическую резистентность новорожденных поросят и телят,

– оценить в производственном эксперименте их лечебную и профилактическую эффективность.

Научная новизна работы. Разработан новый сывороточный препарат – концентрированная сыворотка крови (КСК), получаемый методом медленного замораживания и размораживания, превосходящий по содержанию иммуноглобулинов другие аналогичные препараты в 2-3 раза и содержащий в своем составе антитела к условно патогенным бактериям, вызывающим массовые желудочно-кишечные заболевания у молодняка крупного рогатого скота и свиней.

Научно обоснована и экспериментально доказана перспективность перорального применения концентрированной сыворотки крови новорожденным поросятам и телятам с учетом естественного механизма абсорбции иммунных белков.

Разработана методика выявления гипоиммуноглобулинемии у новорожденных телят и поросят по показателю общего белка в сыворотке крови, на основе использования прямой зависимости уровней иммуноглобулинов в сыворотках крови новорожденных животных от количества общего белка в них.

Уточнена динамика иммуноглобулинов в сыворотках крови стельных коров и супоросных свиноматок до и после отела и опороса.

Прослежена динамика иммунных белков в сыворотке крови коров в течение всего периода стельности.

Установлена этиологическая структура массовых желудочно-кишечных заболеваний у молодняка крупного рогатого скота и свиней бактериального происхождения.

Новизна выполненных исследований подтверждена тремя патентами на изобретения: «Способ оценки уровня естественной резистентности организма животных в ранний постнатальный период» (патент на изобретение Российской Федерации № 2260185); «Способ получения концентрированной сыворотки крови» (патент на изобретение Российской Федерации № 2125454); «Способ повышения резистентности организма новорожденных поросят» (патент на изобретение Российской Федерации № 2142805).

Теоретическая и практическая значимость работы. Выявленные в результате исследований закономерности изменения содержания иммуноглобулинов в сыворотке крови беременных животных и рожденного от них приплода расширяют научные представления по ряду вопросов физиологии и биохимии. С учетом выявленных закономерностей предложен способ оценки уровня естественной резистентности организма животных в ранний постнатальный период.

В результате проведенных исследований животноводству предложена концентрированная сыворотка крови (КСК), обладающая выраженной лечебной и профилактической эффективностью, прошедшая широкое производственное испытание и предназначенная для коррекции иммунного статуса, профилактики и лечения острых кишечных расстройств у новорожденных телят и поросят.

Разработан стандарт ДальЗНИВИ «Сыворотка крови концентрированная (КСК)», регламентирующий технологический процесс производства, показатели качества и методы их контроля. Разработаны методические рекомендации, «Изготовление и применение концентрированной сыворотки крови животных», которые утверждены Ученым советом ДальЗНИВИ (протокол № 2 от 25.03.05). Разработаны и утверждены Ученым советом ДальЗНИВИ (протокол № 3 от 03.07.2008) рекомендации «Смешанные кишечные инфекции новорожденных телят». Разработаны и утверждены Ученым советом ДальЗНИВИ (протокол № 3 от 06.03.2009) методические рекомендации «Руководство по изготовлению и применению концентрированной сыворотки крови крупного рогатого скота», и одобрены решением подсекции «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (протокол № 1 от 30 марта 2009). Разработаны и утверждены Ученым советом ДальЗНИВИ (протокол № 3 от 06.03.2009) методические рекомендации «Методические рекомендации по изготовлению и применению препарата из крови свиней», и одобрены решением подсекции «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (протокол № 1 от 30 марта 2009).

Основные положения, выносимые на защиту:

данные по динамике иммуноглобулинов в сыворотках крови и молозива животных в разные периоды беременности, до и после рождения приплода;

характеристика белкового состава сывороток крови поросят и телят в ранний постнатальный период;

этиология массовых желудочно-кишечных заболеваний, вызываемых условно патогенными бактериями;

результаты экспериментальных исследований по профилактике иммунодефицитов и желудочно-кишечных заболеваний, вызываемых условно патогенной микрофлорой, у новорожденных поросят и телят концентрированными сыворотками крови (КСК).

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на краевом совещании ветеринарных врачей (г. Хабаровск, 1994); областном совещании ветеринарных врачей (г. Благовещенск, 1995); областном совещании свиноводов (г. Благовещенск, 1995); научной сессии Дальневосточного отделения РАСХН, посвященной 60-летию Дальневосточного зонального научно-исследовательского ветеринарного института (г. Благовещенск, 1995); научно-практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарии» (г. Новосибирск, 1997); научно-практической конференции «Актуальные вопросы профилактики и лечения заболеваний сельскохозяйственных животных», посвященной 50-летию Калининградской научно-исследовательской ветеринарной станции (г. Калининград, 1998); международной научной конференции «Болезни животных Дальнего Востока», ДальГАУ (г. Благовещенск, 1999); совещании сотрудников ДальЗНИВИ и работников Госветслужбы по проблемам диагностики и лечения (г. Благовещенск, 2005); международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарии в современных условиях» посвященной 60-летию ГНУ Краснодарского НИВИ (г. Краснодар, 2006); международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных», посвященной 100-летию академика ВАСХНИЛ Я.Р. Коваленко (г. Москва, 2006); межведомственной научно-практической конференции «Современные проблемы исследований в биологии», (Благовещенск, 2009).





Публикации. По материалам диссертации опубликовано 30 научных работ, в том числе 10 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ (журналы Вестник РАСХН – 3, Молочное и мясное скотоводство – 2, Доклады РАСХН. – 1, Свиноводство. 2, Ветеринария – 2), и три патента РФ на изобретение.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 255 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований и их анализа, заключения, выводов, практических предложений и списка использованной литературы, включающего 288 наименований отечественных и 212 иностранных авторов. Работа содержит 19 таблиц и 4 рисунка. В приложении представлены документы внедрения результатов исследования.

Автор выражает искреннюю признательность и благодарность академику РАСХН, доктору ветеринарных наук, профессору Ю.А. Макарову за всестороннюю помощь и поддержку в работе, а также коллективу ДальЗНИВИ за методическую и практическую помощь в проведении исследований.

  1. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
    1. Материалы и методы

2.1.1 Общий объем проведенной работы. Работа выполнена в Дальневосточном зональном научно-исследовательском ветеринарном институте Российской академии сельскохозяйственных наук в течение 1993-2007, гг.. Исследования проводили в лаборатории иммунологии Дальневосточного зонального научно-исследовательского ветеринарного института и на базе животноводческих хозяйств Дальневосточного региона (Амурской области, Хабаровского и Приморского краев) в рамках государственных НТП «Ветеринарная медицина» 1991-1995 гг., 2001-2005 гг., 2006-2010 гг. (№ гос.рег. 019.10.050208, 01.2.003.06839, 01.2.007.00089).

В опытах использовали биологический материал от 1428 новорожденных поросят, 80 свиноматок, 345 телят и 80 коров. Всего исследовано 880 проб сывороток крови свиноматок и 1000 проб сывороток крови коров, 320 проб сывороток молозива коров и 320 проб сывороток молозива свиноматок.

Производственные испытания концентрированной сыворотки крови проведены в трех хозяйствах Амурской области и Приморского края. В производственных испытаниях КСК использовано 600 новорожденных поросят и 205 новорожденных телят.

2.1.2 Материалы исследования. Материалом для гематологического, биохимического и иммунологического исследований служила кровь и её сыворотка, а так же сыворотка молозива.

От поросят и телят с диарейным синдромом для бактериологического исследования отбирали пробы фекалий непосредственно из прямой кишки стерильной ректальной петлей, помещали в транспортную среду и немедленно доставляли для исследования в лабораторию.

Состав и свойства разработанных сывороточных препаратов. Концентрированная сыворотка крови животных (КСК), является биопрепаратом, получаемым по криотехнологии, содержащим антитела в повышенной концентрации (в сравнении с АИС концентрация в КСК выше в 2,5-3 раза). КСК содержит иммунные компоненты против всех патогенов, персистирующих в популяции животных конкретных ферм, кроме того, КСК содержит все биологически активные вещества, присутствующие в нормальной сыворотке крови взрослых здоровых животных.

КСК получают из крови взрослых здоровых животных, предварительно проверенных на инфекционные и кровопаразитарные болезни в зависимости от эпизоотической ситуации в хозяйстве.

Дозировка перорально: - поросятам 5 мл два раза в сутки в течение 2-х первых суток жизни; телятам 50 мл два раза в сутки в течение 2-х первых суток жизни.

2.1.3 Методы исследования. Выполнены следующие исследования:

Гематологические исследования. В пробах крови поросят и телят подсчитывали общее количество эритроцитов, гемоглобина, лейкоцитов, выводили лейкоцитарную формулу по общепринятым методикам.

Биохимические исследования сыворотки крови включали определение общего белка рефрактометрически, иммуноглобулинов с помощью цинк-сульфатного теста (Блинов Н.И., 1982), белковых фракций (включая глобулины 1, 2, , 1, 2) электрофорезом в геле агарозы (В.М. Чекишев, 1977).

Биохимические исследования сыворотки молозива включали определение общего белка рефрактометрическим методом и белковых фракций, включая иммуноглобулины основных классов с помощью электрофореза в геле агарозы.

Иммунологические исследования сыворотки крови включали определение фагоцитарной активности нейтрофилов и бактерицидной активность сыворотки крови (Смирнов П.Н. с соавт.,1989), циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) по методике П.М. Барановского и В.С. Данилишиной (1983).

Бактериологические исследования. Выделение бактерий из биологического материала и изучение их культурально-морфологических и биохимических свойств проводили общепринятыми методами бактериологического исследования. Посев исследуемого материала проводили из разведений на плотные питательные среды (Эндо, Плоскирева, висмут-сульфит агар, энтерококк агар, солевой агар, агар с сорбитолом, иерсиниозная среда). Идентификацию выделенных микроорганизмов до вида проводили с использованием 23 биохимических тестов и «Определителя бактерий Берджи» (М.,2001), «Определителя зоопатогенных микроорганизмов» (М.А. Сидоров с соавт., 1995). Изучение патогенности выделенных культур бактерий проводили с помощью биологической пробы на белых беспородных мышах. Для определения чувствительности выделенных культур к антибиотикам использовали метод диффузии в агар (МУК 4.2.1890-04).

Для изучения динамики иммуноглобулинов в сыворотках крови свиноматок исследования проводили ежедневно за неделю до опороса, через 40 мин. после опороса и через каждые 24 часа в течение недели после него.

Для изучения динамики иммуноглобулинов в сыворотках крови коров, исследования проводили по месяцам, в течение всего периода стельности, по неделям в последний месяц стельности, по суткам в последнюю неделю стельности, в первые минуты после отела и по суткам в течение недели после отела.

Параллельно исследовали динамику иммуноглобулинов в сыворотке молозива. Для получения сыворотки молозиво нагревали до 38оС в водяной бане и добавляли равный объем 0,1 Н раствора соляной кислоты и 1 каплю насыщенного раствора пепсина на 5 мл смеси. После центрифугирования в сыворотке молозива определяли содержание общего белка, белковых фракций, иммуноглобулинов основных классов.



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |
 

Похожие работы:







 
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.