авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 6 |

Специфическая профилактикаи лечение ассоциативных инфекционных болезней нутрий

-- [ Страница 3 ] --

Освежение культур E. coli О1, S. typhimurium, Str. рneumoniae в МПБ с добавлением 40%-ного р-ра глюкозы до 0,2% - 1%-ной концентрации, рН 7,2 – 7,4, инкубирование при температуре 37±2° С в течение 12 – 24 ч Контроль на чистоту роста (посев на МПА, МПБ, среды Эндо и Плоскирева, окраска по методу Грама)
Получение матровой расплодки культур E. coli О1, S. typhimurium, Str. рneumoniae в МПБ с добавлением 40%-ного р-ра глюкозы до 0,2% - 1%-ной концентрации, рН 7,2 – 7,4, инкубирование при температуре 37±2° С в течение 12 – 24 ч Контроль на чистоту роста (посев на МПА, МПБ, среды Эндо и Плоскирева, окраска по методу Грама)

Получение бактериальной массы культур E. coli О1, S. typhimurium, Str. рneumoniae в 3 – 5 литровых бутылях с МПБ и добавлением 40%-ного р-ра глюкозы до 0,2% - 1%-ной концентрации, рН 7,2 – 7,4, инкубирование при температуре 37±2° С в течение 12 – 24 ч
Инактивирование биомассы путем внесения формалина в 0,4 - 0,5%-ной концентрации при температуре 37±2° С в течение 48 - 96 ч Контроль полноты инактивации высевом на МПА, МПБ, среды Эндо, Плоскирева и биопроба на белых мышах

Стандартизация (разбавление до необходимой концентрации)
Смешивание антигенов в определенном соотношении и адсорбирование их (внесение 3 - 6%-ного раствора гидрата окиси алюминия до 20% к объему) в течение 12-24 ч при температуре 20-25°С Контроль на бактериальную стерильность (посев на МПА, МПБ, агар и бульон Сабуро, Китта-Тароцци)
Фасовка и этикетировка Контроль на бактериальную стерильность (посев на МПА, МПБ, агар и бульон Сабуро, Китта-Тароцци), безвредность, иммуногенность

Рисунок 6 – Принципиальная технологическая схема изготовления

инактивированных моно- и ассоциированных вакцин против

колибактериоза, сальмонеллеза и стрептококкоза нутрий

Таким образом, нами были разработаны и испытаны в лабораторных условиях безвредные и высокоиммуногенные гидроокисьалюминиевые формолвакцины против колибактериоза, против сальмонеллеза и против стрептококкоза нутрий (далее вакцины против: колибактериоза, сальмонеллеза и стрептоккоза нутрий), обеспечивающие после одно- и двукратной иммунизации 80 и 100% соответственно защиту животных.

Учитывая ассоциативное течение инфекционных болезней нутрий в зверохозяйствах России, Краснодарского края, а также отсутствие эффективных ассоциированных вакцин против колибактериоза, сальмонеллеза и стрептококкоза нутрий, дальнейшие наши исследования были направлены на разработку технологии изготовления ассоциированных вакцин против данных инфекций нутрий в разных сочетаниях и изучение их основных свойств.




3.3.2 Изучение иммунобиологических свойств ассоциированной

вакцины против сальмонеллеза и стрептококкоза нутрий в

экспериментальных и производственных условиях

На основе эпизоотических штаммов S. typhimurium и St. рneumoniae нутрий нарабатывали бактериальное сырье и инактивировали его формалином и температурой раздельно согласно разработанной нами технологической схемы (рисунок 6). После проверки на полноту инактивации антигены смешивали в соотношении 1:1,1:2,1:3, добавляли 10-30% гидрата окиси алюминия, перемешивали, выдерживали в течение 12-24 ч при температуре 20-25С, контролировали на бактериальную стерильность и фасовали во флаконы с последующей укупоркой. По разработанной нами технологии были изготовлены опытные серии ассоциированной вакцины против сальмонеллеза и стрептококкоза нутрий и изучены ее основные свойства.

Иммуногенность вакцины оценивали на белых мышах массой 18-20 г, предварительно определив для них иммунизирующую дозу антигенами сальмонеллеза и стрептококкоза, а также соответствующие дозы для заражения данными вирулентными возбудителями. Результаты исследований показали, что после однократной подкожной прививки белых мышей ассоциированной вакциной в дозе 2 млн./0,5 см у них через 14 суток формируется напряжённый иммунитет, обеспечивающий защиту 80-90% привитых против стрептококкоза и сальмонеллеза соответственно, поствакцинальных осложнений не отмечали.

При изучении влияния соотношения антигенов и компонентов в ассоциированной вакцине на ее иммуногенную активность установили, что биопрепарат в соотношении антигенов сальмонеллеза и стрептококкоза 1:2 и 20 % гидрата окиси алюминия после двукратной иммунизации белых мышей подкожно с интервалом 10 суток в дозе по 0,5 см не вызывает у животных поствакцинальных осложнений и через 14 суток после ревакцинации обеспечивает 80-100 %-ную защиту против стрептококкоза и сальмонеллеза соответственно.

При определении оптимальной иммунизирующей дозы ассоциированной вакцины против сальмонеллёза и стрептококкоза для нутрий в возрасте 40-50 дней (однократно внутримышечно в область бедра) установили, что 1,0 млрд. микробных клеток по оптическому стандарту ГИСК им. Тарасевича позволяет защитить 100% вакцинированных нутрий от вирулентных возбудителей сальмонеллёза и стрептококкоза при 100% заболевании и 100% гибели невакцинированных животных (контроль).

С целью изучения безвредности и иммуногенности ассоциированной вакцины на каждую серию препарата брали по 5 нутрий в возрасте 40 – 50 дней, вакцинировали однократно в дозе 1,0 см и двукратно (первая доза – 1,0 см, вторая – 1,5 см с интервалом 10 суток), внутримышечно с последующим заражением привитых и не привитых животных вирулентными возбудителями S. typhimurium (50 млрд м.к.) и St. рneumoniae ( 2 млрд м.к.).

Выявили, что у животных через 14 суток после вакцинации и ревакцинации формируется напряжённый иммунитет, обеспечивающий защиту 80­ 100% привитых против стрептококкоза и сальмонеллеза, поствакцинальных осложнений не отмечали.

Производственные испытания 2-х опытных серий вакцины проводили в племзверосовхозе «Северинский» Тбилисского района Краснодарского края. В хозяйстве иммунизировали 3000 нутрий 40-60 дневного возраста внутримышечно в область бедра двукратно: первая доза – 1,0 см, вторая – 1,5 см с интервалом 10 суток. За привитыми животными вели наблюдение в течение 9 месяцев. Уровень специфических антител в сыворотке крови вакцинированных нутрий определяли выборочно (у 5% животных) к S. typhimurium в РА и к Str. рneumoniae в РП по общепринятым методикам.

В результате исследований установлено, что у нутрий, привитых ассоциированной вакциной против сальмонеллёза и стрептококкоза двукратно, отклонений от физиологической нормы не было, через 14 суток после ревакцинции формировался напряжённый иммунитет, обеспечивая защиту всех привитых зверей против сальмонеллёза и стрептококкоза. Через 9 месяцев после повторной прививки уровень специфических антител в сыворотке крови вакцинированных нутрий к S. typhimurium составил 1:80-1:320, а к Str. рneumoniae – 1:8-1:32.

3.3.3 Изучение иммунобиологических свойств ассоциированной

вакцины против сальмонеллеза и колибактериоза нутрий в

экспериментальных и производственных условиях


По разработанной нами технологии (рисунок 6) на основе выделенных штаммов S. typhimurium и Е. coli О1 были изготовлены 2 опытные серии ассоциированной вакцины против сальмонеллеза и колибактериоза нутрий. Установили, что биопрепарат при соотношении антигенов сальмонеллеза и колибактериоза 1:1 и 10 и 20 % гидрата окиси алюминия после двукратной подкожной иммунизации белых мышей в дозе 0,5 см с интервалом 10 суток не вызывает у животных поствакцинальных осложнений и через 14 суток после ревакцинации обеспечивает 100%-ную защиту против сальмонеллеза и колибактериоза.

При изучении безвредности и иммуногенной активности вакцины на нутриях в возрасте 40–50 дней выявили, что у животных через 14 суток после однократной внутримышечной прививки биопрепаратом в дозе 1,0 см3, а также двукратной: первая доза 1,0 см3, вторая – 1,5 см3 с интервалом 10 суток формируется напряженный иммунитет, обеспечивающий 80% защиту после однократной иммунизации и 100% после двукратной прививки против сальмонеллеза и колибактериоза, поствакцинальных осложнений не отмечали.

В результате производственных испытаний вакцины (две серии) в племзверосовхозе «Северинский» на 2000 нутрий 40-60 дневного возраста установили, что у животных после двукратной внутримышечной прививки в область бедра (первая доза – 1,0 см, через 10 дней вторая – 1,5 см) через 14 дней после ревакцинации формируется напряженный иммунитет, обеспечивающий защиту всех привитых зверей против сальмонеллеза и колибактериоза. Уровень специфических антител в сыворотке крови иммунизированных нутрий через 9 месяцев после вакцинации, выявляемых в РА к S. typhimurium и Е. coli О1, колебался от 1:80 до 1:320.

3.3.4 Изучение иммунобиологических свойств ассоциированной

вакцины против колибактериоза и стрептококкоза нутрий в

экспериментальных и производственных условиях

При изучении влияния соотношения компонентов в ассоциированной вакцине на иммуногенную активность установили, что биопрепарат в соотношении антигенов колибактериоза и стрептококкоза 1:2 и 20% гидрата окиси алюминия после двукратной иммунизации белых мышей подкожно с интервалом 10 суток в дозе 0,5 см3 не вызывает у животных поствакцинальных осложнений и через 14 суток после ревакцинации обеспечивает 80 и 100%-ную защиту против стрептококкоза и колибактериоза соответственно.

При изучении безвредности и иммуногенности биопрепарата выявили, что после однократной внутримышечной прививки нутрий ассоциированной вакциной против колибактериоза и стрептококкоза в дозе 1,0 см, а также двукратной ( первая доза 1,0 см, вторая - 1,5 см с интервалом 10 суток после первой) у животных через 14 суток после вакцинации и ревакцинации формируется напряжённый иммунитет, обеспечивающий 80% защиту против колибактериоза и стрептококкоза после однократной иммунизации и 100% после двукратной прививки, поствакцинальные осложнения не отмечали.

В результате производственных испытаний вакцины в племзверосовхозе «Северинский» на 1000 нутрий 40-60 дневного возраста установили, что у животных после двукратной внутримышечной прививки в область бедра (первая доза – 1,0 см, через 10 дней вторая – 1,5 см) формируется напряженный иммунитет, обеспечивающий защиту всех привитых против колибактериоза и стрептококкоза через 14 дней после ревакцинации. Уровень специфических антител в сыворотке крови вакцинированных нутрий в РА против колибактериоза составил 1:80-1:160, в РП против стрептококкоза – 1:8- 1:16.

3.3.5 Изучение иммунобиологических свойств ассоциированной

вакцины против колибактериоза, сальмонеллеза и стрептококкоза

нутрий в экспериментальных и производственных условиях

По разработанной нами технологии на основе штаммов E. coli О1, S. typhimurium, St. рneumoniae изготовили три опытные серии ассоциированной вакцины против колибактериоза, сальмонеллеза и стрептококкоза нутрий.

При изучении влияния соотношения компонентов в биопрепарате на иммуногенную активность выявили, что ассоциированная вакцина в соотношении антигенов колибактериоза, сальмонеллёза, стрептококкоза 1:1:2 и 20% гидрата окиси алюминия после однократной иммунизации белых мышей подкожно в дозе 0,5 см не вызывает у них поствакцинальных осложнений и через 14 суток после вакцинации обеспечивает 80%-ную защиту против трех инфекций, что отвечает предъявляемым требованиям (таблица 1).

Таблица 1

Влияние соотношения компонентов в ассоциированной вакцине против

колибактериоза, сальмонеллёза и стрептококкоза нутрий на ее иммуногенность

Вакцина Соотно шение антигенов колибактериоза, сальмо неллёза и стрептококкоза Адъювант, % Безвредность Результаты заражения возбудителями сальмонеллёза, стрептококкоза и колибактериоза через 14 суток
S. typhimurium Str. pneumoniae E. coli О1
Кол-во жив-х Пало жив-х Вы- жи- ло жив-х Кол-во жив-х Па-ло жив-х Вы- жи- ло жив-х Кол-во жив-х Пало жив-х Вы жи ло жив-х
Ассоциированная против колибактериоза, сальмонеллёза и стрептококкоза нутрий 1:1:1 10 10 2 8 10 4 6 10 0 10
1:1:2 20 10 0 10 10 2 8 10 0 10
1:1:3 30 10 3 7 10 1 9 10 3 7
Контроль, непривитые 3 3 0 3 3 0 3 3 0




Определили, что иммунизирующей дозой для ассоциированной вакцины против колибактериоза, сальмонеллёза и стрептококкоза нутрий является 1,5 млрд. микробных клеток по оптическому стандарту ГИСК им. Тарасевича, которая обеспечивает 100% защиту привитых зверей от вирулентных возбудителей колибактериоза, сальмонеллёза и стрептококкоза при 100% заболевании и гибели невакцинированных животных (таблица 2).

Таблица 2

Определение иммунизирующей дозы ассоциированной вакцины против

колибактериоза, сальмонеллёза и стрептококкоза нутрий

Вакцина Имму низи рую щая доза, 109 м.к. Кол-во нут рий Вирулентный возбудитель, доза, млрд. м.к./1 см Результаты заражения возбудителями сальмонеллёза, стрептококкоза и колибактериоза через 14 суток
S. typhimurium Str. pneumoniae E. coli О1
Забо лело жив-х Пало жив-х Вы жи ло жив-х Забо лело жив-х Па ло жив-х Вы жи ло жив-х Заболело жив-х Па ло жив-х Вы жи ло жив-х
Ассоциированная против колибактериоза, сальмонеллёза и стрептококкоза нутрий 2,0 1,5 1,0 0,5 0,25 4 4 4 4 4 S. typhimurium, 50 млрд. м.к. Str. pneumoniae, E.coli О1 - 2 млрд. м.к. 0 0 0 1 2 0 0 0 0 1 4 4 4 4 3 0 0 1 2 3 0 0 1 1 2 4 4 3 3 2 0 0 0 1 2 0 0 0 1 1 4 4 4 3 3
Контроль, непривитые - 4 50 млрд. м.к. 4 4 0
Контроль, непривитые - 4 2 млрд. м.к. 4 4 0 4 4 0


Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 6 |
 

Похожие работы:








 
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.