авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |

Иммунобиологическая оценка состояния облученных животных и способы повышения радиорезистентности организма

-- [ Страница 5 ] --

Эти объемы препарата нами взяты для изучения влияния флоренты на различные показатели иммунобиологического состояния организма облученных крыс и разработки радиозащитного способа, включающего предварительное облучение в диапазоне доз 0,75-1,0 Гр+флорента+ ЛД. В результате было установлено, что применение способа по указанной схеме защищало 60-80% крыс, облученных в дозе 9 Гр.

3.2.4.1 Иммуномодулирующие и антиоксидантные свойства флоренты

Изучение влияния флоренты на функциональную активность щитовидной железы проводили на крысах, облученных в дозах 0,5; 1,0; 3,0; 5,0 Гр, соответственно.

 Дозовая зависимость гормонов-6

Рис. 6 - Дозовая зависимость гормонов щитовидной железы на вторые сутки после облучения

На вторые сутки содержание Т3 при дозах от 0,5 Гр; 1,0 Гр; 3,0 Гр и 5,0 Гр было ниже биологического контроля на 15%, 19,7%, 12,0% и 30%, соответственно. При дозе 5,0 Гр разница была достоверной. Подобная закономерность наблюдалась и с содержанием тироксина (рис.6).

На седьмые сутки, активность железы была еще более пониженной по сравнению с первичной реакцией на облучение при дозах внешнего однократного -облучения, превышающих 0,5 и 1,0 Гр. Так, содержание Т3 при дозах 3,0 и 5,0 Гр понижалось в 1,32 и в 1,38 раза, что было ниже биологического контроля на 24,7% и 27,2%, соответственно. Содержание Т4 при дозе 0,5 Гр -1,0 Гр уменьшалось, но не достоверно; при дозе 3,0 Гр - в 1,59 раза (на 37,2%), при дозе 5,0 Гр - в 1,67 раза (на 40,5%), что достоверно по отношению к биологическому контролю.

Применение флоренты до облучения по указанной выше схеме способствовало определенной нормализации исследуемых показателей, характеризующих функциональную активность щитовидной железы, и прослеживалось при всех радиационных нагрузках и во все сроки исследования.

Таким образом, внешнее однократное облучение в дозах от 0,5 до 5,0 Гр вызывает нарушение функциональной активности щитовидной железы. При этом наблюдается дозовая и временная зависимость. Наибольшие изменения наблюдаются при дозах 3,0-5,0 Гр на 2-7 сутки после облучения. Применение экстракта пихты сибирской до облучения нормализует функциональную активность щитовидной железы, что проявляется увеличением концентрации тиреоидных гормонов (Т3, Т4) у облученных животных до нижних границ физиологической нормы.

Для установления антиоксидантных свойств флоренты изучали динамику малонового диальдегида и глутатионредуктазы в печени облученных крыс. Одновременно с этим определяли динамику титров аутоантител и бляшкообразующих клеток в периферической крови облученных крыс на фоне применения исследуемого препарата. Кровь и печень для исследования брали при убое животных через одни, пять и десять суток после облучения.

Однократное внешнее общее облучение крыс в дозе 7,0 Гр подавляет активность глутатионредуктазы, которая является одним из компонентов антиоксидантной защиты организма, обладает способностью катализировать химические реакции, в результате которых токсичные свободные радикалы и перекиси превращаются в безвредные соединения. Снижение активности антиоксидантного фермента глутатионредуктазы влечет за собой достоверный прирост малонового диальдегида.



В результате наших исследований было установлено, что активность глутатионредуктазы у животных группы облученного контроля, по сравнению с биологическим контролем, была достоверно понижена на 1, 5 и 10 сутки исследования в 3,7; 2,9 и 2,08 раза, соответственно (рис.8). В то время концентрация малонового диальдегида в печени крыс контроля облучения достоверно возрастала во все сроки исследования в 3,76; 2,93 и 2,02 раза, соответственно (рис. 7).

Введение крысам флоренты за 7 дней до летального облучения способствовало коррекции показателей антиоксидантной системы. Прирост малонового диальдегида в подопытных группах достоверно понижался, а активность глутатионредуктазы достоверно повышалась по сравнению с контролем облучения (рис.7, 8).

 Динамика малонового диальдегида у-7Рис.7 - Динамика малонового диальдегида у облученных крыс на фоне применения флоренты

Рис.8-Динамика глутатион-редуктазы у-8Рис.8-Динамика глутатион-редуктазы у облученных крыс на фоне применения флоренты

Так, через 1, 5, 10 сутки у крыс подопытной группы (фл + 7 Гр) активность антиоксидантного фермента ГР было достоверно выше по сравнению с животными группы облученного контроля в 3,39; 2,87; 1,88 раза, соответственно. Подобная закономерность наблюдалась и в подопытной группе (1 Гр + фл + 7 Гр). Введение флоренты животным после облучения в течение 5-7 суток эффект коррекции показателей антиоксидантной защиты организма был явным, но несколько слабее эффекта приема данного препарата перед облучением. Следовательно, у животных, которые получали флоренту сохранялась активность глутатионредуктазы, которая не позволяла накапливаться малоновому диальдегиду в более высоких концентрациях, характерных для животных незащищенной группы.

Облучение в дозе 7,0 Гр вызывало накопление аутоантител в периферической крови облученных животных с оценкой реакции как «положительная» и «резко положительная». Резко положительных значений (3-4 балла) у крыс облученного контроля реакция Уанье достигала на 5 сутки после воздействия радиации. Применение экстракта пихты сибирской оказывало иммуномодулирующее влияние на образование антител к ЛСЭ, при этом титры аутоантител к ЛСЭ выявлялись, но в менее высоких титрах, оцениваемых в 0,5-1,0 балла, а количество клеток аутогемолизинов (БОК) уменьшалось до нижних границ физиологической нормы (2-3%).

Можно считать, что применение флоренты сдерживает реакцию цепного окисления липидов, инициируемую ионизирующим излучением и играющую важную роль в патологии и гибели клеток. В результате понижается значимость такой реакции, способствующей массовому накоплению избытка токсических продуктов окисления липидов. Доказательством тому служат полученные данные по относительной нормализации антиоксидантной защиты, характеризующейся оптимальной активностью глутатионредуктазы и содержанием МДА в норме.

3.2.4.2 Влияние предварительного облучения крыс в дозе 0,75 Гр в сочетании с эракондом и флорентой на содержание клеток костного мозга и периферической крови крыс при дозе 7 Гр

Облучение крыс в дозе 7 Гр угнетало пролиферативную активность костного мозга. При этом общее количество клеток в костном мозге на вторые сутки уменьшалось на 70-80% по сравнению с биологическим контролем. Предварительное облучение в дозе 0,75 Гр за 28-30 суток до воздействия в дозе 7,0 Гр способствовало развитию адаптации клеток костного мозга к повторному воздействию радиации. Больший эффект наблюдался при предварительном облучении крыс с последующим введением препаратов природного происхождения – эраконда и флоренты. Так в четвертой и пятой группах в период первичной реакции на облучение клеток сохранялось достоверно на 45-48% больше, чем в контроле облучения (рис. 9). Функциональный пул гемопоэза, который представлен форменными элементами периферической крови, последовательно реагировал на воздействие ионизирующей радиации вслед за нарушением гемопоэза в костном мозге (табл. 8).

Количество лейкоцитов, эритроцитов и тромбоцитов у крыс, подвергнутых ЛД60/30, резко снижалось по сравнению с биологическим контролем соответственно в 5,6 раза (3 сутки), в 1,7 раза (7 сутки) и в 4,3 раза (7 сутки). Предварительное облучение в низкой дозе оказывало защитное действие на опустошение функционального пула гемопоэза. При этом содержание лейкоцитов периферической крови в указанные сроки повышалось в 1,4 раза, эритроцитов в 1,3 раза, тромбоцитов в 1,2 раза. Введение эраконда и экстракта пихты сибирской с водой и кормом в сочетании с предварительным облучением способствовало еще большему повышению радиорезистентности клеток периферической крови.

Таблица 8– Показатели картины периферической крови подопытных крыс

Группы Эритроциты, 1012/л (7-е сут) Тромбоциты, 109/л (7-е сут) Лейкоциты, 109/л (3-е сут)
1 б.
к.
6.56±0.08 410±17 8.98±0.15
к.о. 3.70±0.18* 96±4,6* 1.60±0.07*
(0,75+7Гр) 4.57±0.23** 114±3,1 2.20±0.07**
( 0,75+э+7Гр) 4.62±0.16** 126±4,2 2.56±0.07**
(0,75+фл+7Гр) 4.72±0.23** 129±3,3 2.60±0.15**

* Различия достоверны по сравнению с биологическим контролем при p<0.05.

** Различия достоверны по сравнению с контролем облучения при p<0.05.

Так, сохранность лейкоцитов в крови защищенных животных с применением эраконда и флоренты, в среднем, была на 60% выше по сравнению с облученным контролем. Подобная закономерность наблюдалась и с количественным содержанием эритроцитов и тромбоцитов.

3.2.5 Влияние предварительного облучения (1,0 Гр), эраконда, тимогена и флоренты на компенсаторные возможности популяции клеток костного мозга крыс

Для изучения влияния предварительного облучения в низкой дозе, эраконда, тимогена и флоренты, как в отдельности так и в их сочетании, на компенсаторные возможности различных популяций клеток костного мозга крысы были разбиты на 9 групп: первая – биологический контроль; вторая – облученный контроль в дозе 9,0 Гр; третья – 1,0 Гр + 9,0 Гр; четвертая – эраконд + 9,0 Гр; пятая – 1,0 Гр + эраконд + 9,0 Гр; шестая – тимоген + 9,0 Гр; седьмая – 1 Гр + тимоген + 9,0 Гр; восьмая – флорента + 9,0 Гр; девятая – 1 Гр + флорента + 9,0 Гр.

На 2 сутки (период наибольшего опустошения костного мозга) после воздействия в дозе 9,0 Гр содержание эритроидных клеток по сравнению с биологическим контролем достоверно уменьшилось на 90% (p<0,01). Применение исследуемых радиозащитных способов способствовало достоверному сохранению данной популяции клеток в этот период по сравнению с контролем облучения в 2-3 и более раза (рис.10). На восьмые сутки компенсаторные возможности эритроидных клеток были значительно выше у защищенных животных и составляли в третьей, четвертой, пятой, шестой, седьмой, восьмой и девятой групп - 80,6; 75,1; 83,1; 78,0; 94,4; 77,6; 92,2%%, соответственно по отношению к биологическому контролю, в то время как в незащищенной группе только 61,3%.

Количество нейтрофильных клеток на вторые сутки после облучения в дозе 9,0 Гр достоверно уменьшилось в 17,4 раза или на 94,3% по отношению к биологическому контролю (p<0,01). Применение предварительного облучения в дозе 1,0 Гр, эраконда, тимогена и флоренты как в отдельности так и в их сочетании способствовало сохранению данной популяции клеток по отношению к контролю облучения в 4-5 и более раз (рис.11). На восьмые сутки компенсаторные возможности нейтрофильных клеток в костном мозге бедренной кости были выражены сильнее в третьей, четвертой, пятой, шестой, седьмой, восьмой, девятой групп подопытных животных и составляли 78,0; 81,0; 86,1; 83,0; 91,5; 80,4; 94,8%%, соответственно по отношению к биологическому контролю. В то время как в группе крыс контроля облучения их содержание составляло только 61,0%, что было достоверно ниже величин подопытных групп и биологического контроля, в среднем, в 1,6 раза (p<0,05).

 Изменение эритроидных клеток в-9

Рис.10 - Изменение эритроидных клеток в костном мозге крыс на вторые сутки после облучения ЛД60/30 Изменение нейтрофильных клеток в-10

Рис.11 - Изменение нейтрофильных клеток в костном мозге крыс на вторые сутки после облучения ЛД60/30

При воздействии радиации в дозе 9 Гр на вторые сутки происходило достоверное снижение лимфоидных клеток в бедренной кости в 12,7 раза по отношению к биологическому контролю (p<0,01). Применение предварительного облучения в дозе 1,0 Гр, эраконда, тимогена и флоренты как в отдельности так и в их сочетании способствовало достоверному сохранению данной популяции клеток в этот период по отношению к контролю облучения в, среднем, в 2,5-4 и более раз (рис.12). На восьмые сутки компенсаторные возможности лимфоидных клеток в костном мозге бедренной кости были выражены сильнее у защищенных групп подопытных животных и составляли в среднем 76-90%% по отношению к норме. В то время как в группе крыс контроля облучения их содержание составляло только 58,1%, что было достоверно ниже величин подопытных групп.





  Изменение лимфоидных клеток в-11

Рис.12 – Изменение лимфоидных клеток в костном мозге крыс на вторые сутки после воздействия ЛД60/30

Таким образом, облучение крыс в дозе 9,0 Гр достоверно угнетает пролиферативную активность костного мозга. При этом количество эритроидных, нейтрофильных и лимфоидных клеток на вторые сутки после воздействия радиации в указанной дозе достоверно уменьшается. Применение предварительного облучения за 28-30 суток до летального воздействия, введение эраконда, тимогена и флоренты как в отдельности, так и в их сочетании с предварительным облучением способствует сохранности эритроцитарного, гранулоцитарного и агранулоцитарного ростков гемопоэза в костном мозге бедренной кости крыс. При этом тимоген в большей степени оказывает положительное влияние, как на сохранение, так и на восстановление лимфоидных клеток костного мозга.

3.2.6 Иммунобиологическое состояние защищенных и облученных летальной дозой крыс

На данном отрезке работы изучали влияние предварительного облучения в дозе 1,0 Гр в сочетании с тимогеном, эракондом и флорентой на иммунобиологические показатели подопытных крыс (табл.9).

Однократное облучение крыс второй группы в дозе 9 Гр достоверно угнетало синтез IgG, IgA, IgM по сравнению с биологическим контролем в 1,8; 2,0 и 1,7 раза, соответственно (p<0,05). При этом достоверно, на 48,7%, увеличивалось содержание ЦИК (p<0,05). В этих условиях реакция Уанье оценивалась как резко положительная. Достоверно, в 3,2 раза, увеличивалось количество бляшкообразующих клеток; значительно уменьшалось содержание Т- и В-лимфоцитов; понижалась функциональная активность щитовидной железы, оцениваемая содержанием Т3 и Т4. Перечисленные показатели свидетельствовали о выраженном иммунодефицитном состоянии организма летально облученных животных. При этом нарушалась антиоксидантная система организма, о чем свидетельствовали достоверное повышение малонового диальдегида в 2,24 раза (p<0,01) и достоверное понижение глутатионредуктазы в 2,25 раза (p<0,01).

На этом фоне в третьей, четвертой и пятой подопытных группах происходила коррекция содержания основных классов иммуноглобулинов, Т- и В-лимфоцитов. Функциональная активность щитовидной железы приближалась к норме. Снижалось содержание агрессивных аутоантител, бляшкообразующих клеток и циркулирующих иммунных комплексов; повышалась активность глутатионредуктазы и понижалось содержание малонового диальдегида по сравнению с незащищенными и облученными в летальной дозе животных. Нормализация иммунных и антиоксидантных показателей у защищенных, а затем облученных летальной дозой животных, свидетельствовало о положительном влиянии примененных способов профилактики острой лучевой болезни, включающих предварительное облучение в сочетании с тимогеном, эракондом и флорентой.

Таблица 9 – Иммунобиологические показатели подопытных крыс на 7 сутки после воздействия радиации в ЛД90-100/30

Показатели Группы
1 (б.к.) 2 (к.о.) 3 (1Гр+Эр+9Гр 4 1Гр+т+9Гр 5 1Гр+фл+9Гр
Ig G мг/мл 6,88±0,80 3,82±0,04* 5,94±0,12 6,24±0,18** 5,74±0,06**
Ig А мг/мл 0,49±0,08 0,24±0,02* 0,38±0,01 0,42 ±0,21** 0,38±0,04**
Ig М мг/мл 0,58±0,08 0,34±0,08* 0,62±0,04 0,64±0,14** 0,54±0,06**
ЦИК (усл.ед.) 41,4±1,22 61,6±0,12* 42,2±0,14 41,8±0,18** 42,6±0,24**
Антитела к ЛСЭ (баллы) 0,29±0,09 2,2±0,03* 0,5±0,06 0,5±0,16** 0,3±0,01
БОК (%) 1,82±0,03 5,84±0,12* 2,08±0,09 2,22±0,21 ** 2,24±0,06**
Т-клетки, % 45,5±1,82 34,5±0,24* 42,5±0,14 43,5±0,23 43,7±1,08
В-клетки, % 29,0±1,02 23,0±0,32* 26,4±0,16 27,4±0,26 26,8±0,82
Т3(нмоль/л) 1,29±0,15 0,72±0,01 1,12±0,01 1,22±0,06** 1,27±015**
Т4(нмоль/л) 54,2±2,02 44,2±0,42* 52,4±1,12 52,8±0,08** 51,8±0,32**
МДА (н-моль/1г ткани) 2,24±0,05 5,02±0,04* 2,32±0,22** 2,36±0,08** 2,28±0,06**
ГР(Н-моль НАДФН2/1мг ткани за 1 мин.) 14,62±0,32 6,32±0,22* 13,42±0,70** 13,02±1,07** 14,02±0,21**


Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |
 

Похожие работы:










 
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.