авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 7 |

Иммунобиологическая оценка состояния облученных животных и способы повышения радиорезистентности организма

-- [ Страница 3 ] --

Изучение влияния пролонгированного облучения в малой дозе низкой мощности на количество липидов в печени крыс показало, что количественные параметры общего белка в течение исследуемого периода имели отличия. Так спустя 30 суток содержание белка в печени подопытных крыс составило 196,0±15,5мг/г при 203,8±12,6 мг/г в контроле. Спустя 60 суток 238,0±26,0 мг/г - при 206,0±9,1 мг/г в контроле; на 90 сутки содержание белка было по-прежнему повышенным (235,0±22,0 мг/г при 212,0+4,2 мк/мг в контроле). Через 4 месяца этот показатель не имел заметных отличий от контроля и составлял 226,0±14,0мг/г. Содержание эфиров холестерина при облучении имело тенденцию к снижению. Заметные изменения произошли по этому показателю спустя 3 мес после облучения, когда уровень холестерина достоверно уменьшался и составлял 2,7±0,4 мкг/г, что было ниже контрольной величины на 30%. Через 120 дней он поднимался до уровня контроля (3,7±0,3мкг/г при 3,3+1,5мкг/г в контроле). Содержание общих фосфолипидов не отличалось от контрольной величины во все сроки исследования. Таким образом, после воздействия пролонгированного гамма-излучения, при мощности излучения 0,39 мГр/мин (1,810-7 Гр/с) в печени облученных крыс через 1 мес (0,28 Гр) наблюдается уменьшение количества холе­стерина, что сохраняется через 60 (0,56 Гр) и 90 суток (0,84 Гр). Восстановление холестерина до нормальных количественных значений наблюдается через 120 суток непрерывного пролонгированного облучения.

Гистологическое изучение препаратов сердца, селезенки и печени показало, что структура органов сохранена, а выявленные изменения носят однотипный характер и не имеют существенных отличий от таковых контрольных животных.

3.1.2 Опыты на свиньях. Из свиней было сформировано три группы по пять голов в каждой: первая – нахождение под облучением при мощности дозы 0,39 мГр/час в течение 30 и 90 суток; вторая - при мощности дозы 1,2 мГр/час в течение 30 и 90 суток; третья группа облучению не подвергалась и служила биологическим контролем. Исследования крови у свиней проводили прижизненно на 30 и 90 сутки. Суммарная накопленная доза по срокам исследования составила 0,27; 0,81 Гр (первая группа); 0,87 и 2,61 Гр (вторая группа), соответственно. Весь период нахождения под непрерывным облучением состояние животных было удовлетворительным. Случаев падежа не наблюдалось. Масса тела спустя 30 и 90 суток у подопытных животных первой и второй группы не отставала от таковой биологического контроля. Содержание лейкоцитов в крови свиней, находившихся в течение 30 и 90 суток в условиях двух различных уровнях излучения, имело зависимость от мощности дозы. В первой группе подопытных животных при мощности 0,39 мГр/час количество лейкоцитов находилось в пределах физиологической нормы. Во второй группе (1,2 мГр/час) - этот показатель был ниже контрольных значений на 30 сутки. В лейкоцитарной формуле у животных первой и второй группы несколько увеличивался процент молодых форм нейтрофилов при относительном уменьшении сегментоядерных. К 90 суткам количество эритроцитов, содержание гемоглобина и гематокрит у подопытных свиней находился в пределах контроля (4,9±0,31012/л; 112,3±1,05 г/л; 40,2±0,16%), соответственно. Подобная закономерность наблюдалась в отношении содержания общего белка, альбуминов, -глобулинов, иммуноглобулинов IgG, IgА, IgМ. Содержание ЦИК носило изменчивый характер, но не выходило за пределы контроля. Бактерицидная активность сыворотки крови находилась в пределах контрольных величин, также как и фагоцитарная активность лейкоцитов. Повышение титров антител к ЛСЭ наблюдалось, но не превышало 0,5 балла. Активность ферментов АСТ и АЛТ у свиней подопытных групп находилась также в пределах контроля.



Таким образом, длительное низкоинтенсивное -облучение крыс в течение 30, 50, 90, 120 дней и свиней в течение 30-90 суток не вызывает видимых клинических нарушений в общем состоянии животных и в микроструктуре внутренних органах, но вызывает определенные изменения в некоторых гематологических, иммунологических, биохимических показателях, чаще при мощности излучения 1,20 мГр/час. Эти изменения в большинстве случаев носят недостоверный характер и приходятся на начальный период нахождения животных под облучением.

3.2 Радиозащитные свойства предварительного облучения в малых и низких дозах в сочетании с препаратами природного происхождения

Данный этап работы посвящен разработке способов повышения радиорезистентности организма с использованием предварительного однократного облучения в сочетании с биологическими препаратами - эракондом, тимогеном и флорентой.

3.2.1. Радиозащитное действие предварительного однократного облучения в малых и низких дозах к последующему воздействию в летальной дозе. Для изучения влияния предварительного облучения на выживаемость и клинико-гематологические показатели повторно облученных летальной дозой животных в опыт были взяты белые беспородные крысы-самцы с массой тела 180-200 г. Из крыс было сформировано 5 групп, по 10 голов в каждой. Первая группа была облучена в дозе 0,25 Гр; вторая – 0,5 Гр; третья – 0,75 Гр; четвертая в дозе 1,0 Гр; пятая - предварительно не облучалась и служила контролем. Животных всех групп содержали в одинаковых условиях вивария. Через 28-30 дней после предварительного воздействия в указанных дозах животных подвергали облучению в дозе 9,0 Гр. Одновременно с ними была облучена в летальной дозе и группа крыс, без предварительного облучения, которая служила контролем однократного облучения (группа контроля облучения). Наблюдение за выживаемостью вели в течение 30 дней.

Начало гибели животных, облученных дозой 9 Гр, приходилось на шестые сутки после облучения; к 15 дню погибли 9 из 10 крыс. Внешние клинические признаки и ранняя гибель животных свидетельствовали о крайне тяжелой степени острой лучевой болезни.

В двух группах крыс, которые были предварительно облучены в дозах 0,25 и 0,5 Гр за 28-30 дней до летального воздействия 9,0 Гр, выживаемость составила 30-40%. Сроки гибели животных приходились на 9-18 сутки после облучения.

Выживаемость животных, предварительно облученных в дозе 0,75 – 1,0 Гр за 28-30 суток до облучения в летальной дозе, составила 40-50%, а средняя продолжительность жизни павших крыс – 25 суток. Внешние клинические признаки, отдаленная во времени гибель животных свидетельствовали о проявлении у них средней степени острой лучевой болезни. Таким образом, дозы предварительного облучения 0,75 Гр и 1,0 Гр показали лучшую выживаемость при повторном облучении животных летальной дозой.

Изучение гематологических показателей крыс в дополнительном опыте показало, что в период первичной реакции на облучение (через 24 часа) в крови крыс однократно облученных в дозе 9,0 Гр количество лейкоцитов достоверно уменьшалось и составляло 43,5% по отношению к биологическому контролю. В подопытной группе крыс, предварительно облученных в дозе 0,75 Гр, в этот период общее число лейкоцитов сохранялось на 24,6%; нейтрофилов и лимфоцитов на 28,7% и 23,2%; ядросодержащих клеток в селезенке на 22,9% выше контроля облучения, соответственно. Подобная закономерность отмечалась и в группе крыс предварительно облученных в дозе 1,0 Гр (рис.2).

На седьмые сутки, которые приходятся на начало разгара острой лучевой болезни у крыс, количество лейкоцитов в группе животных, однократно облученных в дозе 9,0 Гр, составляло лишь 8,9% по отношению к биологическому контролю. Количество эритроцитов и содержание гемоглобина достоверно уменьшалось на 44,7% и 33,1%, соответственно.

 Динамика лейкоцитов и-2

Рис. 2 - Динамика лейкоцитов и ядросодержащих клеток селезенки (ЯСКС) в период первичной реакции на облучение (первые сутки)

 Динамика клеток периферической-3

Рис.3 - Динамика клеток периферической крови и ЯСКС крыс в период разгара острой лучевой болезни (7 сутки)

Развивалась тромбоцитопения с достоверным снижением кровяных пластинок на 74,6% по отношению к значениям биологического контроля. Количество ядросодержащих клеток достоверно уменьшалось на 82,4% или в 5,6 раза (рис.3).

На этом фоне в группе предварительно облученных животных в дозе 0,75 Гр количество лейкоцитов было в 3,6 раза больше по сравнению с однократно облученным контролем. Количество эритроцитов, тромбоцитов и содержание гемоглобина достоверно превосходило значения контроля облучения на 24,7; 31,7% и 21,2%, соответственно. Количество ядросодержащих клеток селезенки в данной группе превосходило таковые группы контроля облучения на 35,2% или в 3 раза. Такая же закономерность прослеживалась и в подопытной группе (1,0+9,0 Гр). Количественные значения лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов, ядросодержащих клеток селезенки, содержание гемоглобина у защищенных крыс достоверно превосходили таковые группы контроля облучения в 2,8; 1,6; 2,1; 2,9 и 1,3 раза, соответственно.

Таким образом, предварительное облучение в дозах 0,75 и 1,0 Гр за 28-30 суток до воздействия ЛД90-100/30 способствует достоверному сохранению количества лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов, гемоглобина в крови и ядросодержащих клеток селезенки у крыс по сравнению с однократным их облучением в дозе 9 Гр. Такая закономерность прослеживается во все периоды острой лучевой болезни (первичная реакция на облучение, латентный период, разгар болезни, восстановление). Указанный временной интервал предварительного облучения, по нашему мнению, соответствует времени формирования основных защитных реакций организма.

  Титры антител к лизату-4

Рис. 4 – Титры антител к лизату собственных эритроцитов у крыс, облученных малыми и низкими дозами

При изучении влияния малых и низких доз предварительного внешнего воздействия ионизирующих излучений в диапазоне доз от 0,5 до 2,0 Гр на формирование аутоантител к лизату собственных эритроцитов и к гомогенатам различных органов прослеживалась дозовая зависимость. Слабоположительные реакции регистрировались при дозе 0,5 Гр; положительные в один балл - при дозах 0,75 и 1,0 Гр. Доза 2,0 Гр вызывала положительную реакцию, оцениваемую в два балла и более. Суточная динамика увеличения титров аутоантител приходилась на 5-15 сутки (рис.4).

Динамика образования антителообразующих клеток в крови, селезенке, печени, почках имела прямую связь с динамикой образования титров аутоантител.

3.2.2. Влияние предварительного облучения в сочетании с эракондом на формирование радиорезистентности организма

Изучение влияния предварительного облучения в сочетании с эракондом на выживаемость повторно облученных летальной дозой животных проводилось с использованием -излучения в диапазоне доз от 0,5-1,0 Гр и 10% раствора эраконда в дозе 5,0-7,5 мл/кг с водой и кормом за 5-10 дней до летального облучения в дозе 9 Гр. Вводимые дозы эраконда обоснованы нами экспериментально по их радиозащитному действию в диапазоне от 2,5-12,5 мл/кг. Наибольший радиозащитный эффект при ЛД90-100/30 наблюдался при введении эраконда в объеме 5,0-7,5 мл/кг. Эти объемы препарата были взяты для разработки радиозащитного способа.

Таблица 3. Выживаемость белых крыс, облученных летальной дозой на фоне применения предварительного облучения и эраконда

Группы Кол-во крыс (штук) Доза про- филактич. обработки -лучами (Гр) Доза введения эраконда (мл/кг) Летальная доза облучения (Гр) Выживае- мость (%)
1. Биологич. контроль 10 нет нет нет 100
2. Контроль облучения 10 нет нет 9,0 10
3. Контроль предваритель- ного облучения 10 10 10 0,5 0,75 1,0 нет нет нет 9,0 9,0 9,0 20-30 40-50 50-60
4. Контроль препарата эраконд 10 нет 5,0-7,5 9,0 40-50
5. Опытная 24 0,5 5,0-7,5 9,0 50-60
6. Опытная 24 0,75 5,0-7,5 9,0 70-80
7. Опытная 24 1,0 5,0-7,5 9,0 70- 80




Радиозащитное действие способа испытано в экспериментальных условиях на белых беспородных крысах-самцах при тяжелой степени острой лучевой болезни. В тесте 30-дневного наблюдения за клиническими проявлениями, выживаемостью и средней продолжительностью жизни павших животных в условиях применения различных доз облучения установлено, что наибольшим радиозащитным действием обладают дозы предварительного облучения 0,75-1,0 Гр в сочетании с эракондом в объеме 5,0-7,5 мл/кг (табл.3).

Таким образом, результаты опытов на крысах в течение 30-дневного наблюдения за выживаемостью показали, что радиозащитный эффект наблюдается через 20-30 дней с начала применения способа, включающего предварительное воздействие -излучения в диапазоне от 0,75-1,0 Гр и введения эраконда в объеме 5,0-7,5 мл/кг с водой и кормом ежедневно за 7-10 дней до облучения ЛД90-100/30. При этом выживаемость составляет 70-80%.

Для изучения влияния предварительного облучения в дозе 0,75 Гр в сочетании с эракондом на клинико-гематологические показатели и на клеточность бедренной кости был проведен дополнительный опыт. При этом крысы были разбиты на группы: первая (9,0 Гр – облученный контроль); вторая (0.75 Гр + 9,0 Гр); третья (эраконд + 9,0 Гр); четвертая (0,75 Гр + эраконд + 9,0 Гр); пятая – биологический контроль.

В результате исследований установлено, что у большинства крыс первой группы, которая являлась контролем облучения 9 Гр, на третьи-пятые сутки отмечалась диарея, животные отказывались от корма, не адекватно реагировали на внешние раздражители, были вялыми, взъерошенными, грязными и неподвижными. На седьмые сутки вокруг глаз и носовых отверстий образовывались коричневые корочки, что свидетельствовало о выраженном развитии геморрагического синдрома. Гибель крыс начиналась на 8-е сутки и составила 90% при средней продолжительности жизни 9,6±2,3 сут.

Таблица 4 – Показатели картины крови у подопытных крыс

Группы Эритроциты, 1012/л (7-е сут) Тромбоциты, 109/л (7-е сут.) Лейкоциты, 109/л (7-е сут)
1 к.о. 3,70±0,18* 96,2±4,02* 0,60±0,07*
2 4,57±0,23** 164,2±3,02** 1,20±0,07**
3 4,62±0.16** 176,4±4,12** 2,56±0.07**
4 4,82±0,23** 189,4±3,02** 3,30±0.15**
5 б.к. 6,56±0,08 410,6±17,12 8,98±0.15


Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 7 |
 

Похожие работы:








 
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.