авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 8 |

Значение ассоциаций микроорганизмов в этиологии и профилактике инфекционных болезней конечностей крупного и мелкого рогатого скота (некробактериоз, копытная гни

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи




ПАНАСЮК СЕРГЕЙ ДМИТРИЕВИЧ





Значение ассоциаций микроорганизмов в этиологии и профилактике инфекционных болезней конечностей крупного и мелкого рогатого скота

(некробактериоз, копытная гниль)

16.00.03 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология,

микология с микотоксикологией и иммунология


АВТОРЕФЕРАТ


диссертации на соискание учёной степени

доктора ветеринарных наук

Москва 2007

Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении «Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ «ВГНКИ») и на ФГУП «Ставропольская биофабрика»

Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор,

Лауреат премии Совета Министров СССР

А.А.Сидорчук

Официальные оппоненты:

Доктор ветеринарных наук, профессор Каврук Леонид Сергеевич

Доктор ветеринарных наук,

заслуженный ветеринарный врач РФ,

профессор Мельник Николай Васильевич

Доктор ветеринарных наук Гнездилова Лариса Александровна


Ведущее учреждение: ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии (ВНИИЭВ) им. Я.Р.Коваленко

Защита диссертации состоится “ 31 ” мая 2007 г. в “_10_” часов “30”минут на заседании Диссертационного совета Д 220.011.01 в Федеральном государственном учреждении Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов (123022, Москва, Звенигородское шоссе, 5, ФГУ ВГНКИ)


С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ ВГНКИ

Автореферат диссертации разослан “___”___________ 2007 г.



Учёный секретарь диссертационного совета,

кандидат ветеринарных наук,

заслуженный ветеринарный врач РФ Ю.А. Козырев

  1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Эпизоотологические данные последних лет подтверждают тот факт, что инфекционные болезни конечностей крупного рогатого скота (КРС) и овец занимают одно из ведущих мест в инфекционной патологии этих видов животных в Российской Федерации (РФ), где наибольшее значение имеют некробактериоз и копытная гниль (Архангельский И.И. и др., 1986; Лайшев А.Х. и др., 1966; Walker P.D. et al., 1981). При болезнях конечностей пораженный орган постоянно контактирует с почвой и другими объектами окружающей среды, что приводит к его обильному обсеменению различной бактериальной флорой, к тому же одной из характерных особенностей анаэробных инфекций является одновременное ассоциативное воздействие на организм двух, трех и более видов анаэробных и аэробных микроорганизмов (Балтрашевич А.К., 1979; Сидорчук А.А. и др., 2006; Katic R.V.et al., 1976).



Многочисленные исследования по изучению этиологии некробактериоза КРС, некробактериоза и копытной гнили овец подтверждают большую роль сопутствующей микрофлоры, которая существенно осложняет течение болезни, что подтверждается данными отечественных и зарубежных исследователей (Самоловов А.А., 1988; Сидорчук А.А. и др., 2004; Banting A. de L. et al., 1978).

Так, неоднократно было установлено, что помимо основных возбудителей(Fusobacterium necrophorum, Dichelobacter (Bacteroides) nodosus) в этиологии некробактериоза КРС, некробактериоза и копытной гнили овец определенную роль играет гнойно-раневая микрофлора: Clostridium perfringens тип A, Staphylococcus aureus, Actinomyces (Corynebacterium) pyogenes и другие, которые формируют микробные ассоциации в природе и организме животных, усиливая своими ферментативными системами действие основных возбудителей и тем самым увеличивая вирулентность последних в десятки раз (Сидорчук А.А. и др., 1996; Gorbach S.L., Bartlett J.S., 1974; Roberts D.S., 1967). Реальным подтверждением указанных фактов явилось создание в ряде зарубежных стран ассоциированных вакцин против инфекционных болезней конечностей сельскохозяйственных животных: Pietimam, Pietivac (Франция), Памавак (Югославия). В то же время, в связи с созданием крупных откормочных и молочных комплексов для КРС, закупкой и перемещением по стране большого количества племенного скота проблема некробактериоза встала особенно остро. Так, по данным Караваева Ю.Д. (1999; 2003), заболеваемость некробактериозом в 1991г. составила 13,5% от всех случаев инфекционной патологии у данного вида животных, а в последующие годы сохранялась устойчивая тенденция к росту заболеваемости КРС некробактериозом. Результаты исследования Архангельского И.И. и др. (1986), Кононова А.Н. (2001; 2004), Самоловова А.А. (1993; 1997; 1998), Сидорчука А.А. и др. (2002; 2003; 2006), Сукеева Ш.С. и др. (1980; 1984) указывают на тот факт, что, несмотря на резкое снижение поголовья овец, некробактериоз и копытная гниль, как и раньше, являются одной из основных проблем в инфекционной патологии данного вида. Так, в период с 1986 по 2003 гг. ежегодная заболеваемость копытной гнилью и некробактериозом овец составляла до 190 тыс. голов.

Применение отечественных моновалентных вакцин против некробактериоза КРС и копытной гнили овец не позволило полностью решить проблемы ликвидации некробактериоза и копытной гнили, хотя их использование позволяет значительно снизить заболеваемость животных. В связи с вышеизложенным, конструирование вакцин против инфекционных болезней конечностей КРС (некробактериоз) и овец (некробактериоз и копытная гниль) на основе ассоциации анаэробных микроорганизмов (Fusebacterium necrophorum и Dichelobacter nodosus) и гнойно-раневой микрофлоры позволит более надежно профилактировать указанные болезни.

Цель работы. Целью настоящих исследований было выяснение роли и значения ассоциаций анаэробных микроорганизмов F. necrophorum и D. nodosus и представителей гнойно-раневой микрофлоры в этиологии, патогенезе и профилактике инфекционных болезней конечностей КРС и овец, а также обоснование создания нового поколения средств специфической профилактики этих болезней.

Задачи исследований.

1. Изучить особенности эпизоотологии некробактериоза крупного рогатого скота, некробактериоза и копытной гнили овец в различных зонах Российской Федерации и Республики Киргизия;

2. Выяснить видовой спектр микроорганизмов при болезнях конечностей крупного рогатого скота и овец. 3. Изучить биологические свойства изолятотов и провести отбор штаммов для конструирования ассоциированных вакцин;

4. Экспериментальным путем подтвердить значение ассоциаций микроорганизмов в инфекционной патологии конечностей крупного рогатого скота и овец;

5. Изучить иммунный ответ при применении ассоциированных вакцин, определить возможность конкуренции антигенов в организме животных, привитых ассоциированными вакцинами и разработать схемы их применения;

6. Разработать методы контроля и промышленную технологию изготовления ассоциированных вакцин;

7. Испытать эффективность ассоциированных вакцин в лабораторных и производственных условиях.

Научная новизна. Установлены особенности эпизоотологии и клинического проявления инфекционных болезней конечностей КРС (некробактериоз) и овец (некробактериоз, копытная гниль) в различных природно-климатических зонах Российской Федерации и в Республике Киргизия. Определен видовой спектр микроорганизмов при инфекционных болезнях конечностей КРС и овец. Установлена и экспериментально подтверждена роль гнойно-раневой микрофлоры в ассоциации с анаэробными микроорганизмами F. necrophorum и D. nodosus в этиологии и патогенезе инфекционных болезней конечностей.

Впервые в Российской Федерации разработаны и испытаны с положительными результатами две инактивированные ассоциированные вакцины против некробактериоза конечностей КРС (запатентованные названия “Нековак”, “Нековак-стимул”, патент N 2098127 от 10.12.1997г.) и инактивированная ассоциированная вакцина против инфекционных заболеваний конечностей овец (запатентованное название “Овикон”, патент N 2098128 от 10.12.1997г.). Вакцины зарегистрированы Департаментом ветеринарии МСХ и П РФ. На препараты получены сертификаты соответствия.

Разработаны методы контроля вакцин, промышленная технология их изготовления, методы оценки иммунитета у вакцинированных животных и схемы применения вакцин в неблагополучных хозяйствах, а также система мер по борьбе с некробактериозом и копытной гнилью.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Впервые в Российской Федерации разработаны и внедрены в производство инактивированные ассоциированные вакцины: против некробактериоза конечностей КРС - “Нековак” и “Нековак-стимул”; и инфекционных заболеваний конечностей овец - “Овикон”. Серийный выпуск препаратов с 1995г. налажен на Ставропольской биофабрике.

Материалы разработки вошли в “Правила по профилактике и ликвидации некробактериоза животных”, утвержденные Департаментом ветеринарии МСХ и П РФ 11.07.2000 г. №ВП 13.4.1313-00.

Материалы диссертации вошли также в рекомендации “Диагностика, профилактика и меры борьбы при некробактериозе крупного рогатого скота”. Рекомендации одобрены Департаментом ветеринарии МСХ и П РФ 21.02.2000 г., и в “Методические рекомендации по профилактике и борьбе с копытной гнилью овец”, утвержденные РАСХН 22 марта 2004 г.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на заседаниях: Ученого совета ВНИИЭВ им. Я.Р. Каваленко (1989-1991); заседаниях Ученого совета ФГУ ВГНКИ в 1992-2003 гг.; заседании пленума секции паразитоценологии АН СССР (г.Витебск,1988); на Всесоюзной научной конференции “Совершенствование методов государственного контроля ветеринарных препаратов” (г.Москва, 1991); на заседании Государственной межведомственной комиссии по испытанию ветбиопрепаратов при Департаменте ветеринарии МСХ и П РФ в 1993 году; на заседании научно-проблемной методической комиссии по контролю и стандартизации биопрепаратов, применяемых при бактерийных и грибковых болезнях животных (ФГУ ВГНКИ,1995); на Всероссийской научной конференции, посвященной 70-летию факультета ветеринарной медицины Воронежского государственного аграрного университета им. К.Д. Глинки (г.Воронеж, 1996); на заседании Ветфармбиокомиссии при Департаменте ветеринарии МСХ и П РФ (1997); на Международной конфереции, посвящённой 30-летию Прикаспийского ЗНИВИ (г.Махачкала,1997), на методической и научной конференции МГАВМиБ ( г.Москва, 2001), на Международной конференции ветеринарных специалистов по борьбе с инфекционными заболеваниями с/х животных (Республика Болгария, г.Апрельцы, 2003).

Основные положения, выносимые на защиту:

- Результаты изучения особенностей эпизоотологии и клинического проявления инфекционных болезней конечностей КРС и овец в различных природно-климатических зонах Российской Федерации и Республики Киргизия.

- Результаты изучения видового спектра микроорганизмов при инфекционных болезнях конечностей крупного и мелкого рогатого скота и биологических свойств выделенных изолятов.

- Теоретическое обоснование разработки инактивированных ассоциированных вакцин против некробактериоза крупного рогатого скота “Нековак” и “Нековак-стимул” и против инфекционных заболеваний конечностей овец “Овикон”.

- Промышленная технология изготовления ассоциированных вакцин “Нековак” и “Овикон”.

- Практическая эффективность вакцинации крупного рогатого скота против некробактериоза и овец против инфекционных болезней конечностей при применении ассоциированных вакцин.

- Оценка некоторых факторов клеточного и гуморального иммунитета при применении ассоциированных вакцин.

- Система применения ассоциированных вакцин “Нековак” и “Нековак-стимул” и «Овикон» в неблагополучных хозяйствах.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано в печати 48 научных работ в различных изданиях, в которых изложены основные положения и выводы по изученным вопросам, в том числе 2 монографии,2 патента РФ на изобретения и авторское свидетельство №1835295.





Объем и структура диссертации. Диссертация написана на 430 страницах компьюторного текста и состоит из следующих разделов: введения, литературного обзора, материалов и методов исследований, результатов исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы и содержит 67 таблиц, 4 графика, 17 фотографий. Список литературы включает 517 отечественных и зарубежных источников. Приложение к диссертации в объеме 40 страниц содержит документацию, подтверждающую диссертационный материал.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы исследований

Исследования выполнены в 1988–2004 годах в лаборатории по изучению болезней овец ВНИИЭВ, в лаборатории молекулярной биологии и биотехнологии ВНИИЭВ им. Я.Р.Коваленко, на кафедре эпизоотологии МГАВМиБ им. К.И. Скрябина, в лаборатории контроля и стандартизации препаратов против анаэробных инфекций ФГУ ВГНКИ, в неблагополучных по некробактериозу крупного рогатого скота и инфекционным болезням конечностей овец хозяйствах Российской Федерации и Республики Киргизия, на ФГУП «Курская» и ФГУП «Ставропольская биофабрика». В работе были использованы данные ветеринарной отчетности областных ветеринарных лабораторий, краевого управления ветеринарии МСХ Ставропольского края и Киргизской республиканской ветеринарной лаборатории.

При проведении экспериментов были использованы лабораторные животные, овцы и крупный рогатый скот. Всего в исследованиях и экспериментах было использовано:1192 белых мыши, 60 морских свинок, 451 кролик, 24174 овцы, 18279 голов крупного рогатого скота.

Эпизоотологические исследования по заболеваемости крупного рогатого скота некробактериозом и его клиническому проявлению были проведены в 13 хозяйствах 5 областей Центральной России на 10082 головах КРС, в 4 хозяйствах 4 районов Ставропольского края на 1481 голове КРС, в 3 хозяйствах 2 районов Республики Киргизия на 2017 коровах. Эпизоотологические исследования по заболеваемости овец некробактериозом и копытной гнилью были проведены в 3 хозяйствах 3 областей Центральной России на поголовье 2190 овец, в 7 хозяйствах Ставропольского края на поголовье 10646 овец, в 3 хозяйствах Республики Киргизия на поголовье 3246 овец.

В экспериментальных исследованиях было использовано 213 проб патологического материала от крупного рогатого скота и 321 проба патологического материала от овец из указанных регионов России и Республики Киргизия. Выделение и идентификацию микроорганизмов из патологического материала, изучение биологических свойств выделенных и музейных культур проводили на базе лабораторий по изучению болезней овец и микробиологии ВНИИЭВ им. Я.Р.Коваленко, Ставропольской НИВС и КиргНПОЖ, лаборатории контроля и стандартизации препаратов против анаэробных инфекций ФГУ ВГНКИ. В исследованиях использовали методики Глотовой Е.В. (1935), Ваксмана З.А. (1942,1947), Каган Ф.И. (1937, 1938), определителя бактерий Берги (1974,1981,1986), Лабинской А.С. (1978), методические рекомендации «Лабораторные методы диагностики некробактериоза сельскохозяйственных животных» (1987), Архангельского И.И. и др. (1976, 1979, 1981, 1982, 1986, 1987, 1991), Бектимирова М.А. (1979, 1981), Сидорчука А.А. и др. (1980, 1987, 1994, 1996, 1998, 2001), Семеновой И.Н. (1981, 1988) и другие, а также, данные областных ветлабораторий центральной нечерноземной зоны РФ, Ставропольской краевой ветлаборатории, Киргизской республиканской ветеринарной лаборатории.

В работе исследовали культурально-морфологические, биохимические, токсигенные и патогенные свойства культур микроорганизмов. В результате были описаны свойства 17 штаммов F. necrophorum, 5 штаммов C. рerfringens т. А, 8 штаммов St. aureus, 15 штаммов A. pyogenes, 7 штаммов D. nodosus.

Изучение патогенных свойств указанных штаммов проводили на 1192 белых мышах, 60 морских свинках, 451 кролике и 21 овце. Для экспериментального подтверждения значения ассоциаций микроорганизмов в этиологии болезней конечностей было использовано 48 кроликов и 18 овец, при этом животных заражали как монокультурами, так и ассоциациями указанных микроорганизмов. С целью определения оптимальных соотношений антигенов для конструирования ассоциированных вакцин были приготовлены инактивированные формалином антигены F. necrophorum, S. aureus, A. pyogenes, D. nodosus в концентрациях 10, 20 и 40 млрд. микробных клеток в мл, которыми иммунизировали 36 овец. По уровню гуморальных антител подбирали оптимальные концентрации для составления опытных серий ассоциированных вакцин. Изучение конкуренции антигенов проводили на 30 овцах, которых привили моновакцинами из указанных штаммов, а так же из штамма C. рerfringens т. А на ГОА адъюванте и экспериментальной ассоциированной вакциной из тех же штаммов в той же подобранной ранее концентрации на ГОА адъюванте. О наличии или отсутствии конкуренции антигенов судили по величине титров специфических агглютининов привитых овец.

Постановку РА и учет её результатов с каждым из антигенов проводили в соответствии с методикой «Определение уровня антител против копытной гнили в сыворотке крови овец с помощью реакции агглютинации», утвержденной ВАСХНИЛ 2.04.1984 г. С валентностью C. рerfringens т. А ставили реакцию нейтрализации.

Опытные образцы инактивированных ассоциированных вакцин против инфекционных заболеваний конечностей овец «Овикон» и некробактериоза конечностей КРС «Нековак» и «Нековак-стимул» готовили в лаборатории контроля и стандартизации анаэробных препаратов ФГУ «ВГНКИ».

Опытные серии инактивированной ассоциированной вакцины «Овикон» были испытаны в 2 овцеводческих хозяйствах Центральной России на 956 овцах. Опытные серии ассоциированных «Нековак» и «Нековак-стимул» были испытаны в 3 хозяйствах Центральной России на 1760 головах КРС. Об эффективности препаратов судили по снижению заболеваемости животных и величине титров гуморальных антител.

Разработка методов контроля была проведена на 80 белых мышах, 72 кроликах, 20 овцах и 20 головах КРС.



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 8 |
 

Похожие работы:







 
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.