авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 6 |

Иммуный статус крупного рогатого скота и свиней при наиболее распространённых болезнях и его коррекция

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

МАСЬЯНОВ

Юрий Николаевич

ИММУНЫЙ СТАТУС КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА И СВИНЕЙ

ПРИ НАИБОЛЕЕ РАСПРОСТРАНЁННЫХ БОЛЕЗНЯХ

И ЕГО КОРРЕКЦИЯ

16.00.03 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология,

микология с микотоксикологией и иммунология

16.00.02 – патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени

доктора ветеринарных наук

Воронеж 2009

Работа выполнена в ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии РАСХН (ГНУ ВНИВИПФиТ) г. Воронеж

Научные консультанты: доктор ветеринарных наук, профессор,

заслуженный деятель науки РФ,

член-корреспондент РАСХН

Шахов Алексей Гаврилович

доктор ветеринарных наук, профессор,

заслуженный деятель науки РФ

Сулейманов Сулейман Мухитдинович

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор,

заслуженный деятель науки РФ

Земсков Андрей Михайлович

доктор ветеринарных наук, профессор

Евглевский Анатолий Алексеевич

доктор ветеринарных наук, профессор

Трояновская Лидия Петровна

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Донской государственный аграрный
университет»

Защита состоится «___»________2009 г. в____часов на заседании диссертационного совета ДМ 006.004.02 во Всероссийском научно-исследо-вательском ветеринарном институте патологии, фармакологии и терапии (394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114-б)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ ВНИВИПФиТ

Автореферат разослан «___» _____________ 2009 г.

Учёный секретарь диссертационного совета,

кандидат биологических наук Близнецова Г.Н.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Перевод животноводства на промышленную технологию, особенностью которой является новые методы содержания, кормления и эксплуатации, и связанное с этим увеличение концентрации поголовья, потенциально патогенных микроорганизмов в помещениях, изменение первоначальных их свойств, влияние на организм животных технологических стресс-факторов, экологическое неблагополучие внешней среды, усугубляющееся практически повсеместным дефицитом в кормах микроэлементов, ставит перед ветеринарными специалистами новые сложные задачи по охране здоровья животных (А.Г. Шахов, 2005).

Воздействие этих факторов влияет на приспособительно-адаптационные механизмы у животных, изменяя их, что приводит к снижению неспецифической резистентности и иммунитета или повышению реактивности.

Возникновение нарушений функций иммунной системы является одним из патогенетических механизмов любого патологического процесса (Ю.Н. Федоров, 2006).

В связи с этим приобрели широкое распространение так называемые факторные инфекции, проявляющиеся у маточного поголовья нарушениями воспроизводительной функции, эндометритами, маститами, а у молодняка диарейным и респираторным синдромами (В.В. Макаров, 2005; А.Г. Шахов, 2005).



Возникновение этих болезней обусловлено, как правило, ассоциациями микроорганизмов. Вирусы вызывают альтерацию и иммуносупрессию, что является пусковым механизмом для развития вторичной бактериальной инфекции наряду с грибами и простейшими (Е.В. Андреев, 1985; В.А. Мищенко с соавт., 2001; D.G. Bryson, 1996).

При этом в каждом случае среди животных имеются особи, которые не болеют или переболевают в относительно лёгкой форме. Кроме того, в неблагополучных хозяйствах среди больных и здоровых животных регистрируются серопозитивные и серонегативные, контаминированные и свободные от тех или иных патогенов особи. Это, безусловно, свидетельствует о сложном характере взаимоотношения между микроорганизмами и состоянием защитных систем, обусловленных адаптационными возможностями организма животных к воздействию неблагоприятных факторов окружающей среды.

Во многом остаются не до конца решёнными и морфологические аспекты, связанные как с физиологическим состоянием систем органов, так и патологическими изменениями.

Поэтому в настоящее время является актуальной оценка иммунного статуса животных в зависимости от возраста, физиологического состояния, воздействия патогенных факторов, обусловливающих возникновение болезней, и возможность его коррекции препаратами, обладающими антиоксидантным и опосредованно иммуномодулирующим действием.

Цель и задачи исследований. Изучить иммунный статус крупного рогатого скота и свиней при наиболее распространённых болезнях и возможность его коррекции препаратами, обладающими антиоксидантным и иммуномодулирующим действием.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить влияние нормализации обмена веществ на иммунный статус в системе мать-плод-новорожденный.

2. Изучить иммунный статус в зависимости от возраста маточного поголовья и его влияние на качество приплода.

3. Изучить иммунный статус при послеродовой патологии матки и молочной железы у коров и свиноматок.

4. Изучить иммунный статус у телят и поросят при болезнях, проявляющихся диарейным и респираторным синдромом.

5. Провести сравнительную оценку коррекции иммунного статуса взрослого поголовья и молодняка крупного рогатого скота и свиней лигфолом, селедантом и лигавирином при специфической профилактике болезней молодняка.

6. Разработать и дать оценку информативности методам тестирования системного и локального иммунитета животных.

Научная новизна. Впервые у крупного рогатого скота и свиней разного возраста изучен иммунный статус, уровень факторов неспецифической защиты и морфология локального иммунитета в органах первичного поражения при распространённых факторно-инфекционных болезнях. Изучено модулирующее влияние лигфола, селеданта и лигавирина на иммунный статус и ответ к бактериальным и вирусным антигенам при вакцинации коров, свиноматок и молодняка. Разработаны методы тестирования локального и системного иммунитета, дана оценка их информативности при некоторых болезнях животных послеродового периода.

Научная новизна исследований подтверждена шестью патентами РФ: «Способ профилактики колибактериоза телят» №2275935 от 10.05.2006; «Способ профилактики респираторных болезней телят» №2287986 от 27.11.2006; «Способ профилактики вирусных респираторных болезней телят» №2287992 от 27.11.2006; «Способ профилактики острых респираторных болезней телят» №2292916 от 10.02.2007; «Способ профилактики желудочно-кишечных болезней телят» №2295975 от 27.04.2007; «Способ повышения неспецифической резистентности и иммунологической реактивности свиней при вакцинации» №2321414 от 10.04.2008.

Практическая значимость. Дана доклиническая оценка иммунного статуса взрослого поголовья и молодняка крупного рогатого скота и свиней и при развитии патологии с учётом влияния факторов окружающей среды, этиологической структуры инфекционных болезней и морфологии локального иммунитета в поражённых органах, что позволило установить нарушения, обусловливающие их возникновение, а также статус, характеризующий норму. На этой основе проведена оценка коррекции иммунного статуса животных препаратами, обладающими антиоксидантным и иммуномодулирующим действием, установлена её роль в повышении эффективности специфической профилактики болезней молодняка.

Материалы диссертации вошли в одобренные секцией «Патология, фармакология и терапия» Россельхозакадемии «Методические рекомендации по оценке и коррекции естественной резистентности животных» (Воронеж, 2005), «Методические рекомендации по оценке и коррекции иммунного статуса организма животных» (Воронеж, 2005), «Методические рекомендации по оптимизации формирования колострального иммунитета у новорожденных животных» (Воронеж, 2009), методическое пособие «Методы морфологических исследований» (Воронеж, 2000).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 38 научных работ, из них 15 в рекомендованных ВАК изданиях.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на Международной научно-практической конференции «Свободные радикалы, антиоксиданты и здоровье животных» 21-23 сентября, Воронеж, 2004; на Международной научно-практической конференции посвящённой 100-летию со дня рождения академика ВАСХНИЛ Я.Р. Коваленко «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных» 16-17 мая, Москва, 2006; на Всероссийском ветеринарном конгрессе «XV. Московский ветеринарный конгресс по болезням мелких животных» 21-23 апреля, Москва, 2007.

Объём и структура диссертации. Материал диссертации изложен на 410 страницах текста в компьютерном исполнении, включает обзор литературы, материал и методы исследований, результаты собственных исследований и их анализ, выводы, практические предложения, список литературы, содержащий 478 источников, в том числе 211 зарубежных авторов и приложения. Диссертация содержит 48 таблиц и 81 рисунок.

Основные положения, выносимые на защиту:

- влияние иммунного статуса в системе мать-новорожденный на заболеваемость и продуктивность молодняка крупного рогатого скота и свиней;

- иммунный статус и морфогенез в поражённых органах при массовых болезнях у взрослого поголовья и молодняка крупного рогатого скота и свиней;

- сравнительная оценка влияния коррекции иммунного статуса крупного рогатого скота и свиней лигфолом, селедантом и лигавирином при специфической профилактике желудочно-кишечных и респираторных болезней молодняка.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Работа выполнена в 1993-2008 гг. в отделах микробиологии, вирусологии, иммунологии и патологической морфологии ГНУ Всероссийский НИВИ патологии, фармакологии и терапии РАСХН. Экспериментальные исследования проведены в хозяйствах Воронежской, Волгоградской и Орловской областей.

Клинические и лабораторные исследования по теме диссертации проведены в соответствии с планом НИР ГНУ ВНИВИПФиТ по заданию 08.04.02. «Изучить системные иммунодефициты в возникновении массовых желудочно-кишечных и респираторных болезней молодняка сельскохозяйственных животных и разработать средства и способы их коррекции для профилактики и терапии» (№ гос. регистрации 01.200.117019); по заданию 08.04.01. «Разработать методы ранней диагностики, эффективные средства и способы профилактики и лечения массовых незаразных и вызываемых условно-патогенными микроорганизмами заболеваний у молодняка высокопродуктивных животных» (№ гос. регистрации 15070. 3666026906. 06.8.001.2).

Отдельные исследования проведены при участии сотрудников отделов клинической биохимии, патологии органов размножения и молочной железы животных, физико-химических методов исследований ГНУ ВНИВИПФиТ Золотарёва А.И., Близнецовой Г.Н., Нежданова А.Г., Климова Н.Т., Михалёва В.И. Шушлебина В.И., Чусовой Г.Г. и других, которым автор выражает искреннюю признательность за оказанную помощь и плодотворное сотрудничество.

Иммунный статус и показатели неспецифической резистентности изучали в сравнительном аспекте:

- у коров с нарушенным (n=28) и нормализованным обменом веществ (n=30), и полученных от них телят, соответственно (n=26) и (n=30).

- в период сухостоя и после родов у здоровых коров (n=4) и заболевших эндометритом (n=11), а также у здоровых (n=6) и заболевших субклиническим (n=10) и клиническим маститом (n=6);

- у телят, родившихся как от коров с нарушенным и нормализованным метаболизмом, заболевших омфалитом, соответственно (n=10) и (n=8), диареей (n=11) и (n=8), с респираторной патологией (n=15) и (n=11) и клинически здоровых (n=8). Исследования проведены до клинического проявления патологии и у больных животных;

- у свиноматок в зависимости от возраста, соответственно 1-2 (n=10), 3-6 (n=10) и 7-8 (n=7) опоросов, со сроками супоросности 35 и 100-105 дней, и его влияние на качество приплода, заболеваемость и сохранность поросят;

- до и после опороса у здоровых свиноматок (n=8) и заболевших послеродовым гнойно-катаральным эндометритом (n=19) и маститом (n=7);





- у больных 3-5 дневных поросят при диарейном синдроме - энзоотическом течении трансмиссивного гастроэнтерита (n=7) и здоровых (n=9);

- у 35 дневных поросят перед отъёмом, предрасположенных к респираторной патологии (n=20), 70-дневного возраста, заболевших (n=9) и оставшихся здоровыми (n=11), а также 3-3,5 месячного возраста, больных хронической бронхопневмонией (n=5) и здоровых (n=5).

С целью повышения эффективности специфической профилактики колибактериоза у телят проведена коррекция иммунного статуса у коров при двукратной вакцинации их в сочетании с лигфолом (n=6), лигавирином (n=5) и селедантом (n=8) по сравнению с иммунизированными без применения препарата (n=5) и интактными животными (n=5).

Влияние иммуномодуляторов на формирование у новорожденных телят колострального иммунитета и эффективность специфической профилактики сальмонеллёза, парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита при двукратной вакцинации их в месячном возрасте в сочетании с лигфолом (n=6), лигавирином (n=5) и селедантом (n=8), по сравнению с интактными животными (n=5) и контрольной группы (n=5).

Коррекцию иммунного статуса свиноматок с целью специфической профилактики эшерихиоза и сальмонеллёза у поросят проводили при двукратной вакцинации их в период 1,5 месяцев супоросности в сочетании с применением лигфола (n=6), лигавирина (n=6) и селеданта (n=6) в сравнении с интактными животными (n=6) и контрольной группы (n=6). Исследования проведены также за 1-2 недели до опороса и на 2-4 день после него.

Коррекцию иммунного статуса поросят лигфолом (n=6), лигавирином (n=6) и селедантом (n=6) с целью специфической профилактики эшерихиоза и сальмонеллёза, на фоне животных контрольной (n=6) и интактной групп (n=6). Исследования проведены до и после вакцинации, соответственно в 2-3 недельном, а также 38-43, 48-53 и 79-84 дневном возрасте.

Гематологические показатели определяли общепринятыми методами.

Лимфоциты выделяли из гепаринизированной крови (25 ЕД/мл) на фиколл-верографине (плотность –1,077 г/см3). Количество Т-лимфоцитов в крови определяли у КРС и свиней методом спонтанного розеткообразования с эрироцитами барана (Е-РОК) по M. Jondal et. al. (1972), В-лимфоцитов - методом комплементарного розеткообразования (ЕАС-РОК) с использованием стандартного кроличьего гемолизина и в качестве комплемента - свежей сыворотки, соответственно КРС и свиней, В-лимфоцитов с IgM и IgG-рецепторами (у КРС) - в антииммуноглобулиновом розеткообразующем тесте, Fc+-лимфоциты (у свиней) с помощью ЕА-РОК. О-лимфоциты вычисляли по разнице от общего количества лимфоцитов суммы Е- и ЕАС-РОК, а количество резистентных и чувствительных к теофиллину Т-клеток - согласно методическим указаниям А. М. Земскова с соавт. (1988). Концентрацию иммуноглобулинов G, М и А классов, а также С1q- и С3-компонентов комплемента определяли методом РИД по G. Mancini (1965) (Выражаем иcкреннюю благодарность д.б.н., профессору, член-корр. РАСХН Ю.Н.Фёдорову за предоставление диагностикумов для определения концентраций IgG, IgМ и IgА у свиней). Выделение секреторной формы IgA (SIgA) проводили согласно Г. Фримелю (1987), С1q- и С3-компонентов комплемента КРС, получение к ним кроличьих антисывороток и доведение их до моноспецифичности - с помощью комплекса методов, которые отражены в «Методических рекомендациях по оценке и коррекции иммунного статуса животных» (Воронеж, 2005). Бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК) определяли по О.В. Смирновой и Т.А. Кузминой (1966), лизоцимную (ЛАСК) - по К.А. Каграмановой и З.В. Ермольевой (1966), комплементарную (КАСК) – по Г.Ф. Вагнеру (1963), титры нормальных антител – в РГА, фагоцитарную активность лейкоцитов (ФАЛ), индекс и число (ФЧ и ФИ) – по В.С. Гостеву (1950), индекс завершенности фагоцитоза (ИЗФ) – по И.М. Карпутю (1993). Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) осаждали из сыворотки крови - 3,5% ПЭГ-6000. Наличие вируса ТГС у больных поросят в фекалиях, в содержимом кишечника и составе ЦИК, определяли встречным иммуноэлектрофорезом (ВИЭФ) с полученной на кроликах преципитирующей антисывороткой к культуральному вирусу ТГС, антитела к вирусу ТГС в сыворотке крови поросят - методом задержки ВИЭФ. Диссоциацию ЦИК с последующей идентификацией в их составе антигена ТГС проводили путём восстановительного сульфитолиза по О. Я. Поповой и Л. С. Косицкой (1977). Титры антител в сыворотке крови свиней к вирусу РРСС - в РДП (очистку антигена РРСС проводили гельфильтрацией на сефадексе G-50 живой лиофилизированной вирусвакцины).

Для определения интенсивности абсорбции иммуноглобулинов в кишечнике новорожденных телят учитывали: концентрацию IgG в молозиве и объём его потребления в каждую выпойку (четырёхкратно в течение суток); рассчитывали абсолютное количество IgG (г) поступившего в желудочно-кишечный тракт телёнка после первой выпойки молозива, а также за сутки, как сумму произведений объёма потреблённого телёнком молозива и концентрации в нём IgG (г/л) при каждой выпойке (У). Величину интенсивности всасывания иммуноглобулинов в кровь определяли в процентах абсолютного содержания IgG (г) в общем объёме крови от абсолютного уровня его поступления в желудочно-кишечный тракт телёнка. Для вычисления абсолютного уровня IgG (г) в крови телёнка (Х) использовали следующие показатели: концентрация IgG г/л в сыворотке крови (n); масса телёнка в кг (m); общий объём крови у телёнка (л), исходя из 9% её содержания от массы тела (К=0,09); показатель гематокрита (Нt), и формулу: Х = n (Кm -(Кm Ht)/100). Величину интенсивности всасывания (И) определяли в процентах по формуле: И = (Х·100)/У.

Бактериологические исследования проводили общепринятыми методами, ПЦР определяли геном вируса ЦВС-2, РРСС, хламидий.

Материалом для патоморфологических исследований служили образцы из поражённых органов коров, свиноматок и молодняка животных (матка, молочная железа, тонкий кишечник и лёгкие), которые фиксировали в 10% нейтральном формалине, обезвоживали в спиртах и хлороформе и заключали в парафин. Гистосрезы окрашивали гематоксилином и эозином. Материалом для исследования ультраструктурных особенностей абсорбции в тонкой кишке материнских факторов защиты служили поросята до приёма молозива, 3-6 часов жизни, а также одно- и трёхсуточного возраста, убитые декапитацией, от которых были взяты образцы из разных её отделов. Фиксацию материала для ультраструктурных исследований проводили в 2,5% растворе глютарового альдегида на 0,111М S-коллидиновом буфере (+4°С) с постфиксацией в 1% растворе тетраокиси осмия на том же буфере. Материал обезвоживали в спиртах и заключали в Эпон-812. Срезы приготавливали на ультрамикротоме «LKB-3800», контрастировали цитратом свинца и уранилацетатом и просматривали в электронном микроскопе «Tesla» BS-500.

Полученный цифровой материал подвергали математической обработке с помощью программы ExStat на ЭВМ РС AMD K7-800 AthIon.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Влияние нормализации обмена веществ на иммунный статус коров и полученных от них телят



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 6 |
 

Похожие работы:










 
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.