авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 5 |

Фармакология и применение каротиноидов в ветеринарии и животноводстве

-- [ Страница 2 ] --

Санитарно-гигиеническая оценка продукции после применения препаратов

Производственные испытания, разработка наставлений по применению

Экономическая эффективность

Параметры хронической токсичности изучали по общепринятым методикам на белых крысах, телятах и поросятах. Препараты задавали ежедневно в дозах, превышающих условно-терапевтическую в 3 и 5 раз. При наблюдениях учитывали потребление корма, воды, состояние шерсти и слизистых оболочек, показатели дыхания, пульса, температуры тела. Взвешивание животных осуществляли в начале опыта, а затем каждые 20 дней, кровь для морфологических исследований брали 3 раза (фоновое, на 30 и 60-е сутки). В конце эксперимента проводили биохимические исследования сыворотки крови, а местно-раздражающее действие на желудочно-кишечный тракт оценивали в процессе патоморфологического изучения при макро- и микроскопическом исследовании.

В хронических опытах на телятах оценивали влияние препаратов на функцию почек и пищеварительного тракта, для этого каждые 20 дней от животных опытной и контрольной групп собирали мочу и фекалии. В моче определяли цвет, консистенцию, запах, концентрацию водородных ионов, удельный вес, содержание белка, углеводов, гемоглобина, желчных пигментов, уробилина. В фекалиях определяли цвет, запах и консистенцию (органолептически), наличие кровяных пигментов (бензидиновой пробой), желчных пигментов, жира (окраской суданом-3), крахмала (обработка раствором Люголя), рН-(лакмусовой бумагой).

Выявление кожно-резорбтивного действия изучаемых веществ проводилось на морских свинках и кроликах по методике И.В. Саноцкого (1970) методом накожных аппликаций.

Эмбриотоксическое действие определялось на 7-суточных куриных эмбрионах путем введения препаратов в желточный мешок. На 19-е сутки инкубации по 10 яиц из каждой группы помещали в морозильную камеру для умерщвления эмбрионов. В дальнейшем изучали их размеры, строение внутренних органов (по Вильсону) и скелета (по Доусону).

О качестве мяса животных после применения каротиноидов судили по результатам ветеринарно-санитарной экспертизы. Для этого проводили внешнее обследование туш, органолептическую оценку вкусовых качеств мяса и бульона, определение рН мяса через 1 час и 1 сутки после убоя, бактериальной обсемененности туш методом отпечатков с поверхности и глубоких слоев мышц, реакцию на пероксидазу, формольную реакцию и определение коэффициента кислотность-окисляемость.

О фармакодинамике препаратов судили по клиническим показателям, изменениям в белковом, липидном и углеводном, минеральном и витаминном обменах, общей неспецифической резистентности, интенсивности роста и продуктивности животных.

Фармакокинетику -каротина изучали на птице путем определения в динамике уровней каротина и витамина А в сыворотке крови и печени, после введения каролина, а также по изменению концентраций этих веществ в яйце.

При морфологических исследованиях определяли количество эритроцитов и лейкоцитов в камере Горяева, выводили лейкоформулу по В.Г. Мухину, содержание гемоглобина (гемоглобинцианидным методом), подсчитывали цветовой показатель, СОЭ в аппарате Панченкова, гематокрит в капиллярах - в центрифуге. Биохимические исследования состояли из определения в сыворотке крови общего белка (колориметрически), белковых фракций (нефелометрически), каротина и витамина А (по Бессею, в модификации Анисовой), мочевины (цветной реакцией с диацетилмонооксимом и тиосемикарбазидом), витамина Е (по цветной реакции с хлорным железом и -дипиридилом), общего кальция (с орто-кризолфталеином), неорганического фосфора (с ванадат-молибдатным реактивом), глюкозы (ферментативно). Активность трансаминаз, щелочной фосфатазы, мочевую кислоту, билирубин, холестерин, общие липиды, креатинин - с помощью наборов фирмы «ДДС». Микроэлементный состав крови исследовался атомно-абсорбционным методом.



Для определения факторов неспецифической резистентности использовали тест бактериального фагоцитоза нейтрофилов с учетом степени его завершенности по отношению к бактериям Staphylococcus aureus (№ 209 Р) по И.В. Нестеровой с соавторами (1996). Бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК) определяли по О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966), лизоцимную (ЛАСК) – по Д.Г. Дорофейчук, количество Т-, В-, NК-лимфоцитов методом Пирса в модификации Н.Н. Гугушвили с соавторами (2000) с прочным синим и нафтилацетатом. Содержание иммуноглобулинов - методом Манчини с соавторами (1965).

Оценку показателей системы ПОЛ-АОЗ проводили в соответствии с методическими рекомендациями ВНИВИПФиТ (1997) по изучению процессов перекисного окисления липидов и системы антиоксидантной защиты организма у животных.

Комплексные исследования животных проводили с учетом условий их кормления, содержания и эксплуатации. Выявляя причины заболевания, оценивали особенности клинического проявления болезни, паталогоанатомическую картину, поставленный диагноз подтверждали лабораторными исследованиями.

При диагностике гиповитаминоза А учитывали дефицит каротиноидов и ретинола в кормах и крови, принимая во внимание стадные признаки болезни: энзоотичность, падение рождаемости, повышение заболеваемости и смертности, снижение воспроизводительной функции популяции из-за симптоматического (А-гиповитаминозного) бесплодия и гибели новорожденных-гипотрофиков. При исследовании больных животных оценивали их общее состояние, снижение упитанности, задержку роста и развития, изменения в деятельности органов, связанных с метаплазией и кератинизацией эпителия.

Гипотрофию телят и поросят определяли по сниженной живой массе и задержке роста и развития, плохой упитанности, подавленности сосательного рефлекса, уменьшению показателей естественной резистентности организма.

При клинической оценке послеродовых осложнений у коров и свиноматок определяли время родов, задержание последа, наличие патологических выделений (кровь, экссудат) из влагалища, ригидность и консистенцию матки устанавливали при ректальном исследовании. Послеродовые осложнения у свиноматок выявляли по синдрому ММА (метрит-мастит-агалактия).

Выбор (подбор) терапевтических средств и методик (приемов, техники) их применения при лечении больных животных осуществляли на основе

этио-патогенетического диагноза, особенностей клинического проявления и тяжести течения болезни.

Полученные в опытах данные были подвергнуты биометрической обработке с помощью программного обеспечения фирм Microsoft и Carl Zeiss. Критерий достоверности определяли по таблице Стьюдента.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Физико-химические свойства и контроль препаратов каротина

В результате сотрудничества Краснодарского НИВИ, ЗАО «Роскарфарм» (г. Краснодар) и ОАО «Уралбиофарм» (г. Екатеринбург) разработаны новые отечественные препараты на основе бета-каротина (каролин, карсел и карток) и ликопина (ликолин и ликовит). Бета-каротин и ликопин получены из наиболее активного их продуцента - гетероталличного гриба Blakeslea trispora, относящегося к порядку Mucorales.

На все композиции разработана научно-техническая документация, в которой отражены требования, соблюдение которых гарантирует высокое качество препаратов и наличие активно-дейтвующих веществ, что обеспечивало рациональное их использование в животноводстве и ветеринарии. В технических условиях отражены показатели, характеризующие препараты по внешнему виду, цвету, запаху и вкусу, массовой доле действующих веществ, кислотному и перекисному числу, стерильности и безвредности. Физико-химические свойства препаратов представлены в таблице 1.

Каролин, карсел, карток представляют собой растворы бета-каротина в рафинированных и дезодорированных маслах (кукурузном, соевом, подсолнечном) с массовой долей каротина не менее 0,18%. Действующим веществом является получаемый из биомассы культуры гриба Blakeslea trispora, бета-каротин (С40Н56), выпускаемый по ФС 42-3867. В карсел дополнительно входит ДАФС-25, представляющий собой диацетофенонилселенид, содержащий 25% органически связанного селена с массовой долей 0,225%, а в карток – витамин Е с массовой долей 0,5%. Эти препараты выпускаются как для внутреннего, так и для парентерального введения.

Таблица 1 - Физико-химические свойства препаратов

Показатель КАРОЛИН КАРСЕЛ КАРТОК ЛИКОЛИН ЛИКОВИТ
Препаративная форма Прозрачная маслянистая жидкость без осадка Прозрачная маслянистая жидкость без осадка Прозрачная маслянистая жидкость без осадка Прозрачная маслянистая жидкость* Однородная пастообразная масса или маслянистый порошок
Цвет Темно-красный Темно-красный Темно-красный Красно-коричневый Красно-коричневый
Запах и вкус Специфический
Массовая доля бета-каротина, % 0,18 0,18 0,18 - -
-//- ликопина - - - 0,05-0,2 0,01-0,3
-//- ДАФС-25 - 0,225 - - -
-//- витамина Е - - 0,5 - -
Кислотное число, мг КОН, не более 0,4 0,4 0,4 - -
Стерильность + + + - -
Количество МА и ФАМ, КОЕ в 1 мл, не более - - - 5 105 5 105
Сальмонеллы в 25 мл - - - Не допускается Не допускается
Энтеробактерии в 1 мл, не более - - - 300 колоний 300 колоний
Кишечная палочка в 1 мл - - - Не допускается Не допускается

* допускается осадок, исчезающий при температуре 60С

Ликовит представляет собой обезжиренную ликопинсодержащую биомассу с концентрацией ликопина от 0,01 до 0,3%. Ликолин - это раствор ликопина в рафинированных и дезодорированных маслах (кукурузном, соевом, подсолнечном) с массовой долей ликопина от 0,05 до 0,2%.

3.2. Токсикологическая характеристика препаратов каротина

Изучение токсических свойств новых препаратов каротина на разных видах животных не позволило установить их основные токсические характеристики: среднесмертельную дозу (LD50) и дозу, вызывающую появление клинической картины токсикоза. В течение периода наблюдений установлено, что введение каротиноидных композиций в диапазоне доз от 0,94 до 36 г/кг массы тела не вызвало гибели и острой интоксикации животных и птиц, не влияло отрицательно на их общее состояние и поведение. Рефлексы оставались сохраненными. При этом нарушения функциональной активности органов пищеварения и мочеотделения не наблюдалось.

Результаты проведенной работы позволили сделать вывод о том, что каролин, карсел, карток, ликолин и ликовит обладают слабой острой токсичностью, не вызывая выраженного токсикоза в дозировках до 36 г/кг массы тела и согласно ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества» относятся к 4-му классу опасности (незначительно опасные вещества).





Изучение хронической токсичности препаратов каротина показало, что животные хорошо переносили введение испытуемых образцов. Гибели не наблюдалось ни в одной из групп. Все находившиеся в опыте крысы были клинически здоровы, поедание корма и прием воды не были нарушены, шерстный покров был гладким и отличался блеском. Визуальное наблюдение на протяжении всего эксперимента не выявило каких-либо изменений в поведении опытных животных в сравнении с контрольными.

Анализ динамики массы тела крыс выявил положительный ее прирост как в контрольной, так и в опытных группах. Так в группе, получавшей каролин в дозе 3 мл/кг массы тела, прирост составил 42,4%, в группе с дозировкой каролина 5 мл/кг массы тела – 44,8%, в контрольной – 41,05%. Аналогичная ситуация складывалась и при анализе прироста массы тела лабораторных животных, участвующих в хронических опытах по изучению токсических свойств карсела, картока, ликолина и ликовита – во всех группах с

добавкой препаратов животные росли интенсивнее в сравнении с контролем (разница составила от 3,7 до 8%).

Кровь крыс, участвующих в хроническом эксперименте, по морфологическим показателям практически не различалась в опытных и контрольной группах. Средние результаты содержания эритроцитов, гемоглобина, лейкоцитов, цветового показателя и лейкоформула соответствовали норме растущих животных. Лишь в группе, получавшей карсел в максимальной дозировке, наблюдали прогрессивный лейкоцитоз, свидетельствующий о защитной реакции организма на исследуемый препарат. Исследованиями основных биохимических показателей также не выявлено достоверных различий между группами. Однако имеет место тенденция повышения уровня общего белка, ретинола и токоферола у опытных животных.

При патоморфологическом и гистологическом исследовании органов и тканей экспериментальных животных отклонений выявлено не было, лишь единичных случаях десквамация покровного эпителия в ворсинках тонкого кишечника, как у контрольных, так и у опытных крыс, по-видимому, связана с введением больших объемов изучаемых средств.

При анализе данных хронического токсикологического эксперимента на телятах, в ходе которого изучали влияние каролина на функцию почек, пищеварительного тракта и картину крови, получены данные, свидетельствующие о том, что физико-химические показатели мочи и фекалий соответствовали норме, а в крови повышалось содержание эритроцитов, общего белка (на 17,5%), каротина (в 2 раза) и витамина А (в 1,8 раза), а также наблюдалась тенденция к увеличению гамма-глобулиновой фракции сыворотки крови (в пределах нормы). Остальные показатели существенно не отличались от контрольных (таблица 2).

Таблица 2 - Влияние каролина на показатели крови телят

при определении хронической токсичности (М±m; n=10)

Показатели Фон Опыт Контроль
Эритроциты, 1012/л 5,8 ±0,59 6,5 ±1,06* 6,1 ± 0,44
Гемоглобин, г/л 98,3±2,38 111,2±6,1 100,3±3,1
Лейкоциты, 109/л 7,06±0,24 7,06±0,17 7,1±0,28
Каротин, мкг% 98,5±3,79 234,1±7,36* 118,8±6,28
Витамин А, мкг% 56,9+±2,56 112,3±5,32* 62,7±4,21
Общий белок, г/л 50,8±1,38 64,3±1,31* 54,7±1,17
Альбумины, % 39,46±1,33 40,1±2,45 39,46±1,14
-глобулины 10,4±0,95 14,12±1,81 14,4±1,81
-глобулины 16,5±0,86 15,6±0,75 17,4±1,11
–глобулины 26,8±1,34 30,15±1,16 28,7±1,82
Лейкоформула, %
Эозинофилы 1,2±0,28 1,04±0,61 1,3±0,2
Базофилы 0,84±0,12 0,7±0,34 0,67±0,31
Нейтрофилы юные 0,56±0,2 0,67±0,1 0,33±0,34
Палочкоядерные 7,1±0,38 6,3±0,68 7,2±1,03
Сегментоядерные 30,4±1,21 27,3±1,03 28,5±1,77
Лимфоциты 60,3±1,12 64,0±1,03 62,3±2,05


Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 5 |
 

Похожие работы:








 
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.