авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:   || 2 | 3 |

Куинь изучение минерального состава лекарственного растительного сырья, содержащего эфирные масла

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи


НГУЕН ТХИ НЬЫ КУИНЬ

ИЗУЧЕНИЕ МИНЕРАЛЬНОГО СОСТАВА ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ, СОДЕРЖАЩЕГО ЭФИРНЫЕ МАСЛА


14.04.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия


Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата фармацевтических наук

Москва - 2013

Работа выполнена в ГБОУ ВПО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Минздрава России

Научный руководитель:

доктор фармацевтических наук, доцент Гравель Ирина Валерьевна

Официальные оппоненты:

доктор фармацевтических наук, профессор,

профессор кафедры фармацевтической

и токсикологической химии фармацевтического

факультета ГБОУ ВПО Первый

Московский государственный медицинский

университет им. И.М. Сеченова Прокофьева Вера Ивановна

кандидат фармацевтических наук,

руководитель испытательного центра

ОАО «Валента Фарм» Петров Николай Витальевич

Ведущая организация:

ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений (ВИЛАР) Россельхозакадемии

Защита диссертации состоится « » 2013 г. в часов на заседании Диссертационного совета Д.208.040.09 при ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России по адресу: 119019, г. Москва, Никитский бульвар, д. 13.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова по адресу: 117998, г. Москва, Нахимовский проспект, д.49.

Автореферат разослан «____» _____________2013 г.

Ученый секретарь

Диссертационного совета Д.208.040.09

доктор фармацевтических наук,

профессор Садчикова Наталья Петровна


ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Лекарственное растительное сырье (ЛРС), содержащее эфирные масла широко используется в мировой медицинской практике для лечения и профилактики заболеваний. Вместе с биологически активными веществами фармакологическое действие обусловлено комплексом минеральных веществ отдельных видов сырья, которые заготавливают как от дикорастущих, так и культивируемых растений в разных регионах. Известно, что накопление эфирного масла в растениях, его качественный и количественный состав варьирует в зависимости от экологических условий в районах произрастания (Кириченко Е.Б., 2008; La Dinh Moi, 2001).

Влияние загрязнения окружающей среды может обусловливать накопление экотоксикантов в сырье лекарственных растений. Подобного рода исследования проводились в ряде регионов России, а также в некоторых странах Европы, Африки, Америки и Азии (Дабахов М.В., 2005; Евсеева С.Б., 2007). Немногочисленные публикации указывают на возможное накопление в ЛРС Вьетнама таких металлов, как Pb и Cd (Thanh Nhu, 2012). Поэтому изучение содержания токсичных элементов и минеральных веществ в сырье этого региона является актуальным. Эфиромасличные растения широко распространены и используются в фармацевтической практике разных стран, что обуславливает необходимость проведения сравнительных исследований лекарственного растительного сырья отдельных регионов.



Цель исследования. Проведение комплексных теоретических и экспериментальных исследований по изучению минерального состава и эфирного масла широкоиспользуемых видов сырья лекарственных растений.

Задачи исследования:

  1. Провести сравнительное изучение фармакопейных требований к качеству эфиромасличного сырья в России и Вьетнаме, особенностей накопления токсичных и эссенциальных элементов в ЛРС и современных методов их анализа.
  2. Разработать оптимальные условия проведения методики пробоподготовки ЛРС для количественного определения содержания Zn, Cu, Pb, Cd в ЛРС методом инверсионной вольтамперометрии.
  3. Провести валидацию методики определения Zn, Cu, Pb, Cd в лекарственном растительном сырье и настоях методом инверсионной вольтамперометрии.
  4. Изучить методом инверсионной вольтамперометрии минеральный состав сырья разных морфологических групп (мяты перечной, мяты полевой, аира болотного), заготовленных в разных районах Вьетнама и России и провести их сравнительный анализ.
  5. Разработать оптимальные условия определения Zn, Cu, Pb, Cd в настоях и провести их анализ.
  6. Изучить химический состав эфирного масла из сырья, собранного в разных климатических и экологических условиях.

Научная новизна полученных результатов.

Впервые проведено сравнительное изучение микроэлементов (Zn, Cu) и токсичных металлов (Pb, Cd) в отдельных видах сырья лекарственных растений семейств Lamiaceae и Araceae Вьетнама и России с использованием высокочувствительного инструментального метода анализа – инверсионной вольтамперометрии. Предложена методика, подобраны оптимальные условия определения тяжелых металлов (Zn, Cu, Pb, Cd) в лекарственном растительном сырье и настоях, проведена валидация методики количественного определения.

Показано соответствие лекарственного растительного сырья исследованных видов допустимым уровням содержания токсичных металлов. Изучен переход тяжелых металлов из лекарственного растительного сырья в лекарственные формы (водные извлечения). Разработана методика испытаний настоев и проведена ее валидация.

Дополнены данные о диагностических признаках при микроскопическом исследовании цветков и стеблей мяты полевой (визуализированы простые и головчатые волоски, железки, кристаллы). Проведена сравнительная оценка качества показателей и их норм эфирномасличных видов сырья, собранного в России и во Вьетнаме. Методами тонкослойной и газовой хроматографии показаны различия состава эфирных масел листьев мяты перечной и травы мяты полевой; корневищ аира болотного, заготовленных в России и Вьетнаме.

Практическая значимость работы. Методика определения тяжелых металлов в лекарственном растительном сырье методом инверсионной вольтамперометрии апробирована в производстве и при контроле качества препаратов из лекарственных растений фармацевтической компанией «Hasan-dermapharm» во Вьетнаме (акт внедрения от 05.03.2013).

Полученные результаты сравнительной оценки качества листьев мяты перечной, травы мяты полевой и корневищ аира болотного использованы в учебном процессе на кафедрах фармакогнозии ГБОУ ВПО Санкт-Петербургская химико-фармацевтическая академия (акт внедрения от 26.03.2013) и ГБОУ ВПО Алтайский государственный медицинский университет (акт внедрения от 27.03.2013).

Положения, выносимые на защиту.

- Результаты оптимизации условий пробоподготовки, анализа и валидации методики количественного определения тяжелых металлов в лекарственном растительном сырье методом инверсионной вольтамперометрии;

- Результаты исследований по сравнительному изучению минерального состава в сырье и водных извлечениях из листьев мяты перечной, травы мяты полевой, корневищ аира болотного;

- Результаты исследований по сравнительной оценке качества фармакопейных видов сырья мяты перечной, мяты полевой, аира болотного заготовленных в России и Вьетнаме;

- Результаты исследований сравнительного изучения состава эфирных масел сырья, собранного в разных климатических зонах (Вьетнам, Россия).

Связь задач исследования с проблемным планом. Диссертационная работа выполнена в соответствии с научным планом кафедры фармакогнозии ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова по теме: «Разработка современных технологий подготовки специалистов с высшим медицинским и фармацевтическим образованием на основе достижений медико-биологических исследований» (код темы 24.10.07 проблема № 1056 АМН РФ, номер госрегистрации 01.2.006 06352).

Апробация работы. Материалы проведенных исследований представлены на XI Международном конгрессе «Здоровье и образование в XXI веке. Научные и прикладные аспекты концепции здоровья и здорового образа жизни» (Ярославль, 2010г.), научно-практической конференции «Проблемы сохранения биоразнообразия в северных регионах» (Апатиты, 2010г.), научно-практической конференции молодых ученых кафедры фармакогнозии фармацевтического факультета ГБОУ ВПО Первый МГМУ имени И.М. Сеченова «Актуальные вопросы фармакогнозии» (Москва, 2011г.), научно-практической конференции НИИ фармации ГБОУ ВПО Первый МГМУ имени И.М. Сеченова «Стандартизация готовых лекарственных средств» (Москва, 2011г.), XXI Московской международной гомеопатической конференции «Развитие гомеопатического метода в современной медицине» (Москва, 2011г.), научно-методической конференции «Гаммермановские чтения» (Санкт-Петербург, 2011г.), научной конференции профессорско-преподавательского состава «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2011г.).

Публикации. По теме диссертации опубликованы 10 работ, в том числе 3 работы в рецензируемых журналах перечня, рекомендованного ВАК.

Личный вклад автора. Автором проведен анализ отечественных и зарубежных литературных источников, нормативной и справочной документации. Вся экспериментальная работа выполнена автором самостоятельно. Автором работы оптимизирована пробоподготовка и показана возможность определения тяжелых металлов (Zn, Cu, Pb, Cd) в лекарственном растительном сырье и водных извлечениях методом инверсионной вольтамперометрии; проведена валидация методики. С использованием этой методики изучен минеральный состав сырья и водных извлечений из него. Проведено сравнительное информационно-аналитическое исследование фармакопейных показателей качества лекарственного растительного сырья на примере травы мяты полевой и корневищ аира болотного флоры Вьетнама. Изучены диагностические признаки этих видов сырья с использованием макроскопического и микроскопического методов исследований. Получено эфирное масло видов мяты и аира болотного методом перегонки с водяным паром и исследован его химический состав методами тонкослойной и газовой хроматографии.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Научные положения диссертации соответствуют формуле специальности 14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия. Результаты проведенного исследования соответствуют области исследования специальности, конкретно пунктам 6 и 7 паспорта специальности фармацевтическая химия, фармакогнозия.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 162 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, 4 глав экспериментальных исследований, обсуждения результатов, выводов, списка литературы и приложений.

Результаты эксперимента обобщены 58 таблицами и проиллюстрированы 48 рисунками. Библиографический указатель включает 117 литературных источников, в том числе 80 на русском и 37 на иностранных языках.

Во введении раскрыта актуальность темы, определены цель и задачи исследования, сформулирована научная новизна и практическая значимость работы. В первой главе обобщены литературные данные по изучению минерального состава лекарственного растительного сырья, содержащего эфирные масла; проанализированы фармакопейные требования к качеству лекарственного растительного сырья во Вьетнаме и России; изучены методы микроэлементного анализа. Вторая глава включает описание объектов и методов исследования. Глава третья посвящена оптимизации методики пробоподготовки и анализа методом вольтамперометрии и ее валидации; в ней изложены результаты определения тяжелых металлов в сырье видов мяты и аира болотного. Четвертая глава содержит результаты проведения валидации методики количественного определения в настоях тяжелых металлов и определения их концентраций в настоях из сырья мяты и аира болотного. В пятой главе представлены результаты сравнительного анализа фармакопейных требований к качеству ЛРС во Вьетнаме и России. Шестая глава посвящена изучению компонентного состава эфирных масел мяты перечной, мяты полевой, и аира болотного, собранных в России и Вьетнаме. В разделах Обсуждение результатов и Выводы представлены заключительные результаты и выводы по работе. В Приложениях представлены материалы информационно-аналитических исследований качества эфиромасличного сырья, результаты проведения валидации, акты внедрения результатов диссертационной работы.





ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Объекты и методы исследований

Объектами исследования были листья мяты перечной (Folia Menthae piperitae), трава мяты полевой (Herba Menthae arvensis) и корневища аира болотного (Rhizomata Acori calami), собранные в России (Ботанический сад ВИЛАР, Московская область, Краснодарский край) и Вьетнаме (окрестности г.Хошимин район 12) в 2009 - 2011 годах, а также образцы этих видов сырья, реализуемые через аптечную сеть в России и Вьетнаме. Сбор образцов осуществляли в местах, удаленных от крупных транспортных магистралей и промышленных предприятий, в период максимального накопления действующих веществ в соответствии с инструкциями по заготовке ЛРС.

Изучены настои из исследованных образцов сырья. Настои готовили по методике в соответствии с требованиями Государственной фармакопеи XI издания (ГФ XI). Всего исследовано 46 образцов сырья, 46 образцов настоев. При изучении минерального состава образцов проведено 736 элементоопределений.

Статистическая обработка результатов осуществлялась в соответствии с требованиями Государственной фармакопеи XI издания (ГФ XI).

Компонентный состав эфирных масел мяты и аира болотного изучали методом ТСХ на пластинках «Silufol» после детектирования 1% раствором ванилина и 10% спиртовым раствором серной кислоты; методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ГХ-МС) на приборе Focus GC с ISQ (Италия) с использованием кварцевой капиллярной колонки длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм с неподвижной фенилметилсилоксановой фазой толщиной пленки 0,25 мкм.

Исследования содержания тяжелых металлов (Cd, Pb, Cu, Zn) проводили методом инверсионной вольтамперометрии на твердом углеситалловом электроде с линейной разверткой потенциала, для испытаний использовали анализатор вольтамперометрический АВА-3 (зав. № 166, выпуск 2009 г., компания «Буревестник», Россия). Исследования минерального состава проводили на базе промышленно – санитарной лаборатории ФГБУЗ Государственный центр гигиены и эпидемиологии ФМБА России (зав. лабораторией Максименко Л.В.) при участии кандидата химических наук Алексеевой Н.А.

Разработка оптимальных условий пробоподготовки, валидация методики определения тяжелых металлов в ЛРС и настоях методом инверсионной вольамперометрии

Проведенные исследования показали, что подготовку проб ЛРС к анализу следует проводить комбинацией методов «сухой» и «мокрой» минерализации. Для каждого образца проводили подготовку двух параллельных проб и холостой пробы. В кварцевый стаканчик помещали навеску пробы массой около 0.500 г, добавляли 1 мл HNO3 конц. и высушивали на электроплитке при температуре 250°С досуха, затем стаканчик с остатком пробы помешали в муфельную печь, предварительно нагретую до 250 0С. Температуру муфельной печи постепенно повышали до 400 0С, увеличение температуры проводили на 50 0С через каждые 30 мин. Пробу выдерживали в муфельной печи в течение 1 часа при температуре 400 0С. После озоления кварцевый стаканчик с остатком пробы вынимали из муфельной печи и охлаждали. Если остаток пробы был темным, неоднородным по цвету, с темными частицами, то к охлажденному остатку добавляли 1 мл HNO3 конц., устанавливали стаканчик на электроплитку и выпаривали при 150°С досуха. После этой операции стаканчик вновь помещали в муфельную печь, нагретую до 400°С, и выдерживали в течение 1 часа. После повторного озоления пробы, если остаток был светлым, однородным по цвету, без темных частиц, то к охлажденному стаканчику с пробой добавляли 0,5 мл HNO3 конц., устанавливали на электроплитку и выпаривали при температуре 100 °С до влажных солей. Затем добавляли 2 мл воды очищенной, выпаривали на электроплитке при температуре 100°С до влажных солей, эту операцию проводили дважды. К охлажденному остатку пробы добавляли 5 мл фонового раствора - 0.05 моль/л HCl, выдерживали пробы в течение 20-30 мин., количественно переносили в мерные цилиндры и доводили объемы до 10 мл фоновым раствором.

Проведена валидация методики и определены параметры: повторяемость (RSD 6,4 – 10,6%); внутрилабораторная точность (RSD 7,26 – 15,49%); правильность (86,1 – 116,7%); специфичность (абсолютная погрешность: - 2,5 - 0,5 мкг/л); линейность и диапазон (критерий приемлемости Zn r2 = 0,9928, Cu r2 = 0,9905, Pb r2 = 0,9911, Cd r2 = 0,9926, правильность 90,67 – 123,33%); предел количественного определения Zn, Cu, Pb, Cd составил 1,0 мкг/л (мкг/кг) (RSD 6,65 – 56,34%, правильность 64,7 – 125,1%); надежность (r = 0 – 14%). Аттестационные испытания методики показали соответствие характеристик критериям приемлемости, что указывает на достоверность полученных результатов.

Определение тяжелых металлов в лекарственном растительном сырье

С использованием оптимизированной методики были определены концентрации тяжелых металлов в ЛРС. В траве мяты полевой (Вьетнам) они составили (в мг/кг): Zn 38.2±11.5 (24.6 – 63.2), Cu – 6.4±2.56 (4.56 – 8.81), Pb – 0.893±0.357 (0.61 – 1.26), Cd – 0.115±0.046 (0.035 – 0.232). В аптечных образцах травы мяты полевой (Вьетнам) было найдено (в мг/кг): Zn 23.9±7.17 (9.1 - 53.2), Cu – 6.91±2.76 (3.89 - 9.53), Pb – 0.884±0.354 (0.211 - 1.5), Cd – 0.067±0.027(0.016 - 0.176). Анализ полученных данных показал, что средняя концентрация Zn и Cd в цельном сырье была в 1.6 - 1.7 раза выше, чем в аптечных образцах. Средняя концентрация Cu и Pb в аптечном и цельном сырье были весьма близкие.

Концентрации тяжелых металлов листьях мяты перечной (Россия) найдены (в мг/кг): Zn 35.7±10.7 (9.4 – 102.7), Cu – 5.65±2.26 (2.52 – 7.79), Pb – 0.86±0.344 (0.209 – 2.69), Cd – 0.061±0.024 (0.021 – 0.13). В аптечных образцах найдено (в мкг/г) в измельченном сырье: Zn 21.2±6.36 (12.5 – 28.8), Cu – 9.24±3.7 (4.07 – 13.4), Pb – 0.392±0.157 (0.155 – 0.585), Cd – 0.033±0.013 (0.015 – 0.049); в фильтр-пакетах: Zn 23.9±7.2 (16.8 – 34.5), Cu – 6.99±2.8 (3.5 – 10.6), Pb – 0.284±0.113 (0.164 – 0.38), Cd – 0.041±0.016 (0.031 – 0.051). Среднее содержание Cu в измельченном сырье было выше по сравнению с другими образцами лишь на 24 – 39%. Средние концентрации тяжелых металлов в цельном сырье превышали содержание в других образцах: Zn в 1.5 - 1.7 раза, Pb в 2.2 - 3 раза, Cd в 1.5 - 1.8 раза.



Pages:   || 2 | 3 |
 

Похожие работы:







 
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.