авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 |

Фармакогностическое исследование представителей родов origanum l. и rhododendron l. флоры восточной сибири

-- [ Страница 4 ] --

Разработка рецептуры и стандартизация сбора «Бронхофит»

Разработка рецептуры грудного сбора «Бронхофит» (трава душицы 30,0; трава чабреца 20,0; листья подорожника 20,0; трава череды 20,0; плоды шиповника 10,0) проводилась на основе изучения сведений об этиологии и патогенезе заболеваний органов дыхания, состава биологически активных веществ растений, опыта их использования в академической и традиционной медицине. Оптимальное соотношение компонентов сбора устанавливали экспериментально по результатам фармакологического изучения вариантов сбора.

При изучении химического состава в сборе были обнаружены эфирное масло, флавоноиды, полисахариды, фенолкарбоновые кислоты, тритерпеновые соединения, аскорбиновая кислота, каротиноиды.

Методом хромато-масс-спектрометрии в составе эфирного масла было идентифицировано 55 компонентов. Основными компонентами являются p-цимен (24,75%), карвакрол (18,74%), -терпинен (10,01%), борнеол (9,94%), 1,8 цинеол (5,74%), тимол (5,27%), терпинеол-4-ол (4,46%), кариофиллен оксид (2,69%), камфен (1,38%) (рис. 6).

 Хроматограмма компонентного-7

Рис. 6. Хроматограмма компонентного состава эфирного масла сбора «Бронхофит»

Содержание фенольных соединений исследовали методом ВЭЖХ на хроматографе «GILSTON» (рис. 7).

 Хроматограмма спиртового-8

Рис. 7. Хроматограмма спиртового извлечения сбора «Бронхофит»

В составе сбора идентифицировали 16 фенольных соединений: флавоноиды – рутин, лютеолин-7-глюкуронид, лютеолин, нарингенин, дигидрокверцетин, кверцетин, кемпферол, апигенин; кислоты – галловая, хлорогеновая, феруловая, коричная; кумарины – дигидрокумарин, эскулетин; танин, эпикатехин. Методом ТСХ установили содержание лютеолин-7-глюкозида, космосиина, кофейной кислоты.

С помощью аминокислотного анализатора в сборе идентифицировали 17 аминокислот, среди них 8 незаменимых аминокислот.

При изучении элементного состава в сборе было обнаружено 9 макро- и 54 микроэлемента. Среди них содержатся эссенциальные для иммунной системы микроэлементы: Fe, I, Cu, Zn, Co, Cr, Mo, Se, Mn, Li.

По содержанию токсичных элементов сбор «Бронхофит» соответствует ПДК, указанным в СанПиН 2.3.2.1078-01 от 2001 года: свинца не более 6 мг/кг (найдено 1,6 мг/кг), мышьяка не более 0,5 мг/кг (найдено 0,16 мг/кг), кадмия не более 2 мг/кг (найдено 0,044 мг/кг), ртути не более 0,1 мг/кг (найдено 0,018 мг/кг).

В анализируемом сборе было найдено экстрактивных веществ, извлекаемых 30% спиртом этиловым 37,77±1,9%, эфирного масла – 0,12%, дубильных веществ (общие полифенолы) 9,57±0,28%, полисахаридов (гравиметрическим методом) – 7,83±0,28%, флавоноидов – 1,28±0,07%, аскорбиновой кислоты -109±0,10 мг%, органических кислот – 2,83±0,18%, эфирного масла – 0,12%.

Стандартизацию сбора, исходя из количественного содержания БАВ и их фармакологической активности, предложено проводить по содержанию эфирного масла, флавоноидов и полисахаридов, как групп веществ, обусловливающих фармакотерапевтическое действие.

В ходе проведения работы по стандартизации были определены внешние и анатомо-диагностические признаки сбора «Бронхофит». Предложены качественные реакции обнаружения флавоноидов (проба Chinoda), полисахаридов и восстанавливающих сахаров.



Количественное содержание эфирного масла в сборе предлагается проводить методом 2 (ГФ XI) в навеске 25 г со степенью измельченности сырья 3 мм, время перегонки 2 часа.

Для количественного определения суммы флавоноидов нами рекомендован спектрофотометрический метод. При изучении спектральной характеристики спиртового извлечения сбора в присутствии алюминия хлорида установлено, что максимум поглощения находится при 385 нм и совпадает с максимумом ГСО лютеолин-7-глюкозида, который был использован нами в качестве стандартного образца.

Было установлено, что оптимальными параметрами экстракции сырья являются: 60% спирт этиловый, измельченность сырья 1 мм, соотношение сырья и экстрагента 1:100, время экстракции 60 мин. Количество комплексообразователя 1% раствора алюминия хлорида 1 мл, комплекс становился стабильным через 40 минут. Относительная ошибка среднего результата с достоверной вероятностью 95% не превышала ±5,47%.

Для количественного определения суммы полисахаридов предложен спектрофотометрический метод с использованием кислоты пикриновой. При разработке методики были изучены оптимальные условия экстракции и осаждения водорастворимого полисахаридного комплекса. Размер частиц сырья должен быть 1 мм, соотношение сырья и экстрагента 1:25, время экстракции 2ч, соотношение извлечения и 95% спирта этилового, необходимого для осаждения полисахаридов 1:3. Время кислотного гидролиза суммы полисахаридов 2 ч.

Относительная ошибка среднего результата с достоверной вероятностью 95% не превышала ±3,24%. Валидационная оценка методик количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин-7-глюкозид и суммы полисахаридов показала их соответствие критериям правильность, точность, прецизионность, специфичность и линейность.

На 5 сериях сбора «Бронхофит» были определены числовые показатели и нормы качества, установлен срок годности сбора (табл. 9).

Таблица 9

Требования и нормы на сбор «Бронхофит», включенные

в проект ФСП 42-0048-55564631-08

Показатели Нормы
Качественные реакции: Флавоноиды (проба Chinoda) Полисахариды Восстанавливающие сахара Красное окрашивание Появление осадка Оранжево-красный осадок
Влажность, %, не более 13
Эфирное масло, %, не менее 0,08
Сумма флавоноидов, %, не менее 1,2
Сумма моносахаров после кислотного гидролиза полисахаридов, % не менее 3,5
Зола общая, %, не более 10
Зола, нерастворимая в 10% р-ре кислоты хлористоводородной, %, не более 3
Побуревших и почерневших частей сбора, %, не более 5
Частиц, не проходящих сквозь сито диаметром 7 мм, %, не более 5
Частиц, проходящих сквозь сито диаметром 0,5 мм, %, не более 10
Органическая примесь, %, не более 1
Минеральная примесь, %, не более 1
Срок годности 2

Разработка и стандартизация фитоэкстракционных средств из сбора «Бронхофит», душицы обыкновенной и рододендрона Адамса

а) «Бронхофит» экстракт сухой

Растительные сборы используются в виде водных извлечений, которые имеют небольшой срок годности и неточны в дозировании. Для увеличения сроков годности и точности дозирования удобны для применения сухие экстракты, поэтому из сбора «Бронхофит» нами предложена технология получения экстракта сухого. Экспериментально были подобраны оптимальные условия экстракции: измельченность сырья душицы, чабреца, подорожника, череды >1,02,0 мм, плодов шиповника >0,51,0; экстрагент 30% спирт этиловый, соотношение сырья и экстрагента 1:12, температура экстракции 600С, время экстракции на 1-ой ступени 2 часа, на 2-ой - 1,5 часа, на 3-ей – 1 час. Эффективность экстракции по флавоноидам составляла 66%, по экстрактивным веществам - 86,42%.

Для определения подлинности экстракта сухого были разработаны методики качественных реакций обнаружения флавоноидов, полисахаридов и восстанавливающих сахаров.

Разработка методик количественного определения суммы флавоноидов и суммы полисахаридов проводилась с учетом принципов сквозной стандартизации. Поэтому в их основу были положены методики количественного определения, рекомендованные для стандартизации сбора «Бронхофит». Относительная ошибка методики количественного определения суммы флавоноидов не превышала ±3,90% (табл. 10), а суммы полисахаридов - ±3,93%. Отсутствие систематической ошибки в указанных методиках подтверждено «опытами с добавками» ГСО лютеолин-7-глюкозида и РСО глюкозы.

Таблица 10

Метрологические характеристики методик количественного определения суммы флавоноидов в экстрактах (Р 95%)

Экстракт Статистические параметры
f
jpg">
S t(P,f)
«Бронхофит» экстракт сухой 8 2,31 0,0380 2,36 0,09 ±3,90
душицы экстракт жидкий 8 0,78 0,0073 2,36 0,017 ±2,18
рододендрона Адамса экстракт сухой 8 6,85 0,0930 2,36 0,22 ±3,21
рододендрона Адамса экстракт жидкий 8 0,84 0,0090 2,36 0,02 ±2,38

Определение показателей и норм качества проводили на 5 сериях экстракта сухого. Сроки годности экстракта сухого устанавливали методом ускоренного старения. Разработанные показатели и нормы качества экстракта сухого включены в проект ФСП (табл. 11).

б) душицы экстракт жидкий

Ковтун Е.В. в 1999 году была предложена технология получения душицы экстракта жидкого (1:2,6) с использованием 40% спирта этилового.

Таблица 11

Показатели и нормы качества «Бронхофит» экстракта сухого, включенные в проект ФСП 42-0050-55564631-08

ПОКАЗАТЕЛИ МЕТОДЫ НОРМЫ
Описание Визуальный Порошок коричневого или темно-коричневого цвета, со специфическим ароматным запахом Гигроскопичен
Подлинность Качественные реакции: 1. на флавоноиды (проба Chinoda) 2. на полисахариды 3. на восстанавливающие сахара Красное окрашивание Хлопьевидный осадок Красно-оранжевый осадок
Влага ГФ XI, вып. 2. с. 160 Не более 5%
Количественное определение: Сумма флавоноидов в пересчете на лютеолин-7-глюкозид Сумма моносахаров после кислотного гидролиза полисахаридов Спектрофотометрия Спектрофотометрия Не менее 2,0% Не менее 9,0%
Срок годности 2 года

В данном экстракте жидком нормировалось содержание сухих веществ не менее 9,5%, флавоноидов не менее 0,3%. До сих пор душицы экстракт жидкий (1:2,6) не внедрен в медицинскую практику.

Нами предлагается технология получения душицы экстракта жидкого (1:1), с использованием оптимального экстрагента 70% спирта этилового. По результатам изучения технологических параметров травы душицы предложено проводить получение экстракта жидкого методом реперколяции с завершенным циклом в батарее из 6 перколяторов, при соотношении сырья и экстрагента на ступени экстракции 1:3,5. Время настаивания 8,16 часов.

В составе экстракта жидкого было обнаружено присутствие флавоноидов, фенолкарбоновых кислот, дубильных веществ. Методом ВЭЖХ идентифицировали флавоноиды: лютеолин, лютеолин-7-глюкуронид.

Для стандартизации душицы экстракта жидкого нами предложены одноименные методики, используемые для анализа сырья душицы обыкновенной (качественная реакция обнаружения флавоноидов, тонкослойная хроматография, методика количественного определения суммы флавоноидов). Относительная ошибка среднего результата при 9 независимых определениях не превышала ±2,18% (табл. 10). Отсутствие систематической ошибки методики подтверждено «опытами с добавками» ГСО лютеолина.

Теоретически рассчитаны и экспериментально подтверждены на 5 сериях экстракта показатели и нормы качества душицы экстракта жидкого (1:1), которые включены в проект ФСП (табл.12).

Таблица 12

Показатели и нормы качества душицы экстракта жидкого

ПОКАЗАТЕЛИ МЕТОДЫ НОРМЫ
Описание Визуальный Жидкость коричневого цвета, ароматного запаха, вкус слегка вяжущий
Подлинность 1.Качественная реакция на флавоноиды (проба Chinoda) 2. ТСХ Красное окрашивание Обнаруживается 3 пятна
Сухой остаток Гравиметрический Не менее 16%
Плотность Не более 1,0200
Количественное определение: Сумма флавоноидов в пересчете на лютеолин Спектрофотометрия Не менее 0,5%
Срок годности 2 года




в) рододендрона Адамса экстракт сухой

Из побегов рододендрона Адамса предложена технология получения экстракта сухого. Экспериментально определены оптимальные параметры экстракции: измельченность сырья >1,02,0 мм, экстрагент 60% спирт этиловый, соотношение сырья и экстрагента 1:12, температура 45-500С, время на 1-ой ступени – 120 минут, на 2-ой - 75 минут, на 3-ей – 30 минут.

В составе экстракта были обнаружены дубильные вещества, флавоноиды, кумарины, простые фенольные соединения. Методом ВЭЖХ идентифицировали флавоноиды: кверцетин и гиперозид. В основу методик качественного обнаружения флавоноидов и их количественного определения были положены методики, используемые для анализа сырья рододендрона Адамса.

Статистическая обработка результатов количественного определения показала, что относительная ошибка среднего результата составляет ±3,21% (табл. 10). Отсутствие систематической ошибки методики подтверждено «опытами с добавками» ГСО кверцетина.

На 5 сериях экстрактов были установлены показатели и нормы качества рододендрона Адамса экстракта сухого, которые включены в проект ФСП (табл. 13).

г) рододендрона Адамса экстракт жидкий

По результатам изучения технологических характеристик сырья рододендрона Адамса разработана технология получения экстракта жидкого (1:2) методом реперколяция с завершенным циклом в батарее из 6 экстракторов. Оптимальные условия экстракции: измельченность сырья 5-

Таблица 13

Показатели и нормы качества рододендрона Адамса экстракта сухого

ПОКАЗАТЕЛИ МЕТОДЫ НОРМЫ
Описание Визуальный Порошок коричневого или темно-коричневого цвета, своеобразного ароматного запаха Гигроскопичен
Подлинность 1. Качественная реакция на флавоноиды (проба Chinoda) 2. ТСХ Красное окрашивание Обнаруживается 3 пятна
Количественное определение: Сумма флавоноидов в пересчете на кверцетин Спектрофотометрия Не менее 5,5%
Влага ГФ XI, вып. 2. с. 160 Не более 5%
Срок годности 2 года

Таблица 14

Показатели и нормы качества рододендрона Адамса экстракта

жидкого

ПОКАЗАТЕЛИ МЕТОДЫ НОРМЫ
Описание Визуальный Жидкость коричневого цвета, ароматного запаха
Подлинность 1.Качественная реакция на флавоноиды (проба Chinoda) 2.ТСХ Красное окрашивание Обнаруживается 3 пятна
Сухой остаток Гравиметрический Не менее 11%
Плотность Не более 0,9830
Количественное определение: Сумма флавоноидов в пересчете на кверцетин Спектрофотометрия Не менее 0,7%
Срок годности 2 года


Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 |
4
| 5 |
 
Авторефераты диссертаций  >>  Авторефераты по Фармацевтике

Похожие работы:






наверх


 
<<  ГЛАВНАЯ   |   КОНТАКТЫ
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.