авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |

Фармакогностическое исследование представителей родов origanum l. и rhododendron l. флоры восточной сибири

-- [ Страница 3 ] --

При изучении распределения флавоноидов спектрофотометрическим, а дубильных веществ - перманганатометрическим методами установлено, что в надземных органах душицы обыкновенной культивируемой и дикорастущей наибольшее количество этих соединений накапливалось в листьях.

Изучение динамики накопления БАВ по фазам вегетации показало, что в период цветения отмечается не только максимальное содержание эфирного масла, но также флавоноидов и дубильных веществ. Душица обыкновенная, культивируемая в условиях Восточной Сибири по содержанию эфирного масла, флавоноидов и дубильных веществ равноценна душице обыкновенной дикорастущей и может быть рекомендована для использования в медицинской практике (табл. 5).

Таблица 5

Количественное содержание БАВ в траве душицы обыкновенной в период цветения из различных мест сбора

Место сбора Содержание, в %
Эфирное масло Флавоноиды Дубильные вещества
общие полифенолы осаждаемые раствором желатины
Иркутская обл. (культивируемая) 0,13 1,65±0,06 13,53±1,30 5,12±0,16
Иркутская обл. (дикорастущая) 0,10 1,55±0,04 12,33±1,38 4,66±0,15
Новосибирская обл. (дикорастущая) 0,12 1,45±0,03 10,17±0,89 4,12±0,18
Ставропольский край (дикорастущая) 0,10 1,66±0,07 13,63±0,29 5,34±0,20

Флавоноиды кверцетин, гиперозид, дигидрокверцетин-3--L-арабинозид содержались во всех надземных органах исследуемых видов рододендронов. Накопление авикулярина было характерно для листьев этих растений, листья рододендрона Адамса содержали также азалеатин-3--D-глюкозид. Рутин был обнаружен в листьях рододендронов даурского, золотистого и Адамса.

В цветках рододендрона даурского накапливается цианидин-3-рамноглюкозид, в листьях рододендрона мелколистного цианидин-3--L-арабинозид, а в цветках - хризантемин.

Цветки рододендрона даурского содержали 3,58% антоцианов, листья рододендрона мелколистного – 2,87%, цветки - 2,00%, а стебли - 0,75% антоцианов.

В исследуемых видах рододендронов максимальное количество дубильных веществ и флавоноидов накапливается в цветках, листьях и стеблях текущего года (рис. 5).

 Рис 5. Динамика накопления флавоноидов и-5

 Рис 5. Динамика накопления флавоноидов и-6

Рис 5. Динамика накопления флавоноидов и дубильных веществ (общие полифенолы) в надземных органах рододендронов: I – Адамса, II- мелколистного, III- даурского, IV- золотистого.



Ц- цветки, Л1 – листья первого года жизни, Л2 – листья второго года жизни, С1 – стебли текущего года, С2- стебли второго года жизни, СО – стебли одревесневшие.

Максимальное содержание дубильных веществ и флавоноидов в надземных органах рододендронов приходилось на период цветения и плодоношения, снижение же их количества было характерно в период завязывания и созревания плодов. Только у рододендрона золотистого максимум содержания простых фенолов наблюдался в фазу завязывания и созревания плодов. В качестве лекарственного сырья рододендронов Адамса, даурского и мелколистного нами рекомендуется использовать побеги текущего года, у рододендрона золотистого - листья 2 и 3 года жизни. Сроки заготовки сырья - период плодоношения, когда заканчивается основной прирост побегов текущего года жизни. Данные рекомендации способствуют быстрому восстановлению зарослей после заготовки сырья.

В значительном количестве накапливают дубильные вещества рододендроны золотистый и мелколистный, простые фенольные соединения - рододендроны золотистый и даурский, флавоноиды и эфирное масло (более 0,8%) накапливают рододендроны Адамса, мелколистный и даурский (табл. 6).

Таблица 6

Количественное содержание БАВ в надземных органах рододендронов в период плодоношения

Вид Место сбора Содержание в %
Эфирное масло Флаво-ноиды Простые фенолы Дубильные вещества
общие полифенолы осаждаемые раствором желатины
Р. Адамса (побеги) Бурятия, окр. п. Монды 1,20±0,09 2,19±0,025 4,27±0,29 6,24±0,10 4,30±0,10
Р. мел-колистный (побеги) Иркутская обл. окр. п. Култук 1,02±0,10 1,72±0,09 5,58±0,15 9,68±0,53 7,34±0,17
Р. даурский (побеги) Иркутская обл., окр. г. Тулуна 0,08±0,01 1,82±0,05 10,20±0,35 4,97±0,24 2,85±0,11
Р. золотистый (листья) Иркутская обл., Нижнеу-денский р-он следы 1,19±0,11 10,66±1,13 15,28±0,76 11,76±0,57

Стандартизация и разработка нормативной документации на сырье душицы обыкновенной и рододендрона Адамса

Исследования заключаются в разработке методик качественного и количественного определения основных групп БАВ, отвечающих за фармакологическую активность, определении числовых показателей, а также макро- и микроскопических признаков сырья.

Стандартизация сырья душицы обыкновенной проводится в соответствии с ГФ XI по содержанию эфирного масла (для цельного сырья не менее 0,1 %, для измельченного сырья - не менее 0,08 %).

По результатам фармакологических исследований, проведенных нами и другими исследователями, установлено, что флавоноиды душицы обыкновенной обладают противовоспалительной, антиоксидантной, спазмолитической активностью, что обеспечивает широту фармакотерапевтического влияния. Для повышения качества сырья душицы обыкновенной нами предложено проводить стандартизацию по дополнительному показателю – содержанию суммы флавоноидов.

Разработаны и предложены методики качественного обнаружения флавоноидов: проба Chinoda; тонкослойная хроматография на пластинках «Силуфол» в системе хлороформ-этанол-вода (52:28:7) с детекцией основных флавоноидных соединений лютеолина, лютеолин-7-глюкуронида и космосиина по окраске пятен и значению Rs с использованием ГСО лютеолина.

Количественное содержание суммы флавоноидов предлагается проводить спектрофотометрическим методом. При добавлении к спиртовому извлечению душицы обыкновенной раствора алюминия хлорида в УФ спектре появляется максимум поглощения при 400 нм, который совпадает с максимумом поглощения спектра лютеолина в присутствии алюминия хлорида, поэтому в качестве стандартного образца нами был использован ГСО лютеолина. Было установлено, что оптимальным экстрагентом является 60% спирт этиловый, максимальный выход флавоноидов из сырья с размером частиц 1-2 мм достигается через 90 минут с последующим наступлением равновесия, соотношение сырья и экстрагента 1:50, устойчивое окрашивание извлечения наступало при добавлении 2 мл 2% раствора алюминия хлорида через 30 минут.

Относительная ошибка среднего результата с достоверной вероятностью 95% не превышала ±5,52%. Оценка основных валидационных параметров предлагаемой методики позволила сделать вывод о ее соответствии критериям по показателям: правильность, прецизионность, специфичность и линейность.

Экспериментальные исследования по изучению стабильности сырья душицы по содержанию суммы флавоноидов показали, что количество флавоноидов не снижается в течение 2-х лет наблюдения, что соответствует срокам годности сырья травы душицы (ФС 55).Таким образом, в результате проведенных исследований нами предложено проводить стандартизацию сырья душицы обыкновенной, наряду с определением эфирного масла, по содержанию флавоноидов (табл. 7).

Для анализа сырья рододендрона Адамса были разработаны и обоснованы методики качественной реакции и тонкослойной хроматографии флавоноидов (с детекцией основных соединений – кверцетина и гиперозида).

Стандартизацию сырья рекомендовано проводить по содержанию эфирного масла и флавоноидов. Содержание эфирного масла в сырье предлагается проводить методом 1 (ГФ XI) в навеске сырья 25 г при степени измельченности сырья 3 мм, время перегонки - 2 ч.

Разработана методика спектрофотометрического количественного определения суммы флавоноидов. Максимумы поглощения извлечения из побегов рододендрона Адамса и спиртового раствора кверцетина при добавлении к ним алюминия хлорида совпадает при длине волны 430 нм, поэтому ГСО кверцетина был выбран нами в качестве стандартного образца.

Установлены оптимальные параметры экстракции сырья побегов рододендрона Адамса: размер частиц сырья 1 мм, соотношение сырья и экстрагента 1:100, экстрагент – 90% спирт этиловый, содержащий 1% HCl, время экстракции 90 мин. Устойчивое окрашивание извлечения наступает через 30 минут при добавлении 1 мл 1% алюминия хлорида.

Таблица 7

Показатели и нормы качества травы душицы обыкновенной

(проект изменения № 2 к ФС 55 «Трава душицы»)

Разделы ФС Метод анализа Нормы
Качественные реакции
Флавоноиды Качественная реакция (проба Chinoda) Красное окрашивание
Хроматография (ТСХ) Обнаруживается 3 пятна
Числовые показатели Раздел дополнен нормой содержания суммы флавоноидов
Количественное определение
Цельное сырье
Эфирное масло, %, не менее Метод 2, ГФ XI 0,1
Сумма флавоноидов, %, в пересчете на лютеолин, не менее Спектрофото-метрия 1,0
Измельченное сырье
Эфирное масло, %, не менее Метод 2, ГФ XI 0,08
Сумма флавоноидов, %, в пересчете на лютеолин, не менее Спектрофото-метрия 1,0

Примечание: жирным шрифтом в таблице выделены показатели и нормы, которые для данного вида лекарственного растительного сырья предложены впервые

Относительная ошибка среднего результата с достоверной вероятностью 95% не превышала ±5,20%. Валидационная оценка методики количественного определения суммы флавоноидов в побегах рододендрона Адамса показала соответствие критериям правильность, прецизионность, специфичность и линейность. Были установлены также другие числовые показатели, нормы качества и сроки годности сырья (табл. 8).

Душица обыкновенная является пластичным видом, поэтому были изучены микроскопические признаки душицы обыкновенной, выращенной в условиях Восточной Сибири. Исследования показали идентичность анатомического строения душицы обыкновенной культивируемой дикорастущим образцам сырья и соответствие их разделу «Микроскопия» нормативной документации (ФС 55).





Для определения анатомо-диагностических признаков сырья рододендрона Адамса, было проведено сравнительное анатомическое изучение надземных органов других видов рододендронов, произрастающих в сибирском регионе (рододендронов даурского, золотистого и мелколистного). В результате установлено, что микродиагностика побегов рододендрона Адамса может проводиться по листьям и почечным чешуйкам, т. к. в их строении имеются отличительные признаки от близких видов.

Таблица 8

Требования и нормы на сырье «Рододендрона Адамса побеги», включенные в проект ФСП 42-0049-55564631-08

ПОКАЗАТЕЛИ НОРМЫ
цельное измельченное
Качественная реакция (проба Chinoda) Красное окрашивание
Хроматография (ТСХ) Обнаруживается 3 пятна
Сумма флавоноидов, в пересчете на кверцетин %, не менее 1,6 1,6
Эфирное масло, %, не менее 0,1 0,1
Влажность, %, не более 13 13
Зола общая, %, не более 4 4
Зола, нерастворимая в 10% р-ре кислоты хлористоводородной, %, не более 1 1
Листьев пожелтевших, %, не более 5 5
Ветвей с буровато-серой корой, %,не более 10 10
Частиц, не проходящих сквозь сито диаметром 5 мм, %, не более 5
Частиц, проходящих сквозь сито диаметром 0,5 мм, %, не более 10
Органическая примесь, %, не более 1 1
Минеральная примесь, %, не более 0,5 0,5
Срок годности 2 года 2 года


Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |
 

Похожие работы:










 
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.